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杨莉: 作品数：35 被引量：150H指数：6; 供职机构：浙江师范大学化学与生命科学学院更多>>; 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省重大科技专项基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程理学更多>>

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密花胡颓子果实主要类胡萝卜素组分及含量分析被引量：15: 2014年; 【目的】胡颓子属植物牛奶子果实大量积累番茄红素,高达番茄的17倍,而该属中果实大、口感好的密花胡颓子果实中主要类胡萝卜素组分及含量尚不清楚。研究利用高效液相色谱法检测德甜密花胡颓子1号和2号2个品种的成熟果实中主要类胡萝卜素组分及含量。【方法】以甲醇∶氯仿=1∶2(v/v)提取果实中类胡萝卜素,高效液相色谱法(Agilent 1260)进行类胡萝卜素定性定量分析。色谱条件:YMC C30分析色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为A(100%甲醇)、B(含0.2%乙酸铵的80%甲醇)和C(甲基叔丁基醚),采用梯度洗脱,洗脱程序为0—6 min由95%A+5%B组成,7 min时梯度改变为80%A+5%B+15%C,12—32 min梯度改变为30%A+5%B+65%C,48—50 min梯度改变为95%A+5%B,维持该浓度至分析结束(60 min),流速为1 mL·min-1,柱温25℃,进样量20μL,检测波长450 nm。【结果】德甜密花胡颓子1号和2号2个品种的成熟果实均积累了大量的番茄红素和β-胡萝卜素,品种间的积累量存在差异。其中德甜密花胡颓子1号果实中β-胡萝卜素积累量达(231.84±16.00)μg·g-1DW,是目前已报道植物中β-胡萝卜素含量高的物种之一;德甜密花胡颓子2号品种果实中的番茄红素含量高达(1 054.10±29.19)μg·g-1DW,是番茄果实(150μg·g-1DW)的7倍。【结论】密花胡颓子果实中高积累番茄红素和β-胡萝卜素,是继牛奶子之后,在胡颓子属中发现的又一高积累特异类胡萝卜素的野生植物资源,为今后研究果实高积累番茄红素和β-胡萝卜素的分子机理提供了理想的研究材料。; 胡海涛金晓琴成龙平杨莉陈建华番汝昌杨玲; 关键词：番茄红素 Β-胡萝卜素高效液相色谱

南高丛蓝莓VcPCNA基因的分离及在果实发育进程中的表达分析: 2020年; 为探究VcPCNA基因在蓝莓果实发育过程中可能的调控机制,以南高丛蓝莓中果品种‘奥尼尔’与小果品种‘蓝雨’为实验材料,分离蓝莓VcPCNA基因全长cDNA,应用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测VcPCNA基因在花芽膨大与果实发育进程中的表达规律.结果表明:VcPCNA基因开放阅读框全长795 bp,包含保守的PIN00057功能域,以及可与其他蛋白互作的结合基序PIP-box,共编码264个氨基酸残基,相对分子质量为29.3 kDa;VcPCNA基因在‘蓝雨’花芽膨大期间中表达持续下降,而在‘奥尼尔’花芽中呈先上升后下降的趋势,且在开花前期VcPCNA表达量均处于较低水平;在果实发育进程中,‘奥尼尔’与‘蓝雨’VcPCNA基因表达模式相似,在开花期维持较低水平,在细胞快速分裂的S1期迅速升高至峰值后降低.结果表明,VcPCNA基因是动植物中保守的细胞增殖相关基因,其表达与蓝莓花芽、果实的发育进程密切相关,但其调控机制仍需深入研究.; 周雅蔡凯玲张逸慧刘薇黄丹颖周君兰陈曼曼范超洋李永强郭卫东郭卫东; 关键词：蓝莓果实发育

超表达牛奶子EutPDS提高番茄果实番茄红素含量被引量：4: 2017年; 【目的】牛奶子果实中富含番茄红素,八氢番茄红素脱氢酶(PDS)是番茄红素生物合成上游的重要酶。特异性超表达牛奶子Eut PDS基因(Gen Bank登录号:GQ254067),以期提高番茄果实中的番茄红素含量。【方法】通过RT-PCR方法从牛奶子果实中分离EutPDS基因cDNA及基因组全长,Southern杂交分析基因的拷贝数,专用软件分析此基因及蛋白结构。采用番茄2A11启动子构建果实特异性超表达载体,转化根瘤农杆菌GV3101后,借助农杆菌介导的叶盘法转化至‘中蔬四号’番茄。半定量RT-PCR检测转基因植株果实EutPDS基因的表达,高效液相色谱仪、实时定量PCR分别用于分析转基因番茄果实主要类胡萝卜素组分含量和内源类胡萝卜素代谢相关基因表达的变化。【结果】从牛奶子中克隆的EutPDS基因长度为1 920 bp,含有1 749 bp ORF。其基因组序列无内含子,单拷贝。EutPDS编码1个582个氨基酸的蛋白,该蛋白与其他植物PDS有很高的同源性,具有典型的二核苷酸结合域、类胡萝卜素结合域。采用农杆菌介导方法转化番茄叶盘,PCR检测,潮霉素筛选,成功获得了2个EutPDS转基因番茄株系,其果实颜色较对照更红。半定量分析显示外源EutPDS基因在转基因番茄果实中超表达,实时定量PCR分析表明番茄红素生物合成上游2个内源基因Sl PSY和Sl ZDS受影响显著上调,同时1个下游基因Sl LCY-e的表达则显著下调,使得转基因番茄果实中番茄红素含量为野生型的2倍,但β-胡萝卜素含量无显著变化。【结论】在番茄果实中特异性超表达牛奶子EutPDS基因可有效促进番茄果实中番茄红素的合成和积累。; 程珍霞胡海涛杨莉王长春郭卫东杨玲; 关键词：番茄番茄红素

基于企业家精神的企业成长机制研究——以豪森企业为例: 企业为什么会成长?企业又是怎样成长的?这些问题当前国内外专家学者的研究不论是从企业成长要素角度研究还是从企业成长阶段角度研究都已经达到了一定的理论高度。而企业家是企业的决策者和领导者，其行为和精神直接影响着企业的成长。但...; 杨莉; 关键词：企业家精神民营企业; 文献传递

一种抑制蓝莓冬季早花发生的方法: 本发明属于农业生产技术领域，尤其涉及一种抑制蓝莓冬季早花发生的方法，包括以下步骤：取正常管理中的蓝莓树为试材；根据种植区内的蓝莓树数量，调配调节剂的用量，并确保早花抑制因子的浓度为1g/L；将调配好的调节剂溶液注入至喷雾...; 李永强宗宇郭卫东陈文荣杨莉廖芳蕾

越橘VcLon2蛋白酶在转化烟草衰老中的作用: 2018年; 植物衰老往往伴随着过氧化物酶体功能紊乱,Lon2蛋白酶对过氧化物酶体的功能和结构的维持具有重要作用,但目前未见其与衰老相关性的报道。从越橘(Vaccinium ssp.)中克隆了Lon2全长c DNA序列,命名为Vc Lon2(KX611379),并通过烟草中NbLon2基因沉默(Virus Induced Gene Silence,VIGS)技术处理和转VcLon2基因对该基因功能进行研究。结果表明,NbLon2沉默本氏烟植株矮小,叶片小且黄化严重,而VcLon2超表达本氏烟植株鲜绿且粗壮;NbLon2沉默植株叶绿素含量仅为对照的一半,H2O2含量及膜脂过氧化程度也显著高于对照,VcLon2超表达植株则相反。同时,抗氧化酶CAT基因的转录水平在本氏烟各株系中无显著差异,但NbLon2沉默植株内CAT酶活性仅为对照的62.62%,表明Lon2蛋白酶对过氧化物酶体内蛋白质结构和功能的维持发挥着重要作用。此外,NbLon2沉默植株蛋白羰基化程度显著高于对照,植物衰老标记基因SAG12表达量为对照的15 642.2倍。以上研究均表明,Lon2蛋白酶缺失显著加剧光合色素降解、破坏细胞膜系统、羰基化蛋白大量积累等;VcLon2蛋白酶对植物健康维系及衰老延缓等具有重要作用。; 陈文荣陈侨月尤式备余颖李永强杨莉郭卫东; 关键词：越橘植物衰老

LED补光组合对大棚越橘生长发育的影响被引量：28: 2020年; 以2年生南高丛越橘‘Emerald’为材料,以大棚内自然光作为对照,研究LED光源的红蓝光(3︰1和6︰1)、紫外光(UVA)对植株长势、叶片光合作用、碳氮代谢、开花基因表达及开花率、果实品质的影响。结果表明:红蓝光组合处理下‘Emerald’的植株营养生长较旺盛,株高、1年生枝条长度和粗度显著高于对照。此外,红蓝光(6︰1)处理下叶片的叶绿素相对含量、比叶重和净光合速率均显著提高。红蓝光组合也可诱导植株开花,开花基因FT表达量和开花率明显高于对照。紫外光下叶片的氮含量、开花率及FT基因表达量显著高于对照。不同光质组合补光对‘Emerald’的果实品质有显著影响,红蓝光(3︰1)处理下果实的质量、横纵径、可溶性固形物、可溶性糖、花青素含量和糖酸比均高于对照。总之,不同光质补光会促进越橘‘Emerald’的生长发育,红蓝光6︰1组合对促进营养生长作用相对较大,红蓝光3︰1组合对提高果实品质效果较好。紫外光虽能改变植株形态和促进开花,但果实品质提高效果较红蓝光处理稍弱。; 王佳淇何莹钰韦晓桐李永强杨莉陈文荣廖芳蕾郭卫东; 关键词：越橘生长势光合作用开花率果实品质

蓝莓转录因子VcICE全基因组鉴定及其在花果发育进程的表达分析: 2025年; 为探究ICE(inducer of CBF expression)转录因子在高丛蓝莓花果发育进程中可能的调控机制,通过对VcICE基因家族进行全基因组鉴定及生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析VcICE基因亚家族成员在蓝莓花芽膨大和果实发育进程中的相对表达水平.结果表明:在高丛蓝莓‘Draper’基因组中鉴定出8个VcICE成员,系统进化分析将其划分为2个亚家族,各亚家族成员均包含S-rich,bHLH和ACT等保守结构域;VcICE基因启动子区域富含光响应、植物激素、生长发育及非生物胁迫相关顺式作用元件;VcICE亚家族基因在高丛蓝莓‘O’Neal’和‘Bluerain’花芽膨大与果实发育进程中的相对表达差异显著.研究结果以期为深入了解VcICE转录因子在蓝莓花果发育进程中的功能提供理论参考.; 郑佳兴王艳王伟坤李赛亚傅雯倩杨莉郭卫东; 关键词：蓝莓 ICE

牛奶子实时定量PCR分析中内参基因的评价与验证(英文)被引量：6: 2015年; 【目的】实时定量PCR结果的精确性在很大程度上取决于选择的内参基因的稳定性。通过评估候选管家基因的表达稳定性,筛选出用于牛奶子研究的最佳内参基因。【方法】设计简并引物从牛奶子中克隆12个潜在的内参基因片段,包括14-3-3、18S核糖体RNA(18SrRNA)、β-actin(Actin)、延长因子1-α(EF1-α)、真核起始因子4A(e IF4A)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、RNA聚合酶-Ⅱ(RPⅡ)、60S核糖体蛋白(RPL7)、翻译延长因子2(TEF2)、泛素连接酶E2(UBCE)、泛素(UBQ)和泛素延伸蛋白5(UBQ5)。采集牛奶子5个不同器官(根、茎、叶、花和红果)、4个成熟期的果实(绿果、黄果、深粉果和完全成熟的红果)、2种激素(脱落酸、赤霉素)处理4个时间点的绿果、热处理4个时间点的离体叶片、幼苗盐胁迫2个时间点的根茎叶,应用实时荧光定量PCR技术检测12个内参基因在各样品中的表达情况,采用基于CT值的ge Norm、Normfinder和Best Keeper及CT比较4种算法评价这些内参基因的稳定性,最终的排名则由Ref Finder算法产生。【结果】器官组稳定性好的前2位内参基因为UBCE和RPL7,果实成熟期组排名前2的为e IF4A和UBCE,激素处理组排名前2的为e IF4A和UBCE,非生物胁迫组排名前2的则为Actin和EF1-α,综合分析所有样品排名前3位的是e IF4A、RPL7和UBCE。分别用筛选出的稳定的e IF4A、RPL7、UBCE和不稳定的RPⅡ作为内参基因评价目的基因八氢番茄红素合成酶基因Eut Psy在果实成熟过程中的表达,结果显示分别以3个稳定的内参基因为单内参基因与以e IF4A同UBCE组合做内参基因所得到的结论一致,而RPⅡ给出的则不同。【结论】在应用荧光实时定量PCR技术研究牛奶子基因转录表达时,通常情况下e IF4A、RPL7和UBCE相对于其他9个候选内参基因更为可靠。研究结果为牛奶子及胡颓子属其他物种的基因表达分析奠定基础。; 成龙平胡海涛郭卫东杨莉王长春杨玲; 关键词：基因表达实时定量PCR 内参基因

一种改进的研究蛋白互作的双分子荧光互补载体: 本发明提供一种用于研究蛋白互作的双分子荧光互补载体，该载体包括CaMV 35S启动子和CaMV 35S终止，在CaMV 35S启动子和CaMV 35S终止子之间包括cEYFP盒或nEYFP盒。构建此载体成本低，构建效率高...; 王长春冯采芬杨莉宋凯赵奕铭王伟杨玲俞盼盼李茶姿王锋青

杨莉

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