张永艳
- 作品数：19 被引量：35H指数：3
- 供职机构：福建农林大学园艺学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 应用抑制性差减杂交技术筛选锦橙CTV应答基因被引量：1
- 2013年
- 【目的】探讨易感柑橘衰退病病毒(Citrus tristeza virus,CTV)品种锦橙CTV应答分子机理,筛选和分析CTV应答基因。【方法】以嫁接CTV强毒株TRL514的锦橙阳性材料叶片为试验方(Tester),用嫁接无毒枝条的CTV阴性锦橙叶片为驱动方(Driver),构建CTV侵染的锦橙的正向差减文库。【结果】随机挑选850个阳性克隆测序,其中742条测序成功,去除载体片段和接头序列后得到有效EST 692条。将所有EST序列对应到柑橘的预测基因组转录物,共涉及137个柑橘基因。应用BLAST2GO对这些特异性表达的基因进行功能归类和KEGG分析。结果表明,受CTV侵染的影响,锦橙能量代谢相关基因上调明显,与光合器官碳固定、氮代谢、淀粉和蔗糖代谢等途径相关的EST出现频率较高。另外,与抗逆防御以及苯基丙氨酸合成、类苯基丙烷代谢、类胡萝卜素合成等与植物防御素类物质合成密切相关的代谢途径相关基因较多。【结论】由于CTV的侵染,CTV易感品种锦橙基础代谢改变明显,须通过增强能量代谢和提高自身防御能力来维持自身生长和发育。
- 程春振曾继吾贝学军吴波阳佳位张永艳姜波朱世平闫树堂钟云钟广炎
- 关键词：柑橘差异表达基因CTV
- ‘伏令夏橙’原位转化体系的建立及优化被引量：3
- 2020年
- 以‘伏令夏橙’实生苗为材料进行原位转化体系建立及优化。首先,研究侵染部位对原位转化效率的影响:使用带有PBI121载体的农杆菌分别侵染5周龄‘伏令夏橙’实生苗上胚轴切口、顶芽切口(保留/去除真叶)2次,共培养3d后进行抗性筛选及暗处理,7周后提取叶片DNA用于转基因植株PCR鉴定;之后,以上胚轴切口作为侵染部位进一步研究苗龄对原位转化效率的影响。研究结果表明,5周龄上胚轴切口再生率为93.10%,转化率为20.68%;保留/去除真叶后侵染顶芽时,再生率分别为81.74%和94.55%,转化率分别为19.09%和17.82%;4周龄和6周龄上胚轴切口再生率为94.59%和91.50%,转化率为25.42%和19.36%。可见利用农杆菌介导的遗传转化法原位转化4周龄‘伏令夏橙’的上胚轴切口可获得较高的转化效率。原位转化操作简单、周期短、转化率高,在甜橙遗传育种研究中具有重要的应用价值。
- 谢幸男杨莉刘范田娜车婧如靳三鹏张永艳程春振
- 关键词：外植体
- 柑橘GAST1基因的克隆及生物信息学分析
- 2017年
- [目的]克隆一个受CTV(CitrusTristezaVirus,柑橘速衰病毒)诱导的GAST1基因,通过生物信息学分析手段揭示其可能的作用方式。[方法]以克里曼丁橘cDNA为材料,通过扩增获得该基因,并利用生物信息学软件进行分析。[结果]该基因编码序列(CDS)长度为357bp,预测可编码含有118个氨基酸残基的蛋白质,其中半胱氨酸、脯氨酸和丝氨酸含量较高,分别占总蛋白的10.2%、8.5%和8.5%。生物信息学分析结果显示,CcGAST1编码的蛋白为具有信号肽的亲水性蛋白,具有GAST家族蛋白所特有的GASA结构域。多重序列比对结果显示和其他物种GAST1蛋白一样,CcGAST1蛋白C端非常保守,含有12个保守的半胱氨酸。以不同植物GAST1蛋白序列构建进化树,发现克里曼丁橘与甜橙亲缘关系最近,其次是核桃。[结论]CcGAST1富含半胱氨酸和脯氨酸残基,其保守的GASA结构域和12个保守的半胱氨酸残基可能与其功能相关。
- 张永艳郝向阳钟云程春振
- 关键词：基因克隆生物信息学分析半胱氨酸
- 不同物候期油菜根系甲醇提取物对AMF孢子萌发和菌丝生长的影响
- 究不同物候期油菜根系物质对丛枝菌根真菌(AMF)孢子萌发和菌丝生长的影响,先设计了盛花期油菜根系甲醇提取物0.0025、0.005、0.0075、0.01、0.0125、0.015、0.0175、0.02、0.0225、...
- 刘娟娟张蕾涂波张永艳杨晓红
- 一种以柑橘土播实生幼苗为材料的快速转基因方法
- 本发明公开了一种以柑橘土播实生幼苗为材料的快速转基因方法，包括外植体的准备，农杆菌侵染液的准备，实生幼苗的创伤感染，和拟转化芽的分子生物学鉴定；所述外植体的准备直接以土播实生幼苗为外植体，即直接以土播实生幼苗为外植体转化...
- 程春振钟云闫化学钟广炎姜波曾继吾张永艳蒋侬辉胡敏伦周璧容
- 文献传递
- 柑橘和拟南芥RIN4基因的过表达载体构建及其对沙田柚的DNA转化被引量：1
- 2015年
- 用逆转承-cDNA聚合酶链式扩增(RT-PCR)方法 ,分别从克里曼丁橘和拟南芥中克隆出RIN4基因,连接到表达载体pFGC5941,构建了柑橘CcRIN4和拟南芥AtRIN4基因的过表达载体,并成功转入EHA105农杆菌.通过农杆菌介导法将过表达载体转入沙田柚,获得柑橘和拟南芥RIN4基因的转基因沙田柚植株各6株.
- 李菊程春振张永艳钟云钟广炎陆智明
- 关键词：表达载体构建拟南芥沙田柚DNA转化柑橘农杆菌介导法
- 网络视频资源在《植物生物技术概论》基因工程部分教学中的应用被引量：5
- 2017年
- 《植物生物技术概论》基因工程部分信息量大、概念和技术方法多、涉及范围广、内容抽象,但课时数有限,不利于学生吸收理解。将网络视频尤其是Jo VE视频应用于该部分内容的教学,对教学效果的提高大有裨益。对网络视频资源的应用在《植物生物技术概论》基因工程部分教学过程中取得的效果进行总结,可为该部分内容的教学提供一定借鉴。
- 程春振刘生财张永艳林玉玲陈裕坤张梓浩赖钟雄
- 关键词：基因工程视频资源教学
- 非洲菊CAT2基因的克隆及表达
- 2022年
- 为研究非洲菊过氧化氢酶(CAT)基因的序列特性及其在不同逆境处理下的表达水平,以‘玲珑’非洲菊为材料,利用RT-PCR技术成功克隆获得了一个编码序列(CDS)长度为1479 bp的CAT基因,对该基因及其编码蛋白进行了生物信息学分析,同时利用qRT-PCR技术研究了其在不同组织器官和不同胁迫处理下的表达水平.结果显示,CAT基因可编码492个氨基酸、分子质量为56.854 ku、等电点为6.5、无信号肽和跨膜结构的稳定亲水蛋白.其编码蛋白定位于过氧化物酶体,含有典型的CAT保守结构域和血红素结合位点.序列比对结果显示,非洲菊CAT基因与刺苞菜蓟CAT2基因的相似度最高,达88.00%,故将其命名为GjCAT2.进化分析显示,该蛋白与莴苣等菊科植物CAT的亲缘关系最近.GjCAT2基因在非洲菊花茎中的相对表达量最高,分别为叶、叶柄和花蕾的31.82、7.48和10.75倍.在聚乙二醇(PEG)模拟干旱和低温胁迫下,GjCAT2基因的相对表达量均呈“升—降—升”的趋势,分别于处理4和8 h时达到最大值;接种隐地疫霉初期,GjCAT2基因的表达受到极显著抑制,但侵染6 d时的相对表达量骤升为CK的3.11倍.本研究结果表明:GjCAT2属于典型性CAT,可能在非洲菊抵御干旱、低温以及隐地疫霉侵染过程中发挥重要作用.
- 卢珍红武欢焦元辰张永艳张永艳李绅崇杨春梅
- 关键词：非洲菊过氧化氢酶基因克隆
- 红橘感染衰退病后叶片离子组变化分析
- 2018年
- 应用现代高通量离子组谱分析技术研究了红橘感染衰退病后叶片离子组变化情况,在检测到的22种矿质元素,Hg,Mg和Se等3种元素的质量比在染病和健康植株间的差异极具有统计学意义(p<0.01),其中Hg的质量比在染病植株中极显著增高,Mg和Se的质量比极显著降低;Na,P,Mn,S和Ti等5种元素的质量比在染病和健康植株叶片中差异具有统计学意义(p<0.05),其中染病叶片中Na的质量比高于健康植株,其余均低于对照植株.
- 张文玲耿庆林张永艳
- 关键词：衰退病柑橘衰退病毒红橘
- 三明野生蕉和天宝蕉对Foc TR4侵染早期应答的差异被引量：6
- 2017年
- 以GFP标记的香蕉枯萎病菌Foc TR4作为病原菌,比较了水培条件下Foc TR4对"天宝蕉"和三明野生蕉的早期侵染情况.研究表明,Foc TR4在"天宝蕉"韧皮部的定殖明显早于三明野生蕉.枯萎病菌感染香蕉后会诱发香蕉细胞内活性氧爆发和激活寄主抗氧化系统.通过研究水培和土培条件下两种香蕉种质接种枯萎病菌后根系超氧化物歧化酶(SOD)变化情况,发现三明野生蕉根系SOD活性高于"天宝蕉",三明野生蕉感染枯萎病后根系SOD活性增强,而"天宝蕉"根系SOD活性下降,说明三明野生蕉的耐枯萎病能力可能与其根系较高和早期上调的SOD活性有关.
- 程春振马文昇刘炜婳张梓浩齐全孙雪丽张永艳赖钟雄
- 关键词：香蕉枯萎病绿色荧光蛋白超氧化物歧化酶
