张春鸽
- 作品数：11 被引量：17H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 不同启动子表达Cry1Ie蛋白的特性分析被引量：4
- 2012年
- 苏云金芽胞杆菌启动子P1Ac与T7启动子表达的Cry1Ie蛋白对鳞翅目害虫小菜蛾(Plutella xylostella)幼虫的杀虫活性有较大差异。P1Ac启动子表达的Cry1Ie蛋白LC50为1.73μg/mL,T7启动子表达的Cry1Ie蛋白LC50为18.18μg/mL,后者是前者的10.5倍。主要从形态、碱溶性及抗胰蛋白酶稳定性等方面对其进行了初步的探索。结果显示,两者在形态上无显著差异,均有相对较为规则的颗粒存在;在碱溶性方面无显著差异,均有约20.0%的包涵体能溶解于pH10.5 50.0 mmol/L Na2CO3的溶液;在对抗胰蛋白酶的稳定性方面无明显差异,由此说明这三方面都不是二者活性差异的原因,推测是T7启动子表达的Cry1Ie蛋白折叠不正确导致其活性较差。
- 张春鸽赵灿束长龙孙冰宋福平高继国张杰
- 关键词：T7启动子大肠杆菌
- 新型vip3Aa基因的克隆与杀虫活性的测定被引量：1
- 2012年
- 为了给生物防治提供更多的基因资源,以从黑龙江省分离的100株苏云金芽胞杆菌进行PCRvip3类基因鉴定,对vip3类基因进行克隆表达及生物活性测定,为vip基因储备奠定基础。利用vip3类通用引物进行基因鉴定并进行全长基因克隆表达和生物活性测定。结果表明,菌株LB73经Blast对比后发现含有vip3Aa类基因,克隆基因全长序列为2370bp,编码789个氨基酸残基,分子量为88kD,并在国际基因库GenBank中登记,其登录号为JQ228436,由Btδ-内毒素基因国际命名委员会正式命名为vip3Aa46。构建原核表达系统,并进行杀虫活性的测定。vip3Aa46甜菜夜蛾LC504.02μg/g,棉铃虫LC50387.72μg/g。生测结果表明,vip3Aa46表达的可溶性蛋白对甜菜夜蛾幼虫具有高毒力;对棉铃虫幼虫具有一定毒力。
- 赵世源李海涛张春鸽高继国
- 关键词：营养期杀虫蛋白甜菜夜蛾棉铃虫
- 高通量测序在苏云金芽胞杆菌基因发掘中的运用
- 苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）是一种世界上应用广泛的生防微生物,它具有高度的杀虫特异性和对人畜无害的优点。主要的杀虫成分是杀虫晶体蛋白（Insecticidal Crystal Pr...
- 张春鸽束长龙高继国宋福平张杰
- 关键词：苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白生物活性
- 文献传递
- 细菌低温蛋白酶及其在海参活性物质提取中的初步研究
- 海参是海洋中食用和药用的重要资源,海参中富含着大量的蛋白质、氨基酸、糖类、维生素族和矿物质元素等。传统的加工及烹饪海参的方法不利于人体对海参营养物质的吸收,造成了营养资源的浪费,本文的目的是探索并建立合适的深加工方法以提...
- 张春鸽
- 关键词：抗氧化性
- 文献传递
- 基于高分辨熔解分析的cry1I类基因的克隆、表达及活性分析被引量：1
- 2013年
- 本研究将高分辨熔解分析(high resolution melting assay,HRMA)的方法应用于cry1I类基因的分型。根据已报道的cry1I类基因的保守区设计一对扩增片段为131 bp的通用鉴定引物,利用高分辨熔点仪对产物的熔解曲线进行分析。利用此方法对本实验室保存的标准菌株HD-12进行了cry1I类基因的鉴定,克隆到2个新型的cry1Ib和cry1Id基因,被Bt国际命名委员会分别正式命名为cry1Ib11和cry1Id2。这两种基因在E.coli Rosetta菌株中能正常表达81 kDa的蛋白。Cry1Ib11和Cry1Id2蛋白对小菜蛾Plutellaxylostella二龄幼虫和亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis初孵幼虫具有显著的杀虫活性,LC50分别为6.13μg.mL 1和6.10μg.mL 1及11.18μg.mL 1和1.43μg.mL 1。但对甜菜夜蛾Spodoptera exigua及鞘翅目的大猿叶甲Colaphellus bowringi均没有明显毒杀作用。高分辨溶解分析法为新型cry基因的快速、准确鉴定提供了有效的工具。
- 赵灿张春鸽束长龙孙冰宋福平高继国张杰
- 关键词：苏云金芽胞杆菌克隆杀虫活性
- 利用高通量测序技术发掘Bt抗虫新基因
- 金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一种世界上应用广泛的生防微生物,它具有高度的杀虫特异性和对人畜无害的优点.主要的杀虫成份是杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Prot...
- 张春鸽束长龙高继国宋福平张杰
- 关键词：苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白生物活性
- 高通量测序在苏云金芽胞杆菌基因发掘中的运用
- 张春鸽束长龙高继国宋福平张杰
- 关键词：苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白生物活性
- 高通量测序在苏云金芽胞杆菌基因发掘中的运用
- 苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一种世界上应用广泛的生防微生物,它具有高度的杀虫特异性和对人畜无害的优点。主要的杀虫成分是杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Pr...
- 张春鸽束长龙高继国宋福平张杰
- 关键词：苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白生物活性
- 苏云金芽胞杆菌HBF-18菌株毒力相关基因的研究
- 是金龟子幼虫的总称,是地下害虫中最大类群,也是危害最大、造成损失最严重的种类.苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt) 是目前研究最多、应用最广的昆虫病原微生物.
- 张彦蕊束长龙张春鸽宋福平张杰
- 关键词：苏云金芽胞杆菌蛴螬测序杀虫活性
- 苏云金芽胞杆菌cry2Ab、cry9Ea基因的表达及活性分析被引量：4
- 2012年
- 旨在为农业害虫防治提供更多的苏云金芽胞杆菌基因资源,从中国吉林市龙潭山土壤样品中分离得到野生菌株命名为Bt LTS-7,扫描电镜显示该菌株产生晶体形状为双锥体和正方体,聚丙烯酰胺凝胶电泳显示该菌株产生130 kD和71 kD的晶体蛋白,通过PCR鉴定出该菌株中含有cry2Ab和cry9Ea基因,并成功克隆到了这两个新基因,并被Bt国际命名委员会正式命名为cry2Ab28和cry9Ea9,将两个基因分别在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,并进一步对其表达蛋白进行杀虫活性测定。结果显示,Cry2Ab28蛋白对棉铃虫(Helicoverpa armigera)初孵幼虫具有杀虫活性,LC50为32.45μg/mL。Cry9Ea9蛋白对小菜蛾初孵幼虫(Plutella xylostella)具有较高杀虫活性,LC50为0.77μg/mL。
- 李玉红李海涛高继国赵世源张春鸽赵灿
- 关键词：苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白生物活性
