李光耀
- 作品数：13 被引量：88H指数：3
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Tmub1对再生肝细胞有丝分裂的影响及其机制被引量：1
- 2017年
- 目的探讨Tmub1对再生肝细胞有丝分裂的影响及与securin的相互作用机制。方法使用40只雌性SD大鼠建立肝大部分切除术后肝再生模型,于术后0、6、12、24、48、72、96、168 h分别取再生肝组织,RT-qPCR和Western blot检测Tmub1和securin在肝再生过程中的mRNA与蛋白表达变化趋势。在大鼠正常肝细胞系BRL-3A中分别建立慢病毒稳定过表达Tmub1、干扰Tmub1和阴性对照组细胞株,用诺考达唑处理获取同步于有丝分裂期的细胞,免疫荧光观察Tmub1过表达组和阴性对照组细胞有丝分裂情况,并用免疫沉淀和Western blot检测Tmub1过表达、Tmub1干扰和阴性对照组BRL-3A细胞中securin的泛素化水平。结果 Tmub1的mRNA和蛋白水平在肝切除术后24、48 h最高,securin的mRNA水平也在48 h最高,而蛋白水平在48 h最低。Tmub1过表达可影响大鼠肝细胞有丝分裂,且securin泛素化水平显著低于阴性对照组(P<0.01);Tmub1干扰组securin泛素化水平显著高于阴性对照组(P<0.01)。结论 Tmub1可通过抑制securin的泛素化影响大鼠再生肝细胞的有丝分裂。
- 付航玮陈健许建华李光耀陈平
- 关键词：肝再生细胞增殖细胞周期泛素化
- 胰岛素瘤误诊为阿尔茨海默病1例
- 2017年
- 胰岛素瘤是一种少见的肿瘤,临床误诊率较高,现就本院诊治的1例胰岛素瘤患者情况报道如下。1临床资料患者,男,35岁,因进行性智力障碍和认知功能不全3年余于2011年9月就诊本院神经内科。患者于2008年7月开始出现记忆力减退,计算障碍及定向障碍,且病情进行性发展。随着病情恶化,甚至无法辨识回家的道路。同时,患者食欲、食量较前增加,在就诊前1年中,体质量增加了6kg。
- 伍强李光耀皮儒先郭丽萍蓝翔
- 关键词：胰岛素瘤阿尔茨海默病智力障碍误诊率体质量海马体积
- STAT3在肝细胞增殖过程中对C/ebpβ表达的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨STAT3在IL-6刺激肝细胞增殖过程中对C/ebpβ表达变化的影响。方法用含15 ng/ml的IL-6培养基培养大鼠正常肝细胞BRL-3A,运用CCK试剂盒检测该细胞在IL-6刺激后不同时间里的增殖情况,Western blot技术检测STAT3、P-STAT3、C/ebpβ的蛋白表达变化情况;利用siRNA瞬时转染技术抑制STAT3在BRL-3A细胞中的表达并观察IL-6刺激肝细胞增殖过程中C/ebpβ的表达变化。结果 IL-6能有效的刺激肝细胞增殖,在增殖早期STAT3、P-STAT3、C/ebpβ表达均明显上调;在肝细胞增殖过程中沉默STAT3后C/ebpβ表达下调。结论在IL-6肝细胞增殖过程中STAT3对C/ebpβ起正向调控作用。
- 匡怡刘孟刚魏东陈红旭李光耀陈平
- 关键词：肝再生STAT3P-STAT3IL-6
- Tmub1过表达及沉默慢病毒载体转染对大鼠BRL-3A肝细胞增殖的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨Tmub1蛋白在肝细胞增殖中的作用。方法分别使用Tmub1沉默慢病毒载体、Tmub1过表达慢病毒载体及对应的空载体转染大鼠BRL-3A肝细胞,得到稳定转染的细胞。转染后采用Western blotting检测Tmub1蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期。结果转染LV-Tmub1慢病毒的肝细胞Tmub1蛋白表达明显增加,转染LV-Tmub1-RNAi慢病毒的肝细胞Tmub1蛋白表达明显降低,与正常肝细胞比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。转染LV-Tmub1慢病毒的肝细胞增殖最快,转染LV-Tmub1-RNAi慢病毒的肝细胞增殖最慢,两组之间差异有统计学意义(P<0.01)。过表达Tmub1慢病毒载体转染的肝细胞的G2+S期明显长于沉默Tmub1慢病毒载体转染的肝细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Tmub1蛋白可促进BRL-3A肝细胞的增殖。
- 赵晓彪李光耀刘孟刚范霞陈平
- 关键词：肝细胞细胞增殖慢病毒感染
- Hsa_circ_PVT1在肝细胞癌中的表达及意义被引量：6
- 2018年
- 目的探讨人肝细胞癌(HCC)中circ-PV T1的表达及其对肝癌细胞增殖的影响,并探讨其临床意义。方法利用RT-qPCR技术检测46例人肝癌组织/癌旁组织中circ-PVT1的表达水平,并且分析病理指标与其表达水平的关系;体外培养人正常肝细胞系(L02)、人肝癌细胞系(HepG2、SMMC-7721、MHCC-97H、MHCC-97L、HCC-LM3),利用RT-qPCR技术检测circ-PVT1的表达水平。利用脂质体转染技术体外转染si-circ PVT1,敲低circ-PVT1在HepG2、SMMC-7721细胞系中的表达量,同时设置阴性对照组,通过CCK-8实验、EdU实验检测干扰circ-PVT1表达对肝癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术观察干扰circ-PVT1表达对肝癌细胞周期的影响。结果 circ-PVT1在人肝癌组织中表达量明显高于癌旁组织(P<0.001),且其表达水平与肿瘤大小、TNM分期及分化程度相关;同样,肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721、MHCC-97H、MHCC-97L、HCC-LM3中circ-PV T1表达水平也明显高于正常肝细胞系L02(P<0.05);与阴性对照组比较,circ-PVT1干扰组HepG2及SMMC7721的增殖能力明显降低。结论在人HCC的诊断中,circ-PVT1可能作为一种潜在的生物标志物予以应用,并且可能成为一种新型的增殖因子。
- 朱元鑫付航玮林夏蓝翔马钰李光耀董睿王宇洲陈平
- 关键词：肝细胞癌细胞增殖细胞周期
- 大鼠Tmub1基因过表达慢病毒载体的构建被引量：3
- 2016年
- 目的构建Tmubl基因的过表达慢病毒载体（LV—Tmubl），为研究Tmubl蛋白在肝细胞增殖过程中的作用提供实验材料。方法化学合成Tmubl基因序列，用BamHI／AgeI酶切化学合成含有目的基因的质粒及GV287载体，PCR产物连接入线性化表达的载体。PCR鉴定引物，再对PCR鉴定阳性的克隆进行DNA测序和比对分析。使用构建的LV—Tmnbl，转染293T细胞，荧光法检测构建的慢病毒滴度。结果成功构建了LV-Tmubl，并获得相应的病毒，病毒滴度为2×10^8TU／mL。结论LV-Tmubl为进一步研究Tmubl蛋白在肝细胞增殖中的作用提供了实验基础。
- 赵晓彪李光耀刘孟刚范霞陈平
- 关键词：基因
- 肝动脉化疗栓塞术治疗中晚期肝癌患者的临床效果分析
- 目的:观察肝动脉化疗栓塞术治疗中晚期肝癌患者的临床效果。方法:选取我院收治的中晚期肝癌患者70例(2013年12月~2016年12月期间)作为本次观察对象。使用数字表法将其简单随机化分为观察组和对照组,每组占35例。一组...
- 伍强徐倩李光耀皮儒先刘坤陈平
- 关键词：肝动脉化疗栓塞术中晚期肝癌重组人血管内皮抑制素
- Hsa_circ_0000711在人肝癌细胞系中的功能研究被引量：3
- 2018年
- 目的研究环状RNA hsa_circ_0000711在人肝癌细胞系中的表达以及对肝癌细胞生物学功能的影响。方法利用RT-qPCR检测环状RNA hsa_circ_0000711在肝癌细胞系的表达;通过小干扰RNA特异性敲低hsa_circ_0000711的表达;通过CCK-8实验检测肝癌细胞系的增殖情况;利用流式细胞技术检测细胞周期及细胞凋亡。Western blot检测下调hsa_circ_0000711后Cyclin D1、CDK4、cleavaed Caspase 3及Bcl-2蛋白的表达水平。结果 Hsa_circ_0000711在肝癌细胞HepG2和SMMC-7721中明显高表达(P<0.05)。与对照组相比,hsa_circ_0000711干扰组的肝癌细胞增殖能力显著降低(P<0.05),处于G_1期细胞增多(P<0.05),且凋亡细胞显著增加(P<0.05)。干扰hsa_circ_0000711的表达后,肝癌细胞中Cyclin D1、CDK4和Bcl-2的蛋白表达量显著降低(P<0.05),cleavaed Caspase 3蛋白表达量显著升高(P<0.05)。结论 Hsa_circ_0000711可能通过调控细胞周期及凋亡影响肝癌细胞的增殖。
- 林夏朱元鑫付航玮李光耀陈平
- 关键词：肝癌细胞周期细胞凋亡细胞增殖
- 肝部分切除术后Tmub1蛋白与securin蛋白的相互作用研究被引量：3
- 2014年
- 目的探讨肝部分切除术后Tmub1蛋白与securin蛋白的相互作用。方法 SD大鼠30只,随机分为肝切除术后0、24、48h组,每组10只。0h组行肝切除术后直接灌注肝脏并取原代肝细胞,后两组分别于术后24、48h灌注肝脏提取原代肝细胞。每组肝细胞中一部分行原代肝细胞培养,并通过免疫荧光及激光共聚焦实验检测Tmub1蛋白与securin蛋白的共定位情况;另外一部分肝细胞经裂解后提取蛋白,行免疫共沉淀及Western blotting检测Tmub1/securin共沉淀蛋白的表达。结果激光共聚焦实验结果显示,肝切除术后0h细胞核内几乎没有Tmub1和securin蛋白表达,术后24h及48h Tmub1与securin蛋白大量共定位于细胞核内;免疫共沉淀及Western blotting检测结果显示,术后0h Tmub1/securin蛋白条带较弱,术后24-48h明显增强（P〈0.01）,但24h与48h之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 Tmub1在正常肝细胞中几乎不与securin结合,但在肝切除术后从胞质进入细胞核,与securin蛋白相互结合,从而抑制肝细胞的增殖。
- 赵晓彪李光耀刘孟刚范霞陈平
- 关键词：肝再生肝切除术
- 大鼠肝再生过程中miR-27b与Tmub1表达相关性研究
- 2015年
- 目的探讨miR-27b与Tmub1在大鼠70%肝大部分切除术肝脏再生过程中的表达相关性。方法将SD雄性大鼠(180±20)g,随机分为实验组(肝部分切除术,partial hepatectomy,PH)和假手术组(剖腹探查手术,exploratory laparotomy),依次提取0、12、24、48及72 h原代肝细胞并留取组织标本,利用real-time PCR检测不同时间段肝脏内miR-27b与Tmub1 m RNA的量,并利用Western blot检测不同时间段肝脏内Tmub1蛋白含量,从而分析出miR-27b与Tmub1蛋白表达的时间相关性;将miR-27b模拟物转染入肝细胞,采用荧光素酶报告基因检测系统观察miR-27b对Tmub1表达的影响。结果肝切除12、24、48及72 h后PH组miR-27b表达较假手术组均显著下降(P<0.05),而该相同时相点Tmub1 m RNA及蛋白水平显著增高(P<0.05);改变miR-27b的表达后,含Tmub1基因序列的报告基因荧光素酶活性明显下降(P<0.05)。结论肝再生过程中miR-27b与Tmub1的表达呈负相关,miR-27b可能参与了Tmub1的表达调控过程。
- 李光耀刘孟刚赵晓彪陈景祥匡怡陈平
- 关键词：肝再生
