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周井祥: 作品数：56 被引量：120H指数：7; 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金吉林省自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>

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锦鲤疱疹病毒CJ株ORF25基因的克隆及生物信息学分析被引量：7: 2012年; 为了解锦鲤疱疹病毒中国吉林株(KHV-CJ)ORF25蛋白的结构特征和进化关系,采用框镜鲤尾鳍原代细胞增殖KHV-CJ,提取其DNA,经PCR扩增,获得ORF25基因,将其克隆到pMD18-T载体中,构建重组质粒。应用生物信息学方法初步分析KHV-CJ ORF25基因的结构和功能,并与GenBank上已公布的三株KHV构建系统进化树。结果显示,获得了长1824 bp的ORF25基因,编码608个氨基酸;预测ORF25基因编码蛋白的理论分子质量为66825.44 Da,等电点为7.947;抗原表位预测显示抗原性良好;编码蛋白存在6个N-糖基化位点、25个O-糖基化位点和28个磷酸化位点;系统进化树分析显示,与锦鲤疱疹病毒美国株属同一分支。; 周井祥李新伟朱霞王好吕文亮; 关键词：锦鲤疱疹病毒生物信息学分析

一种红螯螯虾稻田养殖用喂食装置: 本实用新型涉及稻田养虾技术领域，尤其是一种红螯螯虾稻田养殖用喂食装置，包括箱体、进料口和出料口，进料口和出料口均设在箱体上，还包括：喂食机构，所述喂食机构设在所述箱体上，所述喂食机构包括转动杆、螺旋叶片、电机、多个连接杆...; 王秋举吴旻刘洪健万继武赵春雨周井祥

锦鲤疱疹病毒-CJ株ORF136基因的克隆及生物信息学分析: 2015年; 为了了解锦鲤疱疹病毒中国吉林株(KHV-CJ)ORF136蛋白的结构特征和进化关系,试验用锦鲤尾鳍原代细胞增殖KHV-CJ,提取DNA,经PCR扩增获得ORF136基因,将其克隆到p MD18-T载体中构建重组质粒,应用生物信息学方法初步分析KHV-CJ ORF136基因的结构和功能,并与Gen Bank上已公布的KHV进行比较。结果表明:ORF136有2个跨膜区;抗原表位预测显示,抗原性良好;结构预测显示,可能存在1个潜在的N-糖基化位点和19个潜在的O-糖基化位点;BLAST比对分析显示,KHV-CJ ORF136与KHV-U ORF136和KHV-I ORF136的亲缘关系最近,与KHV-GZ11ORF136的亲缘关系较近,与KHV-GZ10 ORF136、KHV-QY08 ORF136和KHV-J ORF136亲缘关系最远,KHV-CJ可能来源于欧美国家和以色列。说明ORF136基因可能具有较好的免疫原性。; 刘春杰杨丽华王好周井祥; 关键词：生物信息学分析克隆免疫原性

猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白基因疫苗的构建及在小鼠的免疫试验被引量：11: 2006年; 从PRRSV野毒株细胞培养上清提取RNA,用RT-PCR的方法扩增出M蛋白基因片段(525 bp),并将该基因克隆到pMD18-T载体,测序结果与PRRSV BJ-4等株同源性最接近.以pIRES-neo为载体,构建表达PRRSV M蛋白的基因疫苗,按100μg/只的DNA量免疫小鼠,二免后二周抗体水平显著高于同期免疫空载体pIRES-neo组,于免疫后14、28、42天后均能检测到较高的细胞免疫水平.这说明表达M蛋白的基因疫苗能够刺激机体产生免疫应答.; 薛江东马国文袁宝周井祥扈荣良; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白基因疫苗免疫

锦鲤疱疹病毒ORF27基因的原核表达及免疫原性研究: 2016年; 克隆锦鲤疱疹病毒(KHV)ORF27基因,构建重组质粒p ET32a-ORF27,并用IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测获得含his标签大小为27.3ku的蛋白条带。蛋白纯化浓缩后免疫小鼠,不同时间采血收集血清用间接ELISA检测抗体水平。结果显示:注射表达蛋白的小鼠血液中可检测到KHV的特异性抗体,在21 d左右抗体水平达到最大值,而对照组小鼠没有检测到抗体。; 袁海延刘艳辉王好于慧张瑞雪马悦周井祥; 关键词：锦鲤疱疹病毒原核表达免疫原性

一株锦鲤疱疹病毒的分离与鉴定被引量：34: 2011年; 本实验对患病鲤鱼进行病毒分离及鉴定,将表现典型锦锂疱疹病毒(KHV)病症状的鲤鱼肾细胞与单层框镜鲤鱼鳍细胞(KFC)共培养,5d～6d后出现典型的KHV细胞病变,即细胞体积增大并出现空泡化;在电镜下观察到典型的KHV病毒粒子;并应用PCR方法扩增获得KHVORF25基因的849bp基因片段,连接至pMD18-T载体中,经酶切鉴定后序列分析表明,与GenBank登录的3株KHV同源性均为99.9%,命名为KHV-cj。基因进化比较显示,与KHV-J株关系较近。将病毒培养物(10-6.75TCID50)腹腔注射接种实验鱼可使其100%发病,并且症状和病理变化与自然感染KHV的鱼一致,死亡率为75%。表明本研究在国内首次分离到KHV。; 朱霞李新伟王好吕文亮周井祥; 关键词：锦鲤疱疹病毒

锦鲤疱疹病毒-CJ株ORF124基因的克隆及生物信息学分析被引量：3: 2013年; 为研究我国锦鲤疱疹病毒的基因背景信息,从锦鲤疱疹病毒中国吉林株(KHV-CJ株)获得ORF124基因,应用生物信息学方法分析KHV-CJ株ORF124基因结构和功能,并与Genbank上已公布的三株KHV进行比较分析。结果显示,ORF124基因的理论分子质量为31221.96 Da,KHV-CJ株与其他三株KHV同源性均为99%;信号肽切割部位最可能位于24位的T(苏氨酸)和25位的V(缬氨酸)氨基酸之间;ORF124基因无跨膜区;氨基酸序列不存在潜在的N-糖基化位点、11个潜在的O-糖基化位点和7个磷酸化位点。该蛋白的表面抗原决定簇位点区域广泛、峰值高,预示该基因可作为基因工程疫苗的重要候选基因。; 周井祥王好吕文亮李新伟; 关键词：锦鲤疱疹病毒生物信息学分析

蓝狐源兔脑炎微孢子虫的分离与PCR鉴定: 2020年; 为了对吉林省九台地区的发病蓝狐进行兔脑炎微孢子虫虫株的分离和进一步鉴定,试验从发病蓝狐采集脑组织病料,进行虫株的分离、培养及染色,同时对分离虫株进行了PCR鉴定和序列分析。结果表明:在脑组织滤液中分离得到微孢子虫,并命名为JL株。革兰氏染色镜检可观察到虫体染色呈阳性,呈明显的串珠样排列;改良马松三色染色进一步观察有明显红色、浅红色着色。PCR检测鉴定到转录间隔1区(ITS1)基因、极管蛋白(PTP)2基因和PTP4基因。分离的微孢子虫JL株的序列与GenBank上登录的兔脑炎微孢子虫的同源性在99%以上,并且ITS1基因5′-GTTT-3′重复4次,分离的虫株为兔脑炎微孢子虫Ⅲ型。说明吉林省九台地区发病蓝狐感染的是兔脑炎微孢子虫Ⅲ型。; 李志王好周井祥; 关键词：PCR鉴定

感染锦鲤疱疹病毒的鲤鱼免疫相关分析被引量：1: 2017年; 锦鲤疱疹病毒能在宿主体内持续性潜伏感染,被感染的鲤鱼会产生相应的免疫应答来抵抗病毒侵袭。笔者概述了被感染鲤鱼的抗锦鲤疱疹病毒的免疫应答及参与免疫的细胞因子表达水平及相互作用,从免疫学角度论述了锦鲤疱疹病毒与被感染鲤鱼间的相互作用关系。; 黄东东于慧李改娟杜晓燕夏克力周井祥刘艳辉; 关键词：锦鲤疱疹病毒免疫调节因子

锦鲤疱疹病毒-CJ株ORF126基因的原核表达及免疫试验研究被引量：2: 2014年; 为了研究能有效预防锦鲤疱疹病毒的疫苗,选取了锦鲤疱疹病毒膜糖蛋白基因ORF126并构建重组质粒p ET32aORF126,SDS-PAGE检测获得含his标签大小为49.9 k Da的蛋白条带。蛋白纯化后免疫鲤鱼,采集不同天数血清,用间接ELISA检测抗体水平。结果显示,用10μg/尾、20μg/尾和40μg/尾的蛋白免疫后均可检测到KHV的抗体,3者之间的抗体水平差异不显著(P>0.05)。; 王好王秋举刘艳辉张雅斌吕文亮周井祥; 关键词：锦鲤疱疹病毒原核表达免疫原性

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