杜立群 作品数:9 被引量:370 H指数:7 供职机构: 中国科学院植物研究所 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
PEFCSH的建立及在基因组特异序列克隆上的应用 基因组特异序列是跟踪外源染色质、鉴定易位系的特异探针.该文介绍一种带反馈控制的PCR增效减法杂交的(PEFCSH),证明可高效克隆基因组特异序列. 杜立群关键词:小麦 黑麦 文献传递 小麦生长点转化法初报 被引量:24 1996年 Apical points of young seedlings of wheat (Triticum aestivum) cultivar “Jing 411” and somatic calli of cultivar “FK8” were transformed with plasmids pBI121 and (or) pBIAH A + by using microprojectile bombardment. Histochemical assay of GUS activity showed positive reaction on some of the transformation processed apical points and calli. This demonstrated that foreign genes were introduced into the apical meristematic cells as well as the callus cells. The plantlets of cv. “Jing 411” survived after apical point transformation with pBIAH A + were transplanted into the field and the progenies were screened with kanamycin. 4% of the screened seeds germinated into green seedlings with kanamycin resistance. Dot hybridization of total DNA from kanamycin resistant plants showed the existence of foreign DNA in some of the detected plants. 杜立群 李银心 麻密 张志宏 朱至清 龚蓁蓁关键词:小麦 生长点 基因枪 转甜菜碱醛脱氢酶基因豆瓣菜的耐盐性 被引量:132 2000年 将山菠菜甜菜碱醛脱氢酶 (BADH)基因经根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)AGL1介导转入豆瓣菜 (NasturtiumofficinaleR .Br.) ,PCR和Southernblotting检测呈阳性的再生植株有 46株 ;对 6株再生植株的BADH活性和Northernblotting检测发现 ,有 5株BADH酶活性明显高于对照 ;膜的相对电导率测定结果说明 ,在盐胁迫下转基因豆瓣菜的膜结构所受损伤小于对照。转基因植株能够在 0 .5 %NaCl培养基上正常生长 ,而对照在相同的培养基上生根困难且生长缓慢。在 0 .8%NaCl的培养基上 ,部分转基因植株虽然生长减慢 ,但生长状况明显优于对照 ,且对照植株在相同培养基上培养 2 0d到 1个月左右后 ,叶片变黄并最终死亡。 李银心 常凤启 杜立群 郭北海 李洪杰 张劲松 陈受宜 朱至清关键词:转基因植株 耐盐性 豆瓣菜 小麦株高近等基因系的RAPD标记研究 被引量:9 2000年 采用RAPD技术 ,以 4个小麦株高基因近等基因系 (分别含有rht、Rht1、Rht2、Rht3)为材料 ,对 2 96个单一随机引物 (10个核苷酸 )进行了筛选。发现 2 5个引物的扩增产物在近等基因系间表现出特异性。在 6次重复试验中 ,有 18个引物的特异扩增片段不能重复 ,6个引物可以重复 2~ 3次 ,唯有OPAM 0 1在全部试验中均能稳定重复 ,其特异扩增片段OPAM 0 1186 0 可以作为 郭北海 张艳敏 李洪杰 王子宁 石云素 张忠廷 李松涛 王斌 杜立群 朱至清关键词:小麦 近等基因系 RAPD标记 小麦细胞分裂间期外源染色质的检测 被引量:2 1999年 以野生种基因组DNA为探针,用荧光原位杂交研究了间期细胞核里黑麦、中间偃麦草、燕麦和簇毛麦染色体在普通小麦背景下的行为。易位的黑麦1RS染色体臂在间期表现为不连续的线状杂交信号贯穿细胞核,代换和附加的1R染色体在间期却呈现点状杂交信号,通过易位进人小麦的中间偃麦草和燕麦染色体片段也是点状。普通小麦与硬粒小麦-簇毛麦双二倍体杂种F1幼胚愈伤组织细胞中,7个簇毛麦染色体在不同间期核里表现为由点状到线状接近连续的趋势,簇毛麦染色质与小麦染色质不相融合。对于附加、代换和易位等方式进入小麦里的少数染色体或染色体片段可以在问期中准确地计数,但是对于较多的外源染色体,由于有些杂交信号有可能被小麦染色质遮盖,所以仅仅分析间期细胞可能是不准确的。黑麦和簇毛麦随体染色体1R和1V不与核仁相连,它们在小麦背景下对核仁形成的作用可能被抑制了。 李洪杰 朱至清 杜立群 郭北海 石云素 唐顺学 李义文 贾旭关键词:小麦 属间杂种 GISH 小麦株高近等基因系的RAPD标记研究 被引量:15 2000年 采用 RAPD技术 ,以 4个小麦株高近等基因系 (分别含有 rht、Rht1、Rht2、Rht3基因 )为材料 ,筛选了 2 96个单一随机引物 ( 10个核苷酸 )。发现 2 5个引物的扩增产物在近等基因系间表现出特异性。在6次重复试验中 ,有 18个引物的特异扩增片段不能重复 ,6个引物可以重复 2~ 3次 ,唯有 OPAM0 1在全部试验中均能稳定重复 ,其特异扩增片段 OPAM0 11860 可以作为 rht基因的 RAPD标记。 郭北海 张艳敏 李洪杰 王子宁 张忠廷 李松涛 王斌 杜立群 李银心 朱至清关键词:小麦 基因标记 RAPD 利用组织培养和辐射诱变创造高频率小麦与簇毛麦染色体易位 被引量:30 2000年 利用荧光原位杂交证明普通小麦与硬粒小麦-簇毛麦双二倍体杂种培养细胞和再生植株中能够发生属间染色体易位,易位染色体不仅有臂间易位,还有小片段易位,表明通过杂种组织培养是创造属间易位的一个可行的方法。辐射处理能够大幅度促进杂种愈伤组织细胞中的染色体数目和结构变异,特别是易位频率达到7.4%。观察还表明,培养时间对杂种愈伤组织细胞中染色体数目和结构变异都有较大影响,培养细胞的染色体变异在培养的初期阶段就已出现。在一定时间里,随培养时间的延长,未发生变异的细胞频率逐渐下降,染色体数目减少的细胞逐渐增多。培养时间对染色体数目增加的细胞频率影响不大。对于染色体结构变异,培养时间延长主要是提高了端着丝点染色体的频率。在杂种培养细胞中还观察到一定频率的染色体加倍细胞(2n=84),但是培养一段时间后这类细胞就逐渐消失了。 李洪杰 郭北海 张艳敏 李义文 杜立群 李银心 贾旭 朱至清关键词:普通小麦 染色体易位 辐射诱变 离子注入烟草种子引起的M1代变异分析 被引量:26 1998年 利用随机引物扩增DNA(RAPD)技术及SDS-聚丙烯酰胺蛋白电泳技术,对30kevN+离子注入后的烟草M1代DNA及叶片水溶性蛋白进行分析,通过RAPD反应,检测到PCR条带的缺失和增加,而对照植株未发现条带明显变化,并且条带变异率随剂量的增加而上升。60次的剂量对烟草(红花大金元)诱变效果较好,有相对较高的成活率和变异率。还发现N+离子注入后,M1代叶片水溶性蛋白与对照相比有明显变异;M1代植株株高普遍高于对照,并出现少数表型变异。 张志宏 杜立群 李银心 李洪杰 郭北海 朱至清关键词:离子注入 RAPD 烟草 SDS-PAGE 甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因转化小麦及其表达 被引量:210 2000年 采用基因枪法将山菠菜甜菜碱醛脱氢酶 (BADH)基因导入小麦 (TriticumaestivumL .)品种 ,并且得以表达。该基因由玉米Ubi1启动子控制。在盐胁迫条件下 ,多数转基因植株叶片的BADH活性比受体亲本提高 1~ 3倍 ,部分植株相对电导率比亲本明显低 ,表明转基因植株的细胞膜在胁迫时有受损较轻倾向。PCR和Southern杂交分析证实外源BADH基因已插入小麦基因组 ,平均转化频率为 4.1%。 郭北海 张艳敏 李洪杰 杜立群 李银心 张劲松 陈受宜 朱至清关键词:BADH基因 转基因 基因枪 小麦