应通峰
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：上海生物制品研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 百日咳毒素S1亚单位截短片段的表达、纯化及初步应用被引量：2
- 2008年
- 目的表达并纯化百日咳毒素(PT)S1亚单位截短片段S146,以其制备抗体,初步建立检测PT的双抗体夹心ELISA法。方法PCR扩增S146基因,亚克隆至载体pUC18,鉴定正确后,插入表达载体pET16b,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,用镍离子亲和层析柱纯化,复性后的蛋白免疫家兔,制备抗血清,纯化后作为包被抗体,建立检测PT的双抗体夹心ELISA法,并检测其特异性。结果表达的重组蛋白相对分子质量约为19000,主要存在于破菌沉淀中,表达量占菌体总蛋白的44%;纯化后蛋白纯度为94.5%;家兔抗血清可特异性识别天然PTSI;建立的双抗体夹心ELISA法特异性良好。结论已成功表达、纯化了PTS1亚单位截短片段S146,并以纯化的抗S146抗体作为包被抗体,初步建立了检测PT的双抗体夹心ELISA法,为研制特异性检测试剂和提供一种疫苗的质量控制方法奠定了基础。
- 杨瑜朱为应通峰黄帼英徐帆洪瞿爱东
- 关键词：百日咳毒素克隆纯化ELISA
- 百日咳毒素S1亚单位截短片段在大肠杆菌中的表达纯化与初步应用
- 目的：克隆百日咳毒素S1亚单位C端截短片段S146，构建表达蘑组子，在大肠杆菌中表达并纯化目的蛋白，利用其自制抗体进行包被初步建立特异性检测百日咳毒素的双抗体夹心ELISA方法。
方法: PCR扩增得到S146...
- 杨瑜朱为应通峰徐帆洪黄帼英瞿爱东
- 关键词：百日咳毒素基因克隆ELISAPCR扩增生物制品
- 文献传递
- 百日咳毒素S1亚单位截短片段在大肠杆菌中的表达纯化与初步应用
- 目的：克隆百日咳毒素S1亚单位C端截短片段S146,构建表达重组子,在大肠杆菌中表达并纯化目的蛋白,利用其自制抗体进行包被初步建立特异性检测百日咳毒素的双抗体夹心ELISA方法。方法： PCR扩增得到S146基因产物,将...
- 杨瑜朱为应通峰徐帆洪黄帼英瞿爱东
- 关键词：百日咳毒素大肠杆菌
- 文献传递
