唐林生
- 作品数：16 被引量：28H指数：3
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- 牛隐孢子虫ELISA检测试剂盒
- 本发明公开了一种牛隐孢子虫ELISA检测试剂盒，包括包被酶标板、阴性标准血清、阳性标准血清、酶标二抗、洗涤液、稀释液、底物液和终止液，包被酶标板以卵囊壁蛋白COWP和热休克蛋白HSP70的串联体COWP-HSP70作为包...
- 彭昊唐林生李军杨威陶立谢永平潘艳韦志锋秦若甫兰美益禤雄标胡帅谢宇舟马春霞陈泽祥
- 文献传递
- 广西奶牛隐孢子虫病的流行病学调查被引量：9
- 2012年
- 为了调查广西奶牛隐孢子虫病的流行情况,采用饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法对广西9个奶牛场和4个奶牛个体养殖户的1 612头份粪样进行隐孢子虫卵囊的检测,并以基于18SrRNA基因的PCR-RFLP技术对分离的隐孢子虫卵囊进行种类鉴定。结果显示,7个奶牛场发现存在隐孢子虫感染,隐孢子虫阳性粪样为189头份,总感染率为11.72%(189/1 612)。在感染的年龄段上,1～6月龄犊牛的隐孢子虫感染率为21.3%,显著高于7～12月龄的青年牛(9.6%)和大于1岁龄的成年牛(3.8%)(P<0.01)。感染季节以冬季感染较高,但与夏季感染结果相比差异不显著(P>0.05)。PCR-RFLP分析显示,分离的7个隐孢子虫株均为安氏隐孢子虫。调查表明,广西奶牛隐孢子虫虫株以安氏隐孢子虫为主,感染率与河南、江苏、安徽、吉林等省份相似。
- 陶立陈泽祥韦志锋王荣军秦若甫李军唐林生彭昊兰美益魏晓瑞杨威
- 关键词：隐孢子虫奶牛流行病学调查
- 鸭肝炎的防治
- 2009年
- 鸭肝炎俗称“花肝病”，是由鸭肝炎病毒引起的雏鸭的一种急性、高度致死率的传染性疾病。雏鸭一旦感染，会迅速发病并出现死亡。该病已成为鸭的主要传染病之一，给养鸭业造成巨大的经济损失。
- 唐林生李婵韦平
- 关键词：鸭肝炎病毒传染性疾病花肝病致死率养鸭业
- 安氏隐孢子虫ITS-1基因PCR检测方法的建立被引量：6
- 2012年
- 【目的】建立针对安氏隐孢子虫的PCR快速检测方法,为安氏隐孢子虫的检测和分子流行病学调查提供技术支撑。【方法】根据GenBank中安氏隐孢子虫的ITS-1基因序列设计1对特异性引物,建立基于ITS-1基因的PCR方法,并通过特异性试验、敏感性试验、临床检测以及与经典巢式PCR检测方法进行比较等,验证其可行性。【结果】基于ITS-1基因的PCR检测方法能扩增出安氏隐孢子虫的特异条带,而对猪源隐孢子虫、贝氏隐孢子虫、微小隐孢子虫、牛泰勒氏虫、牛巴贝斯虫、伊氏锥虫、食道口线虫的扩增结果均为阴性;将测序结果进行BLAST比对,发现其与GenBank中安氏隐孢子虫的同源性均在99%以上。敏感性最低可检测每克牛粪中5个卵囊;用于检测广西不同地区的1613份牛粪样品时,与经典巢式PCR检测方法相比,发现两者的阳性检出率均为11.72%,且吻合率达100%。【结论】安氏隐孢子虫ITS-1基因PCR检测方法具有快速、敏感、特异的特点,适用于安氏隐孢子虫的检测和分子流行病学调查分析。
- 彭昊李军陶立陈泽祥唐林生魏晓瑞马春霞禤雄标胡帅许力干谢永平杨威
- 关键词：安氏隐孢子虫PCR检测巢式PCR
- 安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白基因与热休克蛋白70基因的重组联合表达被引量：1
- 2014年
- 利用双酶切方法将安氏隐孢子虫热休克蛋白70(HSP70)基因部分编码区连接到含有安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白基因(COWP)的表达质粒pET-32a-COWP上,构建了表达质粒pET-32a-COWP-HSP70。将鉴定正确的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,30℃,经1.5mmol/L IPTG诱导表达6h,表达产物主要以可溶的形式表达。使用小鼠抗安氏隐孢子虫超免疫血清为第一抗体进行Western-blot检测,结果有明显的目的条带出现,说明重组蛋白能被抗安氏隐孢子虫抗体识别。
- 李军唐林生彭昊陶立潘艳潘艳许力干陈泽祥杨威许力干
- 关键词：安氏隐孢子虫
- 安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白的原核表达及其免疫原性研究被引量：1
- 2014年
- 【目的】验证安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白(COWP)的免疫原性,为建立安氏隐孢子虫病免疫学诊断方法奠定基础。【方法】根据Gen Bank已公布的安氏隐孢子虫COWP同源基因序列(DQ060431)设计引物,克隆COWP基因并构建原核表达载体,经IPTG诱导表达后,采用蛋白印迹法检测其免疫原性。【结果】扩增获得的COWP基因片段为549bp,其序列与Gen Bank已公布COWP同源基因序列(DQ060431)的同源性达100%,将其插入p ET-32a载体可构建p ET-32a-COWP表达载体。重组菌在30℃下经0.5 mmol/L IPTG诱导5 h后,其表达形式以可溶性表达为主;NTA-Ni亲和层析柱层析时用200 mmol/L咪唑洗脱液洗脱,即能得到纯化的重组蛋白,重组蛋白分子量约40 k Da。以抗His标签鼠单克隆抗体或鼠抗安氏隐孢子虫高免血清为一抗进行Western blotting检测,均能获得预期的目的条带。【结论】重组COWP蛋白具有良好的免疫原性,可作为安氏隐孢子虫病免疫学诊断的候选抗原。
- 彭昊唐林生李军黄维义陶立陈泽祥谢永平许力干杨威
- 关键词：安氏隐孢子虫原核表达免疫原性
- 兔病毒性出血症自然感染病例的解剖病理学观察
- 2013年
- 为了给兽医临床诊断兔瘟病提供病理学快速诊断依据,对一起非典型兔瘟(慢性兔瘟)病例的发病情况和解剖病理变化进行了详细观察和拍照,并通过对流行病学调查、临床症状、剖检病理变化、实验室微生物学检查和血清学检测等综合分析,确诊为兔瘟。观察到兔瘟病主要病理变化表现为心脏充血、心耳充血明显,心包积液,心内外膜有散在针尖大小出血点;喉头和气管黏膜充血和出血,气管内有泡沫状液体;肺脏水肿、出血;胸腺严重水肿、出血,有的肿大3～5倍,外观大理石样;肝脏稍肿大、土黄色、质地脆弱;脾脏肿大,呈紫黑色,边缘有锯齿状坏死;胃壁变薄,黏膜易脱落;结肠充气鼓胀,浆膜有出血点或出血斑;肠系膜淋巴结肿大、点状出血;肾脏水肿、土黄色、有出血点或出血斑;膀胱积尿、有出血点;母兔子宫水肿、出血等。本试验为兽医临床快速诊断兔瘟病提供参考资料。
- 谢永平何玉珍周沛冯世文唐林生魏晓瑞马春霞
- 关键词：兔病毒性出血症病理
- 广西融安某猪场感染隐孢子虫的情况调查被引量：1
- 2012年
- 为掌握广西壮族自治区是否存在猪隐孢子虫病,为该病的防治提供科学依据。本文通过采用饱和蔗糖漂浮法和改良抗酸染色法对广西融安某猪场进行隐孢子虫调查。结果显示,164份样品,阳性样品数为10份,阳性率6.0%;其中1~2月龄的40份样品中有9份阳性,阳性率25.0%;2~3月龄的只有1份阳性,阳性率2.0%;其他组别并没发现有阳性。证实该猪场存在隐孢子虫,这也是在广西地区首次报道猪感染隐孢子虫。
- 陶立唐林生彭昊韦志锋秦若甫李健李军陈泽祥杨威
- 关键词：隐孢子虫感染率
- 牛隐孢子虫ELISA检测试剂盒
- 本发明公开了一种牛隐孢子虫ELISA检测试剂盒，包括包被酶标板、阴性标准血清、阳性标准血清、酶标二抗、洗涤液、稀释液、底物液和终止液，包被酶标板以卵囊壁蛋白COWP和热休克蛋白HSP70的串联体COWP-HSP70作为包...
- 彭昊唐林生李军杨威陶立谢永平潘艳韦志锋秦若甫兰美益禤雄标胡帅谢宇舟马春霞陈泽祥
- 文献传递
- 隐孢子虫截短热休克蛋白70(HSP70)基因的原核表达及其抗原性分析被引量：2
- 2014年
- 根据Gen Bank上的安氏隐孢子虫HSP70基因主要抗原片段区序列设计特异性引物,用RT-PCR方法扩增出目的片段,构建克隆载体,双酶切后连接到p ET-32a表达载体,成功构建了表达质粒p ET-32a-HSP70。将鉴定正确的重组质粒转化到表达菌中,IPTG诱导表达,表达产物经过SDS-PAGE和Western blot鉴定和分析,证实获得HSP70融合蛋白。以鼠抗安氏隐孢子虫卵囊高免血清为一抗进行Western blot检测,试验结果证实重组HSP70蛋白具有良好的免疫反应性,为建立隐孢子虫病免疫学诊断方法奠定了基础。
- 彭昊唐林生李军陶立陈泽祥潘艳谢永平许力干杨威黄维义
- 关键词：隐孢子虫热休克蛋白70免疫原性
