周鹤俊
- 作品数:25 被引量:127H指数:6
- 供职机构:中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省科技厅项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 抗人肝癌组织α-L-岩藻糖苷酶抗体的制备及运用
- 2006年
- 目的:制备和纯化肝癌特异性α-L-岩藻糖苷酶(α-L-fucosidase,AFU)多克隆抗体及初步研究其在肝癌诊断中的临床作用。方法:用自行提取和纯化的人肝癌组织AFU免疫家兔,以间接ELISA检测抗血清效价和工作浓度。抗血清经阴离子交换法纯化后采用Western-blot鉴定纯化的AFU和免疫组化方法定位AFU在肝癌组织中的分布情况。结果:抗血清的效价和工作浓度经间接ELISA检测分别为1∶32000和1∶4000。抗血清经过饱和硫酸铵沉淀,阴离子交换树脂DEAE-52纯化后可在第115收集管前后出现一明显洗脱峰。Western-blot显示纯化的多克隆抗体可特异性地识别相对分子质量为55×103的AFU。免疫组化表明,AFU多表达于肝癌组织的细胞质和(或)胞膜而不表达于癌旁组织。结论:本实验制备的抗人肝癌组织AFU多克隆抗体可用于检测肝癌组织和血清中AFU的表达水平。
- 李超林菊生钱颉周鹤俊
- 关键词:肝肿瘤多克隆抗体
- 去纤苷治疗土三七致肝窦阻塞综合征1例被引量:3
- 2022年
- 土三七所致肝窦阻塞综合征较常见,部分轻症患者可自愈,但对于重症患者尚缺乏有效的治疗方案。为提高对土三七所致肝窦阻塞综合征的认识,提高广大医务工作者对该病的诊疗水平,现将中南大学湘雅二医院收治的1例使用去纤苷成功治疗土三七所致肝窦阻塞综合征病例进行报道。本例患者在连续服用土三七1个月后出现腹胀腹痛,行肝脏MR增强+MRCP肝脏内可见明显“地图样”强化,肝窦阻塞综合征诊断明确,给予抗凝、改善循环、护肝、利尿治疗后疗效欠佳,加用去纤苷药物治疗后患者临床症状好转,复查肝脏MR增强+MRCP,肝内“地图样”强化消失。
- 杨思刘德良谭玉勇周鹤俊李陈婕
- 关键词:肝窦阻塞综合征土三七
- 以腹痛腰痛为主要表现的血栓性血小板减少性紫癜/溶血性尿毒症综合征一例
- 2011年
- 1 病历
患者,男性,70岁,因疼痛1周,意识障碍4 d平车入院.患者2009年4月2日起无明显诱因出现左侧腰腹隐痛,为左上腹、左侧腰部持续性隐痛,阵发性加重,至当地医院住院治疗,CT检查示左肾囊肿,诊断为"左肾囊肿",予抗感染(氨苄青霉素、克林霉素)及"曲马多"镇痛等治疗,病情无好转,并于4月5日起出现意识障碍,不能正确回答问题或问之不应,偶尔诉头痛,当时查血红蛋白 61 g/L,分别于4月5日、6及8、9日4次输注浓缩红细胞治疗(具体不详),于4月8日起出现尿深黄如浓茶,为求进一步诊治于2009年4月9日入本院.
- 周鹤俊吴小平
- 关键词:溶血尿毒症综合征腹痛腰痛
- KLF6基因在原发性肝癌中的表达被引量:7
- 2008年
- 目的通过研究潜在抑癌基因KLF6在肝细胞癌的表达,探讨KLF6基因作为肝癌抑制基因的可能性。方法分别用荧光定量PCR、半定量RT-PCR和Western blot方法检测肝细胞癌及癌旁组织中KLF6基因在mRNA及蛋白水平的表达变化。结果实时荧光定量PCR显示经过看家基因GAPDH标化的KLF6 cDNA起始浓度,在配对癌旁组织约为肝癌组织的3倍。26例肝癌组织的KLF6 mRNA表达水平与配对癌旁组织相比,差异具有显著性意义(P<0.01)。在肝癌细胞株HepG2及Hep3B,KLF6 mRNA的表达亦显著低于正常对照细胞L02(P<0.01)。实验还发现,在肝细胞癌中KLF6蛋白表达变化与mRNA表达变化一致,即KLF6蛋白在癌组织及肝癌细胞的表达明显低于癌旁组织及L02(P<0.01)。结论KLF6表达下调可能是肝细胞癌的遗传学改变之一,KLF6基因可能为新的肝癌相关抑癌基因。
- 王少平亢黎莉陈孝平周鹤俊周卫江徐江
- 关键词:KLF6肝细胞癌基因表达
- 以呃逆为首发症状的肝硬化合并噬血细胞综合征1例
- 2022年
- 噬血细胞综合征(hemophagocytic syndrome, HPS)又称噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(hemophagocytic Lymphohistiocytosis, HLH),是一种免疫异常激活综合征,其特征是单核细胞、巨噬细胞和淋巴细胞过度活跃,吞噬细胞增多,多器官功能损害,是一种罕见病[1]。
- 张云李陈婕卿笃信程宗勇周鹤俊
- 关键词:肝硬化呃逆发热噬血细胞综合征
- 奥曲肽对大鼠肝星状细胞胞质内游离钙及细胞增殖的影响被引量:4
- 2005年
- 目的:探讨在常氧和低氧条件下奥曲肽(octreotide)对大鼠肝星状细胞(HSC)胞内游离钙[Ca2+]i及增殖的调节.方法:采用钙荧光探针(Fura-2/AM)负载培养的大鼠HSC,观察常氧和低氧条件下培养48h后octreotide对HSC[Ca2+]i的调节,同时用四唑盐(MTT)比色法比较不同浓度的octreotide对大鼠HSC增殖的影响.环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)放免分析药盒测cAMP,cGMP浓度.结果:与常氧条件相比,低氧条件下HSC[Ca2+]i显著升高(293.2±12.4nmol/Lvs137.7±7.8nmol/L.P<0.01).500、800和1000μg/Loctreotide在常氧状态下可引起HSCs[Ca2+]i降低(P<0.05),其值分别为92.5±2.5、83.8±2.3和76.6±2.2nmol/L.低氧时500,800和1000gg/Loctreotide可引起HSCs[Ca2+],降低(P<0.01),其值分别为204.3±7.4、174.1±4.8和156.6±6.6nmol/L.常氧对照组A值(0.232±0.016)明显低于低氧对照组(0.533±0.036)(P<0.01);经500、800和1000μg/Loctreotide处理后,无论是常氧还是低氧状态下A值均明显降低(P<0.01).低氧条件下cAMP和cGMP含量不发生改变(P>0.05);无论是常氧还是低氧状态,经过octreotide500μg/L处理后,cAMP和cGMP含量与相应对照组相比增(cAMP:1.69±0.18pmol/mgvs1.10±0.32pmol/mg.1.87±0.30pmol/mgvs1.37±0.25pmol/mg,P<0.05;cGMP:1.08±0.24pmol/mgvs0.86±0.12pmol/mg.1.17±0.53pmol/mgvs0.89±0.20pmol/mg,P<0.05),而Octreotide800,1000μg/L组更高(cAMP:1.99±0.27,2.48±0.37pmol/mgvs1.10±0.32pmol/mg,P<0.01:2.09±0.35.2.24±0.15pmol/mgvs1.37±0.25pmol/mg,P<0.01:cGMp:1.24±0.17,1.31±0.29pmol/mgvs0.86±0.12pmol/mg,P<0.01;1.38±0.29,1.46±0.35pmol/mgvs0.89±0.20pmol/mg,P<0.01).结论:缺氧可通过第二信使系统促进HSC的增生,而Octreotide无论常氧还是低氧条件下剂量依赖性抑制HSCs增殖;cAMP,cGMP参与了对HSC的调节.
- 薛秀兰林菊生孙雪梅周鹤俊
- 关键词:奥曲肽星状细胞CAMPCGMP大鼠肝星状细胞细胞增殖
- 分泌性内皮抑制素真核质粒治疗小鼠肝癌的初步研究被引量:3
- 2003年
- 目的 构建并表达分泌性内皮抑制素真核表达质粒,以此对肝癌进行基因治疗。方法 人工合成Ig κ信号肽序列,和内皮抑制素编码序列一起克隆入pcDNA3.1质粒。重组质粒转染上清液作用于ECV304内皮细胞,MTT法检测内皮细胞的增殖。局部注射重组质粒治疗接种在小鼠腿部肌肉内的H_(22)肝癌瘤株,疗程结束后解剖称取瘤重。结果 构建的内皮抑制素真核表达质粒转染上清液可以抑制内皮细胞的增殖抑制率为29.2%。经质粒裸DNA注射治疗后,治疗组瘤重[(1.34±0.96)g]比空载体组[(2.70±0.82)g]和生理盐水组[(3.73±1.41)g]明显减小(P<0.05)。结论 分泌性内皮抑制素真核表达质粒用于H_(22)肝癌的基因治疗有一定效果。
- 黎培员林菊生冯作化张慧周鹤俊章金艳
- 关键词:小鼠肝癌基因治疗MTT法
- 胶囊内镜诊断门脉高压性肠病并出血1例
- 2022年
- 门脉高压性肠病(portal hypertensive enteropathy,PHE)并出血临床少见。本文报道1例肝硬化合并门脉高压性肠病并出血的临床特点和内镜特征,并结合复习文献,以期提高临床医师对PHE的认识水平。
- 丘栋豪李陈婕周鹤俊谭玉勇汪春莲
- 关键词:出血胶囊内窥镜
- AF0.3启动子调控的PNP/MeP-dR系统对AFP阳性肝癌细胞的特异杀伤作用被引量:5
- 2006年
- 背景与目的:甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)启动子调控下的目的基因能在AFP阳性肝癌组织中特异性表达;嘌呤核苷磷酸化酶(Escherichiacolipurinenucleosidephosphorylase,PNP)/6-甲基嘌呤-2′-脱氧核糖核苷(6-methylpurine-2-deoxyriboside,MeP-dR)自杀基因系统具有强杀瘤效应。本研究旨在探讨AF0.3启动子调控下的PNP/MeP-dR系统对AFP阳性肝癌细胞的特异性杀伤作用。方法:构建甲胎蛋白启动子AF0.3调控下PNP基因表达载体pAF0.3/PNP,导入AFP阳性肝癌细胞HepG2和阴性的肝癌细胞株SMMC7721,利用G418筛选获得稳定转染PNP基因的HepG2/0.3-PNP及SMMC7721/0.3-PNP细胞。RT-PCR检测二者在细胞中的表达。台盼蓝拒染法检测细胞增殖效应,MTT法和流式细胞仪检测两株细胞对MeP-dR的敏感性及旁观者效应,高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)检测PNP基因产物活性。结果:不论有氧还是缺氧条件,HepG2/0.3-PNP对MeP-dR均较为敏感,SMMC7721/0.3-PNP则对MeP-dR完全不敏感。在任何一种条件下,HepG2/AF0.3-PNP在混合细胞中比例达25%后,就可致明显旁观者效应;而在同样条件下,SMMC7721/0.3-PNP不导致明显的旁观者效应。HPLC结果显示,pAF0.3/PNP在HepG2细胞中可以将MeP-dR转化为6-MP,但其在SMMC7721中则不具有转化活性。结论:AF0.3启动子调控下的PNP/MeP-dR系统对AFP阳性HepG2细胞有较好的杀伤作用。
- 蔡晓坤周俊立周鹤俊张玲吴健鸿林菊生
- 关键词:AFP阳性肝肿瘤HEPG2细胞基因治疗
- 幽门螺杆菌感染与胃癌侵袭转移及COX-2和MMP-9表达的关系被引量:3
- 2010年
- 目的:探讨COX-2和MMP-9在胃癌组织中的表达及其与幽门螺杆菌感染和胃部转移侵袭的关系。方法:采用快速尿素酶试验及Warthin-Starry银染色法检测45例胃癌标本中幽门螺杆菌感染情况,采用免疫组织化学法检测COX-2和MMP-9在胃癌组织中的表达,对其与幽门螺杆菌感染和胃癌患者临床病理特征的相关性进行分析。结果:①幽门螺杆菌感染组胃癌中浆膜侵袭和淋巴结转移率均高于无幽门螺杆菌感染组(P<0.05)。②胃癌浆膜侵袭组和淋巴结转移组中COX-2、MMP-9蛋白表达阳性率均分别显著高于无胃癌浆膜侵袭组、淋巴结转移组(P<0.05)。③幽门螺杆菌感染与COX-2和MMP-9表达具有相关性。结论:幽门螺杆菌感染能够增加胃癌的侵袭转移能力,其机制可能与COX-2和MMP-9表达增加有关。
- 李迪胜邓香山程峰周鹤俊
- 关键词:幽门螺杆菌胃癌基质金属蛋白酶-9环氧化酶-2