方草晖
- 作品数：9 被引量：26H指数：2
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- 人巨细胞病毒先天性潜伏感染老龄小鼠肺组织的实验研究被引量：2
- 2007年
- 目的 观察HCMV先天性潜伏感染老龄小鼠肺组织的病理改变，为进一步研究HCMV潜伏感染再激活与肺部疾病的关系提供初步依据。方法HCMV AD169株感染BALB／c小鼠雌雄配对，所生子鼠饲养18个月后随机取6只腹腔注射环磷酰胺为病毒激活组，另取6只为病毒潜伏组；同样方法设立DMEM激活组和DMEM未激活组为对照。取各组小鼠肺组织进行病毒分离与鉴定、PCR和RT-PCR检测HCMVUL83基因及其转录产物、HE染色等。结果 病毒激活组小鼠肺组织病毒分离、PCR及RT-PCR均为阳性；HE染色可见肺泡间隔增宽，有大量炎性细胞浸润，肺泡腔有渗出，可观察到HCMV特征性包涵体。病毒潜伏组仅PCR为阳性，其余均为阴性。对照组小鼠所有结果均为阴性。结论HCMV AD169株可引起小鼠先天性肺组织潜伏感染，并在免疫抑制剂作用下可能激活转变为活动性感染造成肺组织病理损伤。
- 姚娟方草晖王明丽
- 关键词：人巨细胞病毒先天性感染
- 一种培养鉴定风疹病毒的简便试验方法的建立
- 2004年
- 目的 建立使风疹病毒 (RV)在Vero细胞 (非洲绿猴肾传代细胞株 )上产生的细胞病变效应 (CPE)易于观察的简便试验方法 ,以利于病毒的分离、培养与鉴定。方法 在RV接种Vero细胞 4天后 ,用不同 pH值 (4 0、4 5、5 0、5 5、6 0、7 0 )的融合营养液处理细胞 ,继续按常规条件培养 1天后 ,在倒置显微镜下观察RV引起的特征性CPE 多核巨细胞 ,染色后计数多核巨细胞的形成率。同时检测在不同条件(融合时间、病毒接种初始滴度 )下 ,多核巨细胞形成率的变化。结果 感染RV的Vero细胞经过酸性融合营养液的处理 ,可出现RV特征性CPE 多核巨细胞。发现在 37℃、pH5 0的酸性融合营养液处理染毒细胞 10min后 ,继续培养 1天 ,出现的细胞病变形态最典型 ,染色后计数发现多核巨细胞的形成率最高 ,为 14 7% (P <0 0 1)。融合处理的时间对多核巨细胞的形成率没有影响。随着病毒接种初始滴度的降低 ,多核巨细胞的形成率也相应降低。结论 此方法简单、易行 ,使RV在Vero细胞上产生的细胞病变清晰易观察。
- 方草晖胡勇张文艳类延花金晶吴建军王明丽
- 关键词：风疹病毒巨细胞
- 双黄连对人巨细胞病毒感染小鼠肝组织病毒DNA载量影响被引量：12
- 2005年
- 目的研究双黄连(Shuanghuangliang,SHL)粉针剂对人巨细胞病毒(humancytomegalovirus,HCMV)感染的小鼠肝组织病毒DNA载量的影响。方法以HCMV感染小鼠建立小鼠肝炎模型后,用不同剂量双黄连腹腔注射进行治疗。用药10d后,颈椎脱臼处死动物取肝脏,用荧光定量PCR的方法检测小鼠肝组织HCMVDNA载量;HE染色法对肝脏组织作病理检查;眼眶静脉丛采血用于ALT、AST酶活性的测定。结果双黄连大、中剂量治疗组肝组织中HCMVDNA载量平均值分别为8.3261copies/mg、9.1476copies/mg,较感染模型组(载量平均值为3875.4760copies/mg)降低(P<0.01),与更昔洛韦(ganciclovir,DHPG)治疗组(载量平均值为9.3280copies/mg)差异无显著性(P>0.05),双黄连小剂量组(载量平均值为3812.8980copies/mg)与感染模型组差异无显著性(P>0.05);双黄连大、中剂量治疗组肝脏ALT、AST水平较模型组降低,病理损伤明显减轻;小剂量治疗组与感染模型组无差异;双黄连大、中剂量组和更昔洛韦组差异无显著性。结论双黄连能明显降低HCMV感染小鼠肝组织中病毒DNA载量,能减轻HCMV性肝炎模型鼠肝功能损害,改善肝脏病理变化。
- 吴建军刘贵育陈贵海候舒方草晖王明丽
- 关键词：人巨细胞病毒双黄连荧光定量PCR
- HCMV先天性感染胎鼠脑组织中iNOS基因的表达被引量：1
- 2003年
- 目的 研究人巨细胞病毒 (HCMV)先天性感染小鼠及在不同剂量诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)抑制剂和促进剂的干预下脑组织中的iNOS基因表达情况。方法 将 6～ 8周龄BALB/c小鼠分为 6组 ,每组 6只 ,♀♂各半。A组腹腔注射HCMV 1 0ml,B组、C组腹腔注射HCMV 1 0ml后2d ,分别每天腹腔注射氨基胍 (AG) 2 0 0mg/kg、2 0mg/kg ,D组、E组腹腔注射HCMV 1 0ml后 2d ,分别每天腹腔注射左旋精氨酸 (L Arg) 30 0mg/kg、30mg/kg ,F组为DMEM对照组 ,每天每只 0 2ml。持续 17d。以上各组在孕鼠受孕第19天 ,剖腹取胎鼠 ,观察各组胎鼠生长发育及体重 ,有无皮下出血、淤血等情况 ,同时取胎鼠脑组织 ,作以下检测 :①硝酸还原酶法测定脑组织匀浆中NO代谢产物亚硝酸盐的含量。②RT PCR测iNOSmRNA的转录。结果 HCMV感染各组孕鼠在孕 19d ,其体重明显低于对照组 ,有部分胎鼠发育迟缓并可见明显的出血现象。感染各组胎鼠脑组织匀浆NO代谢产物明显高于DMEM对照组 (P <0 0 0 1) ,以B组尤为明显 ,A、C、E组间无差异显著性。RT PCR在感染各组均扩增出iNOSmRNA特异性条带表达 ,B组信号量最高 ,D组信号最弱。DMEM对照组未检测到iNOS特异性条带。结论 HCMV先天性感染可刺激胎鼠脑组织iNOS的表达 ,其表达产物NO可能参与了脑组织病理损伤?
- 余莉李艳秋张文艳方草晖类延花吴建军金晶王明丽
- 关键词：人巨细胞病毒感染胎鼠脑组织INOS基因
- 人巨细胞病毒先天性潜伏感染老年小鼠肺组织的实验研究
- 目的观察HCMV先天性潜伏感染老年小鼠肺组织的病理改变,为进一步研究HCMV潜伏感染再激活与肺部疾病的关系提供依据。方法HCMV AD169株感染小鼠雌雄配对,子鼠饲养 18个月后随机取6只腹腔注射环磷酰胺为病毒激活组,...
- 姚娟方草晖王明丽
- 文献传递
- HCMV潜伏感染老龄BALB//c小鼠病理学模型的建立
- 目的 本研究首次用HCMV AD169株感染BALB／c小鼠，建立HCMV AD169株潜伏感染的老龄BALB／c小鼠病理学模型，为HCMV潜伏感染及其再激活机制的研究提供一个实验平台，同时探讨HCMV IE及UL83基...
- 方草晖
- 关键词：巨细胞病毒
- 文献传递
- HCMV pp65 DNA疫苗诱导小鼠的细胞免疫应答被引量：9
- 2003年
- 目的 构建含HCMV pp65336～ 50 7位氨基酸的重组真核表达质粒 pcDNA3 1 pp65作为HCMVpp65基因疫苗 ,观察其诱导小鼠的细胞免疫应答情况。方法 以 6～ 8周龄♀Balb/c小鼠为动物模型 ,试验组和对照组各 6只。试验组于股四头肌注射pp65DNA疫苗 ,对照组注射空载体pcDNA3 1。 2组小鼠分别在 0d、5d、3周注射该DNA疫苗 2 0 0μg。在末次免疫后 3d ,无菌取小鼠脾细胞 ,并用ConA和重组HCMV pp65336～ 50 7作为抗原刺激 ,吉氏液染色观察T淋巴细胞的形态学变化 ,并计算转化率。MTT法对脾脏的特异性杀伤细胞率和淋巴细胞的增殖指数进行测定 ,间接ELISA定量检测脾细胞上清中IFN γ的含量。结果 pp65336～ 50 7抗原刺激的DNA疫苗免疫鼠脾细胞体积变大 ,胞浆增多 ,核仁增多 ;淋巴细胞增殖试验示pp65336～ 50 7抗原能特异性刺激免疫鼠脾细胞增殖 ;试验组IFN γ较对照组增高 ,其含量为 80 0ng/L。与对照组比较 ,差异均具显著性 (P<0 0 5)。试验组及对照组脾细胞杀伤率分别为 :56 0 5 %±1 3 64 %、9 85 %± 2 0 6 % ,试验组脾细胞CTL活性比对照组增高 (P <0 0 5)。
- 李艳秋余莉方草晖张文艳王明丽
- 关键词：HCMVPP65DNA疫苗小鼠细胞免疫应答巨细胞病毒感染
- 小鼠心肌组织裂解上清液诱导小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞凋亡被引量：1
- 2005年
- 目的研究小鼠心肌上清液诱导小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞凋亡的作用.方法在Sp2/0细胞培养孔中,分别加入不同稀释度(1∶6,1∶12,1∶24)的小鼠心肌上清液和环磷酰胺,24h后镜下观察细胞形态,并于48h后流式细胞仪检测凋亡细胞的比率;同时,Sp2/0细胞和小鼠心肌细胞共培养,10h后观察Sp2/0细胞形态学变化;并用不同稀释度(1∶5,1∶10,1∶20,1∶40)小鼠心肌裂解上清液、肝脏裂解上清液、胸腺裂解上清液及环磷酰胺诱导Sp2/0,HeLa,Hep-2和Vero细胞凋亡,并比较其差异.结果不同稀释度的心肌裂解上清液均可诱导Sp2/0细胞的凋亡,尤以高稀释度更明显;小鼠心肌细胞与Sp2/0细胞共培养10h后,少部分Sp2/0细胞出现凋亡;小鼠心肌裂解上清液、肝脏裂解上清液、胸腺裂解上清液均可引起Sp2/0,HeLa,Hep-2和Vero细胞发生凋亡,但小鼠心肌裂解上清液作用明显,且作用时间持久.结论小鼠心肌组织裂解上清液具有明显诱导小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞凋亡的作用.
- 王玮张文艳吴建军类延花金晶方草晖胡勇王明丽
- 关键词：细胞凋亡
- 二甲亚砜对人巨细胞病毒初次分离促进作用的实验观察被引量：1
- 2004年
- 目的 观察二甲亚砜 (DMSO)对人巨细胞病毒(HCMV)初次分离的影响。方法 将临床收集的 11例患者尿标本接种至两组人胚成纤维细胞 (HF)细胞中进行HCMV分离。 1组为DMSO细胞组 ,即在培养液中添加了终浓度为1%的DMSO ;另 1组为常规细胞组接种组 ,设为对照 ,不作任何处理。待细胞出现HCMV特征性细胞病变 (CPE)时 ,通过PCR法测定HCMVDNA加以确证。结果 11例标本中 ,两组均有 5例标本出现HCMVCPE ,且标本号一致。但DMSO细胞组CPE出现时间比对照组提前约 9～ 12d。结论 DMSO对HCMV初次分离的阳性结果没影响 ,但可使HCMV特征性CPE的出现得以提前 ,加快了临床标本中HCMV的分离。
- 张文艳胡勇余莉方草晖类延花金晶吴建军王明丽
- 关键词：二甲亚砜人巨细胞病毒提纯
