张建设
- 作品数：3 被引量：20H指数：2
- 供职机构：长沙学院生物工程与环境科学系更多>>
- 发文基金：湖南省高校科技成果产业化培育项目国家自然科学基金湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学更多>>
- 生物技术专业科研与教学相结合的实践教学模式被引量：16
- 2009年
- 实践教学是高等教育教学体系的重要组成部分,是实现人才培养目标的重要环节。文章分析了生物技术专业的特点、现状,结合专业科研实验室优势,探讨了将科研工作与本科生的实践教学有机地结合,以达到培养从事生物技术研究、生产和开发的高素质创新型人才的目的。
- 向静张建设罗永兰
- 关键词：实践教学
- 青鱼生长激素在毕赤酵母中的表达被引量：4
- 2011年
- 根据GenBank数据库中登记的青鱼(Mylopharyngodon picens)生长激素(bcGH)基因序列(AF389238)设计特异性引物,采用RT-PCR技术扩增青鱼生长激素cDNA编码区,并通过定向插入含强启动子AOX I的表达载体pPIC3.5k、电击转入毕赤酵母GS115菌株、G418多克隆子筛选和测序验证等步骤进行了重组生长激素酵母菌诱导表达等相关实验,成功获得重组生长激素酵母菌(pPIC3.5k-bcGH重组酵母菌)。蛋白表达产物经SDS-PAGE和ELISA检测,在23 kD处发现一条与预期蛋白分子量大小一致的特异性条带,并且目的蛋白能与青鱼生长激素多克隆抗体特异性结合,说明bcGH在酵母胞内得到正确表达。表达条件优化过程中发现,诱导24 h已有重组蛋白表达,pH值4.5～7.0之间都能表达重组蛋白。在pH值6.5、0.5%甲醇、温度30℃和培养时间72 h的优化条件下,目的蛋白的表达量高达893 mg/L。
- 谢帝芝刘臻王赏初张建设肖调义鲁双庆
- 关键词：生长激素毕赤酵母
- 青鱼生长激素基因酵母工程菌发酵条件的研究被引量：1
- 2010年
- 为研究青鱼生长激素基因工程菌在豆粕中的发酵工艺,试验采用L25(56)正交设计探讨温度、pH、培养时间、豆粕质量浓度、接种量和诱导剂质量浓度等6个因素对青鱼生长激素基因工程菌的生长和蛋白表达量的影响。结果表明:各因子对蛋白表达量的影响明显,它们的作用大小依次为发酵时间>pH>接种量>发酵温度>诱导剂质量浓度>豆粕质量浓度,最优发酵组合条件为发酵时间96h、pH7、接种量5%、发酵温度30℃、诱导剂质量浓度1%及豆粕质量浓度6%。确立发酵工艺后进行10L发酵罐发酵,活菌数达到79.6亿CFU/mL,青鱼生长激素表达量占总蛋白的28.4%。
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- 关键词：毕赤酵母正交试验发酵条件
