张农
- 作品数：41 被引量：145H指数：7
- 供职机构：复旦大学上海医学院病理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TGF-β1对大鼠肾小球系膜细胞ⅩⅧ型胶原表达的影响
- 2004年
- 目的 探讨转化生长因子 β1(TGF β1)对ⅩⅧ型胶原在大鼠肾小球系膜细胞中表达的影响 ,以及两者在大鼠抗Thy 1肾小球肾炎中的相互关系。方法 采用RT PCR、Westernblot法观察外源性TGF β1对大鼠肾小球系膜细胞中ⅩⅧ型胶原表达的影响 ;制备大鼠抗Thy 1肾小球肾炎模型 ,应用免疫组织化学ABC方法分别观察TGF β1和ⅩⅧ型胶原在大鼠肾组织中的表达 ,并对其染色强度作图像定量分析。结果 外源性TGF β1作用后 ,大鼠肾小球系膜细胞中ⅩⅧ型胶原的表达升高 ,并显示出一定的时间与浓度依赖性。大鼠抗Thy 1肾小球肾炎中TGF β1的表达在 1、3和 5d仅有微量表达 ,第 7天开始其表达明显且随时间增强 ;ⅩⅧ型胶原和Ⅳ型胶原的表达趋势都与TGF β1吻合 ,ⅩⅧ型胶原的表达与TGF β1的表达间具有显著的相关性。结论 ⅩⅧ型胶原的表达与TGF β1的作用相关 ,可能参与了肾小球肾炎的发生发展过程 。
- 杨静蒋涛李慧赵仲华张秀荣张农
- 关键词：外源性TGF-Β1胶原表达肾小球系膜细胞胶原肾小球肾炎BLOT法
- 调宁蛋白的研究进展被引量：7
- 2003年
- 碱性调宁蛋白是调宁蛋白家族中的成员 ,在成熟的非增殖性的平滑肌细胞中特异性表达 ,是一种新型的病理诊断标记。它除了能调节平滑肌收缩 ,还参与了细胞骨架活动和细胞信号转导 ,具有多种生物学功能 。
- 李慧张农
- 关键词：调宁蛋白平滑肌细胞细胞骨架细胞增殖病理诊断
- HGF抑制肾小球硬化作用机制的研究进展被引量：2
- 2007年
- 李慧张农
- 关键词：肝细胞生长因子原癌基因蛋白质C-MET肾小球系膜细胞肾小球硬化
- 醛糖还原酶基因转染对体外培养大鼠肾脏系膜细胞增殖的影响被引量：7
- 2005年
- 目的观察醛糖还原酶(AR)基因转染对体外培养大鼠肾脏系膜细胞(MsC)增殖的影响,并对其机制进行初步探讨。方法脂质体转染法将AR基因转入大鼠MsC,蛋白印迹鉴定转染效率。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期与凋亡,对比正常MsC和AR转染MsC的生长速度及AR抑制剂(ARI)Sorbinil和Zopolrestat对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)和小牛血清(NBS)促MsC增殖作用的影响。蛋白印迹检测PDGF-BB作用后AR和c-Jun表达的变化,EMSA检测转录因子AP-1的活性。结果(1)转染MsCAR表达较正常MsC明显增高;(2)AR转染MsC较正常MsC生长速度快(P<0.01);(3)ARI可部分抑制PDGF-BB对正常MsC、AR转染MsC以及NBS对AR转染MsC的促增殖作用(P<0.01,P<0.05),而对NBS促正常MsC的增殖无显著影响;(4)PDGF-BB刺激MsC后可上调AR和c-Jun蛋白的表达,ARI可减弱c-Jun的这种表达增高;(5)PDGF-BB可活化转录因子AP-1,而ARI可削弱此作用。结论AR可能参与了MsC在病理情况下的过度增殖过程,其作用机制与AP-1活化有一定关系。
- 车祺蒋涛林伊凤李慧张农
- 关键词：体外培养基因转染系膜细胞增殖肾脏系膜细胞AP-1活化
- TGF-β受体在肾纤维化/硬化发生过程中的作用及治疗展望被引量：3
- 2003年
- TGF β是多功能细胞因子 ,在引起肾纤维化中发挥重要作用。TGF β受体是最近几年研究的热点 ,本文重点介绍TGF β受体的结构及信号转导通路、TGF β受体在各种肾脏疾病致纤维化硬化中的作用以及利用TGF β受体对抗肾纤维化的治疗价值。
- 杨静张农
- 关键词：肾硬化症纤维变性受体转化生长因子Β
- 大鼠抗Thy-1系膜增生性肾炎TGF-β1和calponin h1表达变化的初步研究被引量：5
- 2005年
- 目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性调宁蛋白(calponin h1)在大鼠抗Thy-1系膜增生性肾炎 中的表达及其意义。方法 制备大鼠抗Thy-1系膜增生性肾肾炎模型,提取其肾组织的总蛋白和总RNA。应 用免疫组织化学ABC法、Western blot、RT-PCR等方法分别从蛋白和核酸水平检测TGF-β1和calponin h1在肾 炎模型1、3、5、7、14、21、28 d组织中的表达,研究其相互关系。结果 大鼠抗Thy-1系膜增生性肾炎中TGF-β1 的蛋白表达从7天组起明显随时间延长增强,至21 d组达高峰后回落,核酸表达差异不明显;calponin h1的少量 表达见于正常对照组,1、3、5 d组起表达明显增强,7 d组达到最高峰后开始回落,核酸表达的变化趋势则与 TGF-β1的蛋白表达变化趋势一致。结论 大鼠抗Thy-1系膜增生性肾炎组织中calponin h1表达增强,并在肾 炎病变早期呈增强趋势,后者与TGF-β1在肾炎早期的增强表达趋势相似。calponin h1可能在肾炎早期发挥抗 细胞增殖的作用。
- 李慧蒋涛杨静赵仲华张秀荣张农
- 关键词：系膜增生性肾炎免疫组织化学ABC法调宁蛋白
- 维甲酸核内受体β基因转染对大鼠肝星状细胞增殖和表型的影响被引量：4
- 2002年
- 目的 研究维甲酸核内受体β（RAR β）转染血小板衍生生长因子（PDGF）激活的HSC后给予相应配体全反式维甲酸（ATRA）对细胞增殖、表型的影响。方法 质粒pCMV-script-RARβ转染经PDGF激活的大鼠HSC, western blot鉴定转染成功后,MTT法、BrdU掺入检测细胞生长情况,免疫细胞化学法检测α-SMA、肌间线蛋白的表达,western blot检测RARβ蛋白表达。结果 受体转染后再给予相应配体可使PDGF激活后HSC的RARβ受体表达升高至少维持144 h,并使其增殖减慢,α-SMA、肌问线蛋白表达减弱,较空载组、PDGF组、未给予配体组、无关配体组差别均有显著性意义。结论 RAR β受体基因转染并给予ATRA可使激活的HSC增殖减慢、表型逆转。
- 李华张锦生黄光存张农陈琦张秀荣
- 关键词：细胞增殖大维基因转染肝星状细胞血小板衍生生长因子
- 醛糖还原酶影响转化生长因子β1诱导的大鼠系膜细胞纤连蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达及其机制的研究被引量：7
- 2005年
- 目的探讨醛糖还原酶(AR)对转化生长因子β1(TGFβ1)诱导的大鼠系膜细胞(MsC)细胞外基质成分纤连蛋白(FN)和IV型胶原(ColIV)蛋白表达的影响及其可能涉及的信号传导通路。方法经亚克隆构建AR真核表达质粒pCDNA3AR,经脂质体介导及G418筛选后,将pCDNA3AR稳定转染至大鼠MsC中。应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、Western印迹法和免疫荧光法检测转染MsC表达AR情况;以Western印迹法检测正常MsC、AR转基因MsC,应用醛糖还原酶抑制剂(ARI)Sorbinil和Zopolrestat分别孵育的MsC:在TGFβ1刺激前后的FN、ColIV以及MAPK/phosphoMAPK表达变化。结果与正常MsC相比,两种ARI———Sorbinil和Zopolrestat均可下调MsC的FN和ColIV蛋白表达,而AR转基因MsC中FN和ColIV表达均升高(均P<0.05);TGFβ1作用后,MsC的FN和ColIV蛋白表达升高,预先使用Sorbinil或Zopolrestat孵育后,二者表达均下降,而AR转基因MsC中二者表达进一步增高(均P<0.05)。各组细胞在TGFβ1刺激前后总ERK、JNK和p38表达均无明显变化。正常MsC在TGFβ1刺激后phosphoERK、phosphoJNK、phosphop38表达升高,与之相比,若预先使用Sorbinil或Zopolrestat孵育后,则phosphoJNK、phosphop38表达下降,AR转基因MsC中phosphoJNK表达更为升高(P<0.05)。结论AR基因作为TGFβ1反应性基因之一,可能参与TGFβ1诱导的FN和ColIV表达的调控,且AR的作用有可能与TGFβ1刺激后的JNKMAPK和p38MAPK信号通路的活化有关。AR可能参与了非糖尿病导致的肾小球纤维化、硬化的病理发展过程。
- 蒋涛车祺林伊凤赵仲华陈琦张农
- 关键词：转化生长因子Β1纤连蛋白系膜细胞细胞外基质成分蛋白表达
- 醛糖还原酶抑制剂影响PDGF-BB促系膜细胞增殖作用的机制研究被引量：6
- 2007年
- 目的探讨醛糖还原酶抑制剂(ARI)影响血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)促体外培养大鼠系膜细胞(MsC)增殖作用的机制。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,对比PDGF-BB刺激MsC生长速度与MAPK3条信号通路(ERK、JNK及p38)抑制剂及PI3K信号通路抑制剂对PDGF促MsC增殖作用的影响。用半定量RT-PCR检测醛糖还原酶抑制剂(ARI)对MsC合成内源性PDGF-B链的影响。蛋白印迹法观察ARI对PDGF引起的信号通路磷酸化的影响。结果(1)ERK抑制剂U0126、JNK抑制剂SP600125及PI3K抑制剂LY294002能明显抑制PDGF对MsC的促增殖作用(P<0.05),而p38抑制剂SB203580不能抑制PDGF的促MsC增殖作用;(2)ARI在转录水平对MsC合成内源性PDGF-B链没有明显影响。(3)PDGF刺激MsC后引起ERK、JNK及PI3K/Akt信号通路的磷酸化,而ARI仅能抑制JNK及PI3K/Akt两条信号通路的磷酸化(P<0.05),对ERK信号通路的磷酸化没有明显影响。结论ARI部分抑制PDGF促MsC增殖作用可能与其影响JNK和PI3K/Akt信号通路活化有关。
- 邹丽萍蒋涛车祺李慧瞿俊杰陈琦张农
- 关键词：醛糖还原酶肾脏系膜细胞血小板源性生长因子信号传导通路
- TGF-β1对醛糖还原酶在大鼠系膜细胞及Thy-1肾炎中表达的影响被引量：7
- 2005年
- 目的 研究转化生长因子β1(TGF- β1)对醛糖还原酶(AR)在大鼠系膜细胞(MsC)及大鼠抗Thy 1肾小球肾炎模型 (ATG)中表达的影响。方法 采用RT PCR和Westernblot技术分别检测TGF β1刺激后体外培养大鼠系膜细胞AR的表达以 及TGF -β1和AR在ATG中的表达;应用免疫组化检测ATG中TGF -β1、AR的表达,并对染色强度进行图像分析。结果 外源 性TGF- β1作用后,大鼠系膜细胞中AR表达升高,并显示出一定的时间与剂量依赖性。ATG中,随着病程的延长,TGF -β1、AR 表达升高,对免疫组化结果进行图像分析显示,二者表达之间具有相关性(r=0.65,P<0.05)。结论 TGF -β1可以上调其相 关反应性基因AR的表达,后者可能参与了肾小球肾炎发生发展的过程。
- 蒋涛杨静李慧赵仲华张秀荣张农
- 关键词：系膜细胞醛糖还原酶肾炎
