杨晓红
- 作品数：15 被引量：27H指数：3
- 供职机构：川北医学院基础医学院病原生物学与免疫学实验教学中心更多>>
- 发文基金：四川省自然科学基金四川省教育厅资助科研项目四川省教育厅科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- EPEC粘附相关蛋白融合表达载体的构建及表达被引量：1
- 2012年
- 目的构建与EPEC粘附相关蛋白IntiminC300、EspA、BfpA融合表达载体,并进行表达。方法用PCR方法从EPEC染色体中调取intiminC300、espA、bfpA基因,用基因重组的方法把3个基因片段用2个(Gly4Ser)3连接肽串联克隆到载体pQE30的多克隆区,转化宿主菌M15,用IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot检测表达的融合蛋白。结果酶切和测序表明成功构建了融合表达载体,SDS-PAGE检测表达蛋白的分子质量单位分别为36、43和76kd,与理论值相符,Western blot显示表达的融合蛋白均能被抗His标签抗体识别。结论本研究成功构建了EPEC粘附相关融合蛋白表达载体,并表达目的蛋白,为进一步研究融合蛋白的免疫原性奠定了基础。
- 杨健王朝莉彭丽娟杨晓红
- 关键词：EPEC粘附融合蛋白
- 吗啡依赖性大鼠模型的建立被引量：3
- 2001年
- 目的 :建立吗啡依赖性大鼠实验动物模型。方法 :以剂量递增法形成吗啡依赖模型 ,用纳洛酮催促戒断 ,戒断症状按柳田知司评分法给予评分。结果 :吗啡组戒断症状分值为 19.6 3± 3.4 6 :生理盐水对照组的戒断分值为 6 .2± 1.6 ,两组相比有显著性差异 (p <0 .0 1)。结论
- 杨晓红杨健吴功柱
- 关键词：吗啡戒断症状动物模型动物实验吗啡依赖性
- 重组P_(53)基因在HepG-2中的表达及作用被引量：2
- 1999年
- 为进一步探索正常Ｐ５３ 对肿瘤细胞增殖的抑制作用，本文用磷酸钙ＤＮＡ共沉淀法，将本室构建的ＰＸＴ１Ｐ５３ 真核表达细胞转移至ＨｅｐＧ２ 肝癌细胞系内，经斑点杂交技术和间接免疫荧光技术证实，外源性Ｐ５３ 基因已在ＨｅｐＧ２ 细胞中稳定表达，导入的Ｐ５３基因亦能抑制ＨｅｐＧ２ 肝癌细胞系增殖并诱导其凋亡。实验结果提示正常Ｐ５３ 基因可成为治疗不同肿瘤的重要靶分子之一。
- 任碧轩李仁冯莉唐恩洁杨晓红赵明才杨健张紫福张艳艳魏祥云
- 关键词：HEPG-2细胞肿瘤基因治疗
- 外源性P_(53)基因转染的人肝癌细胞化疗药物敏感性的研究被引量：5
- 2005年
- 目的 探讨外源性P53基因转染对人肝癌细胞系HepG 2化疗敏感性的影响。方法 将人野生型P53基因表达载体导入HepG 2细胞中,经筛选和鉴定后,采用MTT法观察其对甲氨蝶呤(MTX)和足叶乙甙(VP16 )作用后的HepG 2细胞生长抑制及凋亡的影响。结果 外源性P53基因在转染细胞中有效表达。增强了MTX和VP16对HepG 2细胞生长抑制并促进了药物诱导的细胞凋亡。结论 外源性P53基因能增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性。
- 杨晓红唐恩洁任碧轩
- 关键词：野生型P53基因人肝癌细胞系化疗敏感性
- 致病性大肠埃希菌EspA抗血清制备及其对细菌粘附的影响
- 2016年
- 目的制备致病性大肠埃希菌(EPEC)分泌蛋白A(EspA)抗血清,并检测其对EPEC粘附的中和作用。方法以EPEC标准株E2348/69为模板,采用PCR方法获得EspA基因,将目的基因连接载体pET32a,构建重组表达质粒pET32a-EspA,转入表达菌株BL21后用IPTG诱导表达并采用Ni-柱亲和层析法纯化EspA;以纯化EspA辅以佐剂免疫家兔,多次免疫获得抗血清,采用中和试验检测抗血清中和EPEC粘附Hep-2细胞的能力。结果成功构建EspA原核表达质粒,表达蛋白分子质量单位为37ku,与预期值相符。用纯化的表达蛋白EspA免疫家兔,对流免疫电泳检测抗血清的效价为1∶2,但稀释度≤1∶16时仍能效抑制EPEC粘附Hep-2细胞。结论 EspA抗血清具有抑制EPEC粘附Hep-2细胞作用,有望为疫苗研发的候选抗原。
- 郭永明黄荣王朝莉杨晓红杨健
- 关键词：致病性大肠埃希菌抗血清粘附
- 致病性大肠杆菌绿色荧光蛋白标记被引量：2
- 2015年
- 目的:用增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记致病性大肠杆菌(enteropathogenic escherichia coli,EPEC),以方便研究细菌的黏附。方法:以真核表达载体p EGFP-C1为模板设计引物,采用PCR方法扩增EGFP基因并测序后,克隆入原核表达质粒载体p Trc99a,转染EPEC,用荧光显微镜观察IPTG诱导后EPEC对Hep-2细胞的黏附及荧光表达情况。结果:成功构建原核表达质粒p Trc99a-EGFP和菌株EPEC/EGFP,黏附到Hep-2细胞表面的细菌克隆能够表达绿色荧光蛋白。结论:对EPEC进行了EGFP标记,为计数细菌的黏附提供方便。
- 郭永明陈晓丽余晶杨晓红杨健
- 关键词：致病性大肠杆菌绿色荧光蛋白
- 重组P53基因转染的肝癌细胞ICAM-1分子的表达被引量：1
- 2004年
- 杨晓红唐恩洁任碧轩
- 关键词：人肝癌细胞系细胞间黏附分子-1
- 干扰素及Fas抗体对肝癌细胞的细胞毒性研究
- 1999年
- 应用基因重组人干扰素γ和抗Ｆａｓ抗体体外处理人肝癌细胞系ＨｅＰＧ－２，采用ＭＴＴ法检测各处理组和对照组细胞的凋亡。结果表明：ＩＦＮ－γ诱导ＨｅＰＧ－２２４ｈ后，再加入Ｆａｓ抗体，发现对ＨｅＰＧ－２细胞的细胞毒作用显著高于ＩＦＮ－γ和Ｆａｓ抗体单独作用，提示ＩＦＮ－γ能促进抗Ｆａｓ抗体对肝癌细胞的细胞毒性，为ＩＦＮ－γ协同Ｆａｓ抗体治疗肿瘤提供了一定的实验依据。
- 杨晓红任碧轩
- 关键词：IFN-ΓHEPG-2MTT法肝癌
- 重组P_(53)真核表达载体的构建被引量：3
- 1998年
- 为进一步探索Ｐ５３基因与机体发育、肿瘤发生的关系及其与细胞周期中其它调控因子的相互作用，我们采用粘性末端连接法构建了重组野生型Ｐ５３－ＰＸＴ１真核表达载体，并成功地转化Ｃａｃｌ２处理的ＲＲ１细胞，经多种方法鉴定表明其连接率为６９％，转化率为３９×１０３／μｇＤＮＡ。该重组载体的构建无疑将为肿瘤。
- 李仁任碧轩杨晓红唐恩洁
- 关键词：P53基因真核表达载体
- 重组P_(53)基因转染的肝癌细胞克隆株的建立及其生物学活性观察
- 1999年
- 人Ｐ５３基因位于１７ 号染色体短臂上（１７ｐ１３．１） ，编码一个由３９３ 个氨基酸组成的核磷酸蛋白，有调控细胞的生长，维持基因组的稳定，其突变、缺失在恶性肿瘤发生发展中起着非常重要的作用。为进一步探讨野生型Ｐ５３ 基因的抗肿瘤特性，我室采用分子克隆方法构建了重组野生型Ｐ５３ 真核表达载体（ｐｘＴ１—Ｐ５３） ，用磷酸钙—ＤＮＡ 共沉淀法将其导入人肝癌ＨｅｐＧ２ 细胞内，通过标记基因ＮｅＯＲ 筛选带外源Ｐ５３ 基因的Ｇ４１８ 抗药性克隆，对Ｇ４１８ 抗药性克隆细胞的生长增殖和粘附能力进行观察。结果表明，导入野生型Ｐ５３基因能使肝癌ＨｅｐＧ２ 细胞的生长增殖速度较对照细胞明显减慢，细胞粘附能力下降。提示野生型Ｐ５３ 基因能抑制肝癌细胞的生长。本研究为肝癌的Ｐ５３ 实验性基因治疗提供了一定的依据。
- 杨晓红任碧轩唐恩洁李仁冯莉
- 关键词：野生型P53基因肝癌细胞系肝癌
