张小慧
- 作品数：15 被引量：108H指数：6
- 供职机构：中南大学湘雅医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胚胎不同器官的细胞连接蛋白基因表达研究被引量：1
- 1999年
- 目的探索胚胎不同分化阶段、不同器官中细胞连接蛋白基因的表达规律及其与细胞分化的关系。方法采用Ｃｏｎｎｅｘｉｎ系列基因探针，通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法，对不同胎龄的不同胚胎器官中Ｃｘ基因表达状态进行了研究。结果（１）胚胎期肝、胃、肺、肾等器官中Ｃｘ３１、Ｃｘ４６、Ｃｘ３１．１不表达。（２）胚胎不同发育阶段连接蛋白基因呈不同表达状态。如Ｃｘ２６、Ｃｘ４３在３个月胎龄的肝脏中高度表达、Ｃｘ３２从第５周至第５月都呈高度表达；（３）连接蛋白基因表达有器官差异性，肝Ｃｘ３２、胃Ｃｘ３７、肺Ｃｘ４０和肾Ｃｘ４３基因高度表达。（４）连接蛋白基因在各器官中表达又有交叉性，Ｃｘ２６在上述肝、胃、肾等器官中呈不同表达状态。（５）细胞连接蛋白基因的表达状态与组织细胞的分化基本一致。结论它们可能是调节胚胎组织分化。
- 张建湘李桂源张小慧
- 关键词：连接蛋白基因表达胚胎
- 不同妊娠时期人胎盘绒毛细胞连接蛋白基因表达的研究
- 2000年
- 目的 探索妊娠不同时期人胎盘绒毛细胞连接蛋白基因表达的规律及其与细胞分化的关系。 方法 采用多种细胞连接蛋白基因 c DNA探针 ,通过 Northern印迹法 ,研究了不同妊娠时期胎盘绒毛细胞内 Cx基因的表达状态。 结果 1.Cx基因表达有器官特异性 ,绒毛细胞中 Cx43、Cx32及 Cx40表达 ,而 Cx31.1、Cx33、Cx37、Cx46不表达 ;2 .在不同发育阶段的胎盘绒毛中 ,Cx43、Cx32、Cx40的表达水平与周龄呈各自特点的曲线关系 ;3.Cx基因的表达与绒毛细胞的分化及绒毛的形成过程基本一致。 结论 某些 Cx基因在调节绒毛细胞分化。
- 张小慧张建湘祝继明李桂源
- 关键词：连接蛋白基因基因表达妊娠期胎盘绒毛细胞
- 9p21-22区域鼻咽癌候选抑瘤基因的克隆及其功能的初步研究
- 染色体9p21-22区域高频率的等位基因杂合性丢失（Loss of Heterozygosity,LOH）是肺癌、乳腺癌、膀胱癌和鼻咽癌等多种肿瘤中的常见事件。David Sidransky 等检测了大量原发性非浸润型和...
- 阳剑波宾亮华李忠花张小慧李江钱骏张必成周鸣谢奕李桂源
- 关键词：鼻咽癌杂合性丢失抑瘤基因克隆
- 文献传递
- 鼻咽上皮组织定向cDNA文库的快速构建被引量：6
- 2001年
- 目的 采用SMART (switchingmechanismat5′endofRNAtranscript)技术 ,快速构建了高质量的成人鼻咽上皮组织定向cDNA文库。方法 从成人正常鼻咽上皮组织分离总RNA ,利用经修饰的oligo(dT)引物 (含sfiIB酶切位点 )合成cDNA第一链 ,同时根据真核生物mRNA 5′端帽子结构特点 ,利用SMART核苷酸 (含sfiIA酶切位点 )作为cDNA第二链在mRNA 5′端延伸出去的模板 ,进而以此序列为引物利用LD PCR(Long distance PCR)合成双链cDNA ,双链cDNA经sfiI(IA&IB)酶切和过柱分级分离后 ,克隆入经sfiI酶切的λTripIEX2载体后经体外包装而成cDNA文库。结果 获得 1.5× 10 6个重组子 ,重组率达 10 0 %。文库扩增后 ,滴度达 3.8× 10 9pfu/ml,插入cDNA平均长度为 1.5kb。结论构建的成人鼻咽cDNA文库具有良好的质量 ,该cDNA文库为进一步筛选。
- 张必成余鹰邱元正钱骏周鸣李忠花张小慧向娟娟朱诗国李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤DNA重组基因文库遗传学技术CDNASMART
- 染色体7q32-ter鼻咽癌相关基因的初步研究被引量：6
- 2001年
- 为克隆 7q32 ter区域等位基因杂合性丢失最小共同缺失区的鼻咽癌相关基因 .以STSD7S5 0 9为探针 ,PCR法筛选位于该区的细菌人工染色体 (BAC)克隆 ,应用EST介导的定位 候选克隆策略并结合生物信息学筛选出在鼻咽癌细胞株和活检组织中表达增强的ESTAA7734 5 4,cDNA克隆测序和生物信息学资源获取全长cDNA ,DNA印迹和甲基化分析研究其表达增强的机制 .结果表明 ,克隆的NAG18基因cDNA全长 80 2bp ,编码 2 2 7个氨基酸 ,定位于胞核 .该基因分别与人、鼠TAXREB10 7基因及RPL6基因高度同源 .其表达增强的机制不是基因拷贝数的丢失和甲基化位点的改变 .可以断定NAG18是定位于 7q32 ter最小共同缺失区的鼻咽癌相关基因 ,它是一高度保守的基因 。
- 张小慧李忠花张必成董利周鸣曹利唐珂李伟芳李桂源
- 关键词：鼻咽癌相关基因染色体
- NAG14基因结构域蛋白的原核表达被引量：1
- 2002年
- 董利王洁如钱骏张小慧谭琛聂新民李桂源
- 关键词：基因表达融合蛋白
- 染色体7q32-ter最小共同缺失区鼻咽癌抑瘤基因候选者的筛选被引量：4
- 2000年
- 目的：在明确 7q32- ter区域等位基因杂合性丢失最小共同缺失区位于以 D7S509为中心的 D7S500- D7S509- D7S495的基础上，筛选和克隆位于该区内鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法：应用定位—候选克隆策略筛选位于该最小共同缺失区的 3′末端 ESTs(expressed sequence tags,ESTs),RT- PCR和 Northern杂交筛选出在鼻咽癌细胞株和活检组织中表达下调的 ESTs,采用 cDNA克隆测序和生物信息学资源获取候选 EST的全长 cDNA。 Southern杂交和甲基化分析研究候选基因表达下调的机制。结果：筛选 D7S500- D7S495区域内的 12个代表新基因的 3′末端 ESTs序列，发现一个 EST（ AI290024）在鼻咽癌细胞株及 50％（ 6/12）的鼻咽癌活检组织中表达下调， Multiple Tissue Northern(MTNTM) Blot杂交结果显示该 EST在心、肝、肾等多种组织中存在大小 2.0 kb的转录本。通过测定包含该 EST的 cDNA克隆，获得该新基因（命名为 NAG- 22基因） 2.3 kb转录本的全长 cDNA(GenBank登录号： AF247820),编码 77AA，含有 disintegrin的结构域。 NAG22在 NPC中表达下调的机制不是高甲基化和基因拷贝数的丢失。结论： NAG22是定位于 7q32- ter最小共同缺失区的一个与鼻咽癌相关的抑瘤基因候选者。
- 张小慧钱骏王洁如董利曹利周鸣唐珂李伟芳李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤
- 精细定位和克隆9p21-22区域内鼻咽癌候选抑瘤基因被引量：48
- 2000年
- 目的：进一步精细限定鼻咽癌９ｐ２１－２２区域等位基因杂合性丢失的频率和范围，筛选和克隆其共同缺失区内鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法：应用１１个定位于 ９ｐ２１－２２区域的高密度微卫星位点，检测 ２５例低分化鼻咽癌患者的杂合性丢失，确定其共同缺失区；用ＲＴ－ＰＣＲ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ筛出在鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１和鼻咽癌活检组织中表达下调的、定位于共同缺失区内的 ３’末端ＥＳＴｓ（Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｔａｇｓ）；采用 ＲＡＣＥ技术和生物信息学资源克隆出候选ＥＳＴ的全长ｃＤＮＡ。结果： ２５例患者中有１７例（６８％）存在一个或多个位点的杂合性丢失，其中Ｄ９ｓ１６１（３５．０％，７／２０），Ｄ９Ｓ１６７８（３１．５％，６／１９），Ｄ９Ｓ２６３（３．３％，６／１８）和Ｄ９Ｓ１８５３（３３．３％，７／２１）四个紧邻位点的丢失频率相对较高，并发现六位患者在该四个位点表现为连续性缺失；筛选Ｄ９Ｓ１６１－Ｄ９Ｓ１８５３区域内２５个代表新基因的３’末端ＥＳＴｓ序列，发现一个ＥＳＴ（ｄｂＥＳＴ：２０８８２５）在鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１及７３％（１１／１５）的活检组织中表达降低， Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｔｉｓｓｕｅ Ｎｏｒｔ
- 阳剑波宾亮华李忠花张小慧钱骏张必成周鸣谢奕邓龙文李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤染色体杂合性丢失克隆
- 比较基因组杂交研究鼻咽癌遗传变异被引量：34
- 2001年
- 目的 了解鼻咽癌遗传学改变的特征。方法 应用比较基因组杂交检测 2 0例鼻咽癌基因组的不平衡即DNA的丢失或扩增。结果 鼻咽癌常见的扩增的染色体是 1q、2、3q、7q、8q、12 ;常见的缺失的染色体为 3p、9p、11q、16 q。结论 鼻咽癌细胞中存在多条染色体拷贝数的改变 ,由此引起相应瘤基因的扩增和抑癌基因的丢失可能参与了鼻咽癌的发生。
- 李忠花王璐张小慧张丽君张必成余鹰曾朝阳周鸣黄薇陈竺陈赛娟李桂源
- 关键词：鼻咽癌比较基因组杂交抑瘤基因瘤基因
- 定位于染色体9p21-22的一个新基因UBAP1的克隆测序及在鼻咽癌中的表达分析被引量：11
- 2001年
- 在染色体 9p2 1 2 2鼻咽癌杂合性丢失 (lossofheterozygosity,LOH)高频区 ,应用EST介导的定位 侯选克隆策略 ,用RT PCR及Northern杂交检测了 2 2个表达序列标记 (expressedsequencetag ,EST)在鼻咽癌细胞株HNE1和原代培养的正常鼻咽上皮细胞中的表达差异 ,并对其中一个在鼻咽癌细胞株HNE1中表达下调的EST检测了在鼻咽癌活检组织中的表达 .用生物信息学方法获得其全长cDNA序列 ,GenBank登录号AF2 2 2 0 4 3.该基因cDNA全长 2 70 1bp ,其开放阅读框 (openreadingframe ,ORF)编码一个含 50 2个氨基酸、分子量为 55kD的碱性蛋白质 ,在蛋白羧基端含有 2个连续的重要UBA功能域 (ubiquitinassociateddomain) ,属于遍在蛋白相关蛋白家族的一个新成员 ,经国际人类基因命名委员会同意 ,将其命名为UBAP1 (ubiquitinassociatedprotein 1 ) .Northern表达分析显示UBAP1在所检测的人组织中广泛表达 ,但在人的心脏、骨骼肌及肝脏中的表达较强 .UBAP1基因在63 2 % ( 1 2 1 9)的鼻咽癌活检组织中表达下调 .UBAP1基因作为一个遍在蛋白相关蛋白家族的新成员 ,结合其在 9p的重要定位信息 ,有必要进一步研究其表达下调参与鼻咽癌发生发展的可能机制 .
- 钱骏王洁如向秋阳剑波张小慧张必成曹莉李伟芳李桂源
- 关键词：鼻咽癌基因克隆
