张珑涓
- 作品数：24 被引量：102H指数：7
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人骨形成蛋白7基因重组2型腺相关病毒载体的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达被引量：4
- 2007年
- 目的构建人骨形成蛋白7基因(hBMP7)重组腺相关病毒载体,并观察其在兔骨髓间充质干细胞中的表达。方法将骨形成蛋白7基因片段克隆入穿梭质粒 pUC18获得重组质粒pUC18-hBMP7。Kpn Ⅰ和 Sa Ⅱ双酶切质粒 pUC18-hBMP7与 pSNAV,用 T4DNA 连接酶连接分别回收的两片段后转化大肠杆菌 DH5α感受态细胞,获得重组质粒 PSNAV-hBMP7,转染 BHK-21细胞,筛选培养,用能表达 Rap 和 Cap 的重组Ⅰ型单纯疱疹病毒 HSV1_(-rc)/ΔUL2感染此细胞,裂解细胞收获病毒液。采用氯仿处理-PEG/NaCl 沉淀-氯仿抽提法分离浓缩、纯化与测定病毒滴度。用 rAAV2-hBMP7和 rAAV2-EGFP 在体外分别转染兔骨髓间充质干细胞。流式细胞仪、RT-PCR 和 Western-blot 方法检测兔骨髓间充质干细胞中 hBMP-7基因的转录和表达。结果成功构建具有感染活性的重组腺相关病毒载体 rAAV2-hBMP7,病毒载体对兔骨髓间充质干细胞早期转染效率可达99.8%,hBMP7在兔骨髓间充质干细胞中可得到转录和表达。结论成功构建了人骨形成蛋白7基因重组腺相关病毒载体,rAAV2-hBMP7载体在体外可转染兔骨髓间充质干细胞,并获得较高的转染效率。
- 康焱廖威明盛璞义张珑涓原向伟雷磊黄保丁
- 关键词：骨髓祖代细胞中胚层人骨形成蛋白腺相关病毒
- 免疫性血小板减少症脾切除疗效与外周血Th亚群细胞因子表达的关系被引量：7
- 2014年
- 目的探讨原发性免疫性血小板减少症(ITP)脾切除血液学疗效与外周血辅助性T细胞(Th)亚群细胞因子的mRNA表达水平的关系。方法采用QuantiGene Plex(QGP)方法,分别检测14例手术有效(R组)和8例手术无效(NR组)的ITP患者腹腔镜脾切除术前后外周血Th1(IL-2、IFN-γ)、Th2(IL-4、IL-5、IL-6、IL-10)、Th3(TGF-β1)、Th17(IL-17)细胞因子的mRNA表达水平的变化。对照组为30例健康体检者。结果术前及术后R组TGF-β1mRNA的表达水平均明显高于NR组(P值分别为0.001和0.006)及对照组(P值分别为0.001和<0.001)。术前及术后R组和NR组之间IL-2、IFN-γ与IL-17 mRNA的表达水平差异均无统计学意义。结论脾切除疗效不同的ITP患者TGF-β1的mRNA表达水平存在差异,检测术前TGF-β1的表达水平有助于预测手术疗效。
- 郑冬张珑涓汪谦王俊黄晨松郑朝旭
- 关键词：免疫性血小板减少症脾切除术细胞因子
- 甲泼尼龙对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响被引量：1
- 2007年
- 目的探讨甲泼尼龙（MP）对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及机制。方法建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型20只，随机分为对照组、MP小剂量组、MP大剂量组。用药4周后观察裸鼠重量、肿瘤体积和重量、肿瘤组织切片透射电镜检查、放射免疫法测定血AFP浓度、荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测肿瘤组织血管内皮生长因子（YEGF），、基质金属蛋白酶2（MMP-2）的表达。结果MP大剂量组肿瘤重量（1．62±0．12）Vs（1．33±0．19）g、体积（0．63±0．05）Vs（0．56±0．05）cm^3大于对照组，该组裸鼠血AFP浓度高于对照组（7．5±1．14Vs（5．98±0．78）μg/L，VEGF mRNA、MMP-2mRNA表达显著增加。结论MP大剂量可以上调VEGF mRNA、MMP-2mRNA的表达，促进肝癌细胞生长、转移，小剂量无影响。
- 曾纪晓何晓顺马毅朱晓峰韩明张珑涓史成军
- 关键词：血管内皮生长因子基质金属蛋白酶
- 直肠癌术后严重并发症的危险因素分析被引量：5
- 2018年
- 目的探究直肠癌保肛术后30d严重并发症的危险因素。方法回顾性分析中山大学附属第六医院2010年1月至2014年10月间接受直肠癌保肛手术的956例病人的临床病理及并发症资料,采用单因素和多因素Logistic回归模型分析直肠癌保肛手术术后30d内严重并发症(Clavien-Dindo分级≥Ⅲ级)的危险因素。结果 956例病人中严重并发症发生率为6.3%(60/956)。按Clavien-Dindo并发症分级:Ⅲa级36例,Ⅲb级12例,Ⅳa级5例,Ⅳb级5例,Ⅴ级2例。单因素Logistic回归分析显示,术前合并症(OR=1.781、95%CI为1.04~3.048、P=0.035),术前白蛋白(OR=6.979、95%CI为3.057~15.930、P<0.001),术中估计出血量(OR=2.386、95%CI为1.375~4.138、P=0.002),术中输血(OR=2.698、95%CI为1.088~6.695、P=0.032)与直肠癌术后严重并发症的发生有关。Logistic多因素回归分析显示,术前存在合并症(OR=2.051、95%CI为1.160~3.627、P=0.014),术前白蛋白(≤35g/L)(OR=4.652、95%CI为1.776~12.182、P=0.002),术中估计出血量(>150ml)(OR=2.131、95%CI为1.190~3.816、P=0.011)是直肠癌术后严重并发症发生的独立危险因素。结论术前存在合并症、低白蛋白血症及术中出血量大是直肠癌术后30d内发生严重并发症的危险因素。
- 张宗进吴现瑞张珑涓刘华山姚秋琼刘炫辉周驰何小文王磊吴小剑汪建平兰平
- 关键词：直肠癌术后严重并发症
- ITP患者脾切除前后外周血Th亚群细胞因子的变化及意义被引量：7
- 2012年
- 目的:探讨辅助性T淋巴细胞(T helper lymphocyte,Th)亚群细胞因子在原发性免疫性血小板减少症(ITP)患者脾切除术前后的表达及意义。方法:采用QuantiGene Plex(QGP)方法检测22例ITP患者腹腔镜脾切除术前后外周血Th1(IL-2和IFN-γ)、Th2(IL-4、IL-5、IL-6和IL-10)、Th3(TGF-β1)和Th17(IL-17)细胞因子mRNA表达水平的变化。30例健康体检者作为对照组。结果:(1)术前组IL-2表达水平较对照组明显降低(P<0.05),IL-17表达水平较对照组明显升高(P<0.05),其它细胞因子表达水平在术前组和对照组之间无显著差异(P>0.05)。术后组TGF-β1表达较术前组和正常对照组均明显升高(P<0.05);术后组IL-2表达较术前有所升高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05)。其它细胞因子表达水平在术前组和术后组之间无显著性差异(P>0.05)。(2)术前IL-2与IFN-γ之间成正相关(r=0.647,P<0.01),术前其它细胞因子之间均无明显相关性(P>0.05)。术后3对细胞因子之间成正相关,分别是IL-2与IFN-γ(r=0.787,P<0.01),IL-17与IL-2(r=0.554,P<0.01),IL-17与IFN-γ(r=0.461,P<0.05);术后其它细胞因子之间均无明显相关性(P>0.05)。结论:ITP患者存在Th亚群细胞因子失衡,脾切除术可改善ITP患者部分Th亚群细胞因子的失衡。
- 王俊郑冬张珑涓郑朝旭
- 关键词：血小板减少脾切除术细胞因子类辅助性T淋巴细胞
- 巨噬细胞移动抑制因子和细胞周期蛋白D1的表达与胰腺肿瘤临床病理特征的关系及意义
- 2009年
- 目的探讨巨噬细胞移动抑制因子（MIF）和细胞周期蛋白D1（cyclinD1）的表达及其与胰腺癌临床病理特征的关系及意义。方法免疫组化方法检测胰腺肿瘤和正常胰腺组织中MIF和CyclinD1的表达，分析其表达与胰腺肿瘤临床病理特征的关系。结果89例胰腺癌组织中MIF和CyclinD1阳性表达率分别为88．8％和50．6％。临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期病例中MIF表达率分别为69．2％、94．7％、96．4％、100％，Ⅰ期与各期之间表达率的差异均有统计学意义（P〈0．05）；CyclinD1表达率分别为30．8％、47．4％、33．3％、68．8％。Ⅰ期表达率与Ⅲ、Ⅳ期之间的差异均有统计学意义（P〈0．05），与Ⅱ期之间差异无统计学意义。MIF表达与CyclinD1表达呈正相关（P〈0．05）。伴淋巴结转移病例中MIF和CyclinD1阳性表达率（97．5％和62．5％）均高于无淋巴结转移的胰腺肿瘤组织（81．6％和40．8％），差异均有统计学意义（P〈0．05）。发生肝转移的胰腺肿瘤组织中MIF表达率高于无肝转移组织（100％：85．9％，P〉0．05），CyclinD1表达率显著高于无肝转移组织（66．7％：46．5％，P〈0．05）。高、中、低分化组胰腺肿瘤组织中MIF和CyclinD1阳性表达率分别为61．9％、73．8％、96．2％和28．6％、45．2％、76．9％，3组之间差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论MIF和CyclinD1过表达与胰腺肿瘤的临床分期、淋巴结和肝转移及组织分化密切相关。
- 赵杰夏金堂李雯张珑涓王花伍兆锋滕元徐晨
- 关键词：胰腺肿瘤巨噬细胞游走抑制因子细胞周期蛋白D1肿瘤转移
- 抗原致敏IL-12基因修饰的树突状细胞诱导抗肾癌免疫的体外研究被引量：3
- 2007年
- 【目的】探讨肾癌细胞抗原致敏白介素-12(IL-12)基因修饰的树突状细胞(DC)体外诱导、激活细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫杀伤肾癌细胞的效能及相关免疫机制。【方法】采用重组逆转录病毒介导IL-12基因修饰人外周血单个核细胞(PBMC)来源的DC;超声细胞破碎法提取肾癌细胞粗提抗原(Ag)致敏经IL-12转染的DC;ELISA法检测各组DCs和各组CTLs上清中IL-12、IFN-γ因子的分泌水平;流式细胞仪(FACS)分析各组DCs表面CD83、CD86、HLA-DR的表达;MTT法检测DC刺激同源T淋巴细胞增殖的能力及CTL免疫杀伤肾癌细胞的效能;统计学分析比较各组间的差异。【结果】经IL-12基因修饰和抗原致敏后的DC高表达CD83和CD86分子分别为(65.9%±3.1%,92.8%±3.4%),分泌高水平IL-12(279.6±1.7)pg/mL及IFN-γ(892±31)pg/mL,刺激同源T淋巴细胞增殖明显,诱导激活的CTL上清中IFN-γ水平(1146±31)pg/mL显著高于对照组;CTL对肾癌细胞有强大的杀伤作用,显著高于各对照组。【结论】经IL-12基因修饰和抗原致敏后的DC能有效地诱导CTL特异性抗肿瘤免疫应答。其机制可能与IL-12基因修饰和抗原致敏活化了DC抗原提呈第二信号,促进了DC高分泌IL-12因子,激活了T淋巴细胞致使CTL分泌IFN-γ的能力增强密切相关。
- 罗道升戴宇平张珑涓赵继宗郑伏甫罗彬
- 关键词：肿瘤抗原白细胞介素-12树突状细胞肿瘤疫苗
- 微小RNA-145在肝癌组织中的表达及临床意义
- 汪谦杨学伟黄晓卉陈锡林陈连周张珑涓
- 重组35型腺病毒介导人骨形成蛋白基因对脂肪源性干细胞的诱导分化被引量：3
- 2007年
- 目的在体外运用人骨形成蛋白7(human bone morphogenetic protein7,hBMP-7)基因重组35型腺病毒(recombinant adenovirus's containing fibers derived from B-group serotype35,rAd5/F35)诱导大鼠脂肪源性干细胞(adipose-derived adult stem cell,ADASC)向成骨细胞定向分化,为骨组织工程探索新的细胞来源。方法以pcDNA1.1/氨苄青霉素-hBMP-7质粒为模板扩增hBMP-7基因,将回收的PCR产物片段克隆入pDC316载体,获得重组质粒pDC316-hBMP-7。骨架质粒pBHG-fiber5/35和穿梭质粒pDC316-hBMP-7共转染293细胞,同源重组产生rAd5/F35-hBMP-7。同样的方法构建rAd5/F35-增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)。在体外分别转染大鼠ADASC并留置空白对照。观察细胞形态和生长情况,ELISA检测转染基因的转录和表达,检测钙结节和骨钙素等成骨细胞表型。结果PCR、酶切鉴定表明rAd5/F35-hBMP-7质粒构建正确。rAd5/F35-EGFP对大鼠ADASC中转染效率可达90%以上,hBMP-7基因存在于转染后的ADASC中并表达相应的蛋白,诱导组钙结节形成,电镜见胞质中有钙质成分,碱性磷酸酶阳性,骨钙素表达增强。结论rAd5/F35介导hBMP-7基因可促进ADASC向成骨细胞定向分化。
- 康焱廖威明袁振华张珑涓原向伟雷磊黄保丁
- 关键词：腺病毒脂肪源性干细胞人骨形成蛋白基因治疗
- Annexin A1在胃癌中的表达及其与胃癌预后的关系被引量：10
- 2011年
- 【目的】通过检测Annexin A1蛋白在胃癌原发灶和转移灶中表达,探讨Annexin A1表达的病理临床意义及对预后的影响。【方法】构建组织芯片包含胃癌原发灶及相应的转移灶70对、癌旁组织30例,应用免疫组化方法检测Annexin A1在胃癌组织芯片中的表达,结合病理临床资料及生存资料,分析Annexin A1表达与病理临床参数的相关性。【结果】Annexin A1在癌旁组织中不表达,在胃癌原发灶中的阳性表达率为4/70(5.7%),淋巴结转移灶中的表达率为17/70(24.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移灶ANXA1的表达与TNM高分期相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示淋巴结转移灶ANXA1表达阳性组患者生存时间较阴性组短,差异有统计学意义(P<0.05)。logistic回归多因素分析ANXA1表达阳性是胃癌早期死亡的危险因素。【结论】Annexin A1的表达与肿瘤的远处转移、胃癌患者的早期死亡密切相关。
- 张珑涓李斌谢至陈连周黄晓卉苏乔李雯毕颎
- 关键词：胃癌ANNEXINA1预后
