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周智: 作品数：37 被引量：63H指数：4; 供职机构：中国动物疫病预防控制中心更多>>; 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划科技基础性工作专项更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学经济管理更多>>

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猪圆环病毒2型10JS-2株的分离与全基因组序列分析被引量：4: 2012年; 本试验从江苏某猪场采集猪血清,进行猪圆环病毒2型(PCV2)的检测和分离,根据GenBank中登录的PCV2全基因组序列,设计1对特异性引物,扩增PCV2全基因组,并且进行序列测定和分析。发现一株PCV2 10JS-2的基因组全长为1779nt,在病毒复制起始区域含有11个碱基的插入。在GenBank中对含有11个碱基插入的毒株序列进行BLAST发现,有两株PCV2(AY321993和EF565360)也有11个碱基的插入,但是与10JS-2比较,插入的碱基和插入的位置不同。遗传进化分析显示10JS-2属于PCV2a基因型,AY321993和EF565360属于PCV2b基因型,因此推断10JS-2可能是由PCV2a基因型的毒株在复制起始区域发生碱基插入形成的。这是首次发现此类PCV2毒株。; 蔡林胡冬梅李晓霞汪葆玥韩雪倪建强周智遇秀玲翟新验王文良田克恭; 关键词：猪圆环病毒2型全基因组序列

猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备和鉴定: 2012年; 目的制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以纯化的PRRSV全病毒抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体,并测定其免疫球蛋白亚类、效价和特异性。结果成功获得2株能稳定分泌抗PRRSVM蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞,命名为3C3、3D2,经鉴定亚类均为IgG2a、kappa链。2株单克隆抗体腹水ELISA效价达105～107,IPMA效价达1:2560～1:10240,与猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒等无交叉反应。结论获得特异性针对猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体,为研究该病的快速诊断技术奠定基础。; 曹振邓小雨张倩倪建强周智遇秀玲赵德明田克恭; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验

猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲型、美洲型双重微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲型、美洲型双重微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒。本发明提供了的引物探针组合由LV‑F1R1P1和VR2332‑F1R1P1组成；LV‑F1R1P1由LV‑F1、LV‑R1和LV‑...; 原霖宋晓晖王传彬周智汪葆玥杨林吴佳俊倪建强韩焘訾占超王晓英毕一鸣王静陈亚娜

5′端非病毒核苷酸对猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆拯救的影响: 2016年; 为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)5′端非病毒核苷酸对感染性克隆拯救的影响,优化PRRSV反向遗传操作平台,本试验构建了含有CMV启动子的PRRSV JXA1-R株全长克隆质粒,在CMV启动子的下游引入锤头核酶序列,并在PRRSV基因组的5′端上游和锤头核酶下游之间引入非病毒核苷酸,分别构建成5′端含有非病毒核苷酸GG和GCTAGC的PRRSV全长感染性cDNA克隆Pgg-PRRSV和PNhe-PRRSV。新构建的两株克隆质粒直接转染BHK-21细胞拯救,48h后用间接免疫荧光检测病毒M蛋白,结果表明两株克隆均可拯救成活,测定Pgg-PRRSV和PNhe-PRRSV转染上清的病毒毒价分别为3.0和1.25TCID50/mL,拯救病毒在Marc-145细胞上传3代后均稳定在6.5TCID50/mL,病毒滴度无明显差异。本研究成功构建了两株5′端上游含有非病毒核苷酸的PRRSV基因组全长感染性cDNA克隆,表明PRRSV的5′端上游含有两个非病毒核苷酸GG拯救效率较高,且5′端的病毒外源核苷酸对拯救的影响仅存在于拯救的最初阶段。; 韩焘周智赵柏林原霖翟新验; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆拯救

2009年我国猪群中猪圆环病毒2型感染情况调查被引量：8: 2012年; 为了解我国猪群中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)的感染情况,分析感染与猪年龄的关系,本试验于2009年在我国28个省市的71个中小规模场、22个屠宰场和62家散养户采集了2 905份猪血清样品,用PCR法对PCV2进行检测。结果显示,检出阳性血清429份,阳性率为14.8%。在被调查的场/户中,86.4%屠宰场、52.1%中小规模场和58.1%散养户为PCV2感染阳性,其中48.6%的PCV2阳性中小规模场的群阳性率低于10%。分析中小规模场PCV2感染情况和猪年龄之间的关系发现,在5个年龄组中,2～4周龄组未检出PCV2感染,5周龄以上各组均检出PCV2感染,其中11～14周龄组和15～26周龄组阳性率较高,高于5～7周龄组和8～10周龄组。; 韩雪蔡林倪建强夏应菊訾占超汪葆玥周智吴佳俊宁昆邱鹏遇秀玲翟新验田克恭; 关键词：猪圆环病毒2型 PCV2感染

PRRSV GP5和M抗原中和表位的融合表达与纯化以及间接ELISA检测方法的建立被引量：1: 2022年; 为建立检测猪血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体的间接ELISA方法,分析了PRRSV结构蛋白GP5和M的二级结构抗原指数、抗原性、亲水性、表面可及性以及潜在中和表位等参数,选取GP5的47~61、143~156和186~199位氨基酸,M蛋白的63~70、133~146和156~169位氨基酸作为免疫原,构建带接头序列的GP5/M中和表位融合表达质粒;通过优化大肠杆菌表达和蛋白纯化条件,免疫印迹鉴定GP5/M特异抗原,获得了可溶性的GP5/M中和表位融合蛋白。基于纯化的GP5/M中和表位融合抗原,建立了检测猪血清中PRRSV中和抗体的间接ELISA方法。采用建立的间接ELISA方法对6种其他猪源病原阳性血清进行检测,结果均无交叉反应;敏感性试验显示,将血清中和试验鉴定的PRRSV阳性对照血清稀释到1:12800时仍呈阳性;重复性试验显示,批内重复变异系数为2%~10%,批间重复变异系数小于15%;符合性试验显示,同时用建立的间接ELISA方法和血清中和试验对420份临床血清样品进行检测,结果符合率为95.24%。结果表明,该方法操作简单、耗时短,敏感性、特异性、重复性及符合性均良好,具有较好的应用推广价值。; 李雷斌李晓霞王睿男周智刘玉良赵柏林孙航冯冰陈玲王传彬李义平孙雨

猪繁殖与呼吸综合征病毒通用微芯片荧光定量RT-PCR方法的建立和初步应用被引量：3: 2021年; 为建立一种可用于猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)通用的核酸检测技术,本研究根据已发表的多株PRRSV ORF6(M)基因保守序列,设计特异性引物和探针,通过优化反应体系和条件,成功建立了一种可用于PRRSV通检的微芯片荧光RT-PCR检测方法。结果显示,该方法特异性强,与多种常见的猪病病毒均无交叉反应;通检性好,可以检出包括美洲型、欧洲型、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒以及NADC30-like等多种基因型PRRSV毒株;灵敏性好,检测下限为1×10^(1)TCID_(50)/mL,与常规荧光RT-PCR方法一致;重复性好,批内和批间重复性变异系数均小于4%;且成本低,模板用量少,反应快速,全程仅需61 min;对80份临床样品的检测结果与常规荧光RT-PCR的符合率为100%。本研究建立的微芯片荧光定量RT-PCR技术为PRRSV的快速、通用型检测提供了有力的技术支撑。; 陈玉红徐琦刘玉良王传彬周智张硕倪建强刘洋; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量RT-PCR 微芯片

2008年-2015年我国猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株遗传进化分析被引量：2: 2021年; 对2008年-2015年分离的56个PRRSV毒株进行全基因测序和序列比对,并对主要易变区Nsp2、GP5和非编码区进行分析。全基因分析结果显示,56个PRRSV均为美洲型PRRSV,其中54个毒株为高致病性PRRSV变异株,另外2个为类NADC30 PRRSV。54个高致病性PRRSV变异株之间的同源性为95.2%~99.9%,与高致病性PRRSV变异株代表毒株JXA1的同源性为97.2%~99.3%。2个类NADC30分离株之间的同源性为99.9%,与NADC30 PRRSV代表毒株NADC30的同源性为95.4%。主要易变基因分析结果显示,非结构蛋白Nsp2和结构蛋白GP5仍在不断变异中。54个PRRSV变异毒株中有48个PRRSV变异株在非结构蛋白Nsp2发生30aa的不连续缺失,此外有6个高致病性PRRSV变异株在Nsp2区域还发生了其他缺失(其中1株多缺失12个核苷酸,1株多缺失19个核苷酸,2株多缺失29个核苷酸,1株多缺失48个核苷酸,1株多缺失120个核苷酸)。2个类NADC30 PRRSV非结构蛋白Nsp2存在131个核苷酸的不连续缺失。大部分分离株在重要结构蛋白GP5发生aa突变,尤其是糖基化位点的位置和数量发生了不同程度的变化。; 张硕张硕张倩顾小雪徐琦宋晓晖王传彬吴佳俊刘金华; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株

高致病性猪蓝耳病最新流行动态: 高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株引起的一种严重危害养猪业的疾病。本文对高致病猪蓝耳病的流行现状和疫苗的免疫保护效果进行了分析研究，提出当前疫情基本趋于稳定，病毒出现新的基因变异，出现新的遗传...; 田克恭周智遇秀玲顾小雪曲萍翟新验; 关键词：猪蓝耳病病毒感染发病机制; 文献传递

猪圆环病毒3型感染的流行情况与检测方法研究进展被引量：9: 2019年; 猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3)是猪群中流行的一种新型猪圆环病毒。2016—2017年,世界范围陆续报道在猪群中发现PCV3,包括美国、中国、美国、韩国、巴西、波兰和意大利等。PCV3感染多见于具有皮炎肾病综合征(PDNS)和繁殖障碍症状的猪群,目前病毒尚未分离成功。本文综述了已报道的PCV3在世界范围内的流行情况,介绍了当前研究的PCV3分子和血清学诊断方法。; 刘颖昳周智关婕葳原霖侯伯赵柏林王传彬杨林

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