李锡坤
- 作品数：5 被引量：41H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院烟草研究所更多>>
- 发文基金：国家烟草专卖局基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>
- 枯草芽孢杆菌Tpb55抗菌蛋白纯化特性分析被引量：1
- 2011年
- 枯草芽孢杆菌Tpb55分离自烟草叶围,对烟草赤星病菌具有较强的拮抗能力。除去菌体培养液以90%饱和度硫酸铵沉淀所得的拮抗粗提液对热稳定,在pH为5.0～10.0范围内较稳定,对木瓜蛋白酶,蛋白酶K,胃蛋白酶不敏感。粗提液经DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G-75(1.6 cm×80 cm)凝胶层析,纯化出一种抗菌蛋白,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白分子量测定,该抑菌蛋白分子量约为47.8 kD,自动Edman降解法从Bst1N端测得的氨基酸序列为:Met-Glu-Ile-Phe-Lys-Tyr-Met-Glu-Thr-Tyr-Asp-Tyr-Glu-Gln-Leu-Val-Phe-Cys-。
- 李佰乐王海滨孔凡玉张成省王静李锡坤
- 关键词：抗菌蛋白分离纯化测序
- 烟草黑胫病菌0号生理小种不同条件下培养特性的研究被引量：3
- 2011年
- 研究了烟草黑胫病菌0号生理小种的若干培养性状,为进一步展开与之相关的研究和综合防治提供理论基础。用培养基、光照、菌龄、诱导剂和诱导时间等不同因素研究了对烟草黑胫病菌0号生理小种的生长速度、产孢量和游动孢子释放量等方面的影响。结果表明,燕麦培养基较适于其生长和产生孢子囊,光照限制其生长;在本实验周期内,培养21 d的菌丝较适宜诱导,0.1%KNO3溶液浸泡菌丝有助于孢子囊的产生;经26℃培养72 h后,突降12℃处理0.5 h,结合1%葡萄糖溶液可促使孢子囊释放游动孢子,并延长后者的活动时间。
- 苏振刚王静周佳李锡坤郑林林李元元赵百英杨帆王元英
- 关键词：烟草黑胫病菌
- 湖北省烟草黑胫病病原生理分化研究
- 烟草黑胫病(Tobacco Black Shank)是由烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)引起的危害烟草生产的重要病害之一,可以危害所有的栽培烟草,破坏力极强,严...
- 李锡坤
- 关键词：烟草黑胫病菌生理小种致病性分化PCR-RFLP分子鉴定
- 湖北省烟草黑胫病菌生理小种研究初报被引量：11
- 2011年
- 在湖北省襄樊、恩施等主要烟区采集烟草黑胫病病株样本111个,分离纯化出30个烟草黑胫病菌株。采用游动孢子悬浮液注射接种鉴别寄主和TTZ(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)颜色反应两种方法鉴定其生理小种类型。结果表明,供试的30个菌株在TTZ培养基中的反应皆为红色,有24个菌株在鉴别寄主反应中对L8和NC1071有较强致病力,而对N.nesophila无致病力,应为1号生理小种,占供试菌系的80%,为湖北省优势生理小种;其他6个菌株中有4个菌株对NC1071有较强致病力,但对L8致病力较弱,有1个菌株对L8和NC1071致病力较弱;1个菌株对NC1071致病力较弱,但对L8有较强致病力;6个菌株对N.nesophila无致病力,是否为2号生理小种还是其他致病型,尚待进一步研究确定。
- 李锡坤孔凡玉李锡宏王静张成省冯超陈雅琼刘璇苏振刚李佰乐
- 关键词：烟草黑胫病菌生理小种
- 烟草SSR荧光标记与毛细管电泳检测技术研究被引量：23
- 2011年
- 将毛细管电泳荧光检测技术应用于烟草SSR标记分析,以期借助自动化、智能化的仪器设备加速对烟草遗传分析的研究进程。采用毛细管电泳荧光检测技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对9份烟草材料进行SSR位点分析,用相同的材料和引物,对这两种方法的检测结果进行比较,建立并优化了毛细管电泳荧光检测法应用于烟草SSR标记分析的技术体系。结果表明,荧光检测法克服了银染法的不足,具有简便、可靠及高通量的优点。同时对微卫星荧光标记技术中低成本、高通量多重PCR体系建立的一些技术问题进行了探讨。
- 陈雅琼李凤霞李锡坤徐军张磊王绍美孙玉合
- 关键词：烟草微卫星SSR毛细管电泳
