林肖
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
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- 治疗关节软骨缺损的磁标记细胞靶向移植可控磁聚焦仪
- 一种治疗关节软骨缺损的磁标记细胞靶向移植可控磁聚焦仪，包括环形磁线圈支座、均布于环形磁线圈支座上的磁线圈和用于控制磁线圈电流的控制器，各磁线圈分别与控制器通过导线电连接。
- 陈加荣杨柳冯勇王凤玲张一闫飞林肖
- 文献传递
- PEI/SPIO对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨应用新型聚乙烯酰胺(PEI)包覆的超顺磁性氧化铁(SPIO)标记骨髓间充质干细胞(bMSCs)对其生物学特性的影响。方法分离、培养贵州小香猪bMSCs,选取第3代bMSCs,用含铁浓度为4、6、8、10、12μg/ml的DMEM/F12培养液孵育24h,未标记组为对照。通过普鲁士蓝染色、透射电镜检查、胎盼蓝染色、MTT检测及成骨、成软骨、成脂诱导分化实验,探讨不同PEI/SPIO浓度对bMSCs标记效率、细胞活性、增殖及分化的影响。结果铁浓度为8μg/ml以上的SPIO标记bMSCs后,普鲁士蓝染色标记效率均接近100%。与对照组相比,Fe浓度为4、6、8μg/ml的PEI/SPIO标记的bMSCs活细胞比率均在95%以上,差异无统计学意义(P>0.05);而Fe浓度为10μg/ml时,活细胞比率约为(80.24±1.34)%,Fe浓度为12μg/ml时,活细胞比率约为(75.44±2.33)%,两者对细胞的活性有明显的抑制作用(P<0.05)。4、6、8g/ml的PEI/SPIO标记的bMSCs成骨、成软骨及成脂分化与正常对照组相比无明显差异,而10、12ug/ml组在诱导培养过程中大部分细胞死亡。结论含铁浓度8μg/ml是PEI/SPIO标记干细胞的适宜浓度,既能高效地标记bMSCs,又不影响bMSCs的细胞活性及增殖分化能力等生物学特性。
- 陈加荣杨柳戴刚林肖王凤玲
- 关键词：间质干细胞聚乙烯亚胺超顺磁性氧化铁生物学特性
- 治疗关节软骨缺损的磁标记细胞靶向移植可控磁聚焦仪
- 本发明公开了一种治疗关节软骨缺损的磁标记细胞靶向移植可控磁聚焦仪，包括：环形磁线圈支座；均布于环形磁线圈支座上的磁线圈，所述磁线圈以可转动方式设置在磁线圈支座上；用于控制磁线圈电流的控制器，所述控制器通过导线电连接各磁线...
- 陈加荣杨柳冯勇王凤玲张一闫飞林肖
- 文献传递
- 兔膝关节内纳米超顺磁性氧化铁颗粒标记细胞磁靶向模型建立
- 2013年
- 目的建立活体兔膝关节腔内磁靶向细胞移植模型,探讨纳米超顺磁性氧化铁颗粒(superparamagnetic ironoxide,SPIO)标记的种子细胞磁靶向移植修复关节软骨缺损的可行性。方法将8只家兔按随机数字表法分成2组,在其左膝股骨滑车中央制造直径5 mm、深6 mm的圆柱形骨软骨缺损,实验组(n=4)缺损内置入钕铁硼强力磁体,对照组(n=4)置入骨水泥;将体外培养扩增的同种异体兔膝关节软骨细胞经BrdU及SPIO双重标记后注入上述活体兔膝关节腔内,1周后取缺损区组织分别行HE、普鲁士蓝染色及BrdU显色。结果实验动物均存活。HE染色示实验组缺损区内大量细胞聚集生长,SPIO及BrdU双重标记结果显示其来源为外源性注入,形态类似软骨细胞;对照组见缺损区纤维组织增生明显,间以大量炎性细胞,SPIO及BrdU双重标记示外源性注入的细胞散在分布,少量集中于缺损区。实验组与对照组相比,高倍镜下缺损区阳性细胞数有显著性差异(t=6.343,P=0.001)。结论该模型可较好完成SPIO标记的关节软骨细胞活体兔膝关节腔内的磁靶向移植研究,并证实磁靶向技术可以显著提高移植细胞向目标区域聚集生长的效率,且能保留较高的细胞活性。
- 王凤玲林肖陈加荣尹力王富友杨柳
- 关键词：磁靶向SPIO关节软骨缺损
- 治疗关节软骨缺损的方法及其用于该方法中的磁聚焦仪
- 本发明公开了一种治疗关节软骨缺损的方法以及专用于该方法中的磁标记细胞靶向移植可控磁聚焦仪，利用SPIO标记的干细胞具有磁性的特性，使不同方向的磁力与SPIO的作用，控制干细胞的传递路线，使其准确地移植到软骨细胞缺损位置，...
- 陈加荣杨柳冯勇王凤玲张一闫飞林肖
- SPIO、GFP双重标记猪骨髓间充质干细胞的研究被引量：5
- 2011年
- 目的研究超顺磁性氧化铁(superparamagnetic iron oxide,SPIO)、绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)双重标记猪骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的可行性。方法用慢病毒载体介导的GFP基因感染第3代猪BMSCs,并用SPIO标记。用荧光显微镜观察双标记BMSCs,流式分析GFP转染效率,普鲁士蓝染色、透射电镜鉴定SPIO标记效率。MTT法检测标记BMSCs的细胞增殖活力。结果双标记BMSCs在荧光显微镜下发出绿色荧光,GFP在基因转染1 d后开始表达,3 d明显增加,5 d达顶峰,以后稳定表达。普鲁士蓝染色显示SPIO标记的BMSCs内有大量蓝染铁颗粒,细胞标记率达95%以上,透射电镜下细胞质内及部分次级溶酶体内可见高电子密度含铁囊泡和细小颗粒。MTT法检测发现GFP和SPIO双标记、单纯GFP标记、SPIO标记BMSCs的增殖活力与未标记BMSCs相比无改变(P>0.05)。结论携带绿色荧光蛋白基因的慢病毒和SPIO可以有效地标记猪的BMSCs。双标记BMSCs的活性、增殖能力与未标记BMSCs相比无改变。
- 陈加荣杨柳戴刚郭林林肖王凤玲蔡长傧
- 关键词：超顺磁性氧化铁慢病毒绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞
- PEI-SPIO标记对关节软骨细胞生物学特性的影响
- 2013年
- 目的研究聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)包被的超顺磁性氧化铁粒子(superparamagnetic iron oxid,SPIO)对透明软骨细胞增殖和分泌Ⅱ型胶原蛋白功能的影响,探讨其标记软骨细胞的适宜标记浓度和适宜孵育时间。方法取1～3月龄巴马小香猪后膝关节透明软骨体外培养的第2代细胞,以2、4、6、8、10、12、14μg/mL浓度的PEI-SPIO标记液标记的软骨细胞为实验组,没有PEI-SPIO标记的软骨细胞作为对照组,分别在37℃培养箱中培育6、12、18、24、30 h,通过普鲁士蓝染色、透射电镜、细胞内铁含量、WST-1和半定量RT-PCR法检测,筛选出PEI-SPIO的最佳标记浓度和最佳孵育时间。结果 6、8、10、12、14μg/mL组标记后的普鲁士蓝染色显示90%以上的细胞被铁粒子标记;细胞内铁含量的测定结果显示标记时间超过24 h,各组细胞内铁含量基本不再增加;WST-1检测磁标记的细胞毒性结果显示,对照组与实验组无统计学差异(P>0.05)。8μg/mL标记的软骨细胞,其Ⅱ型胶原蛋白RT-PCR条带的灰度值比值与未标记软骨细胞比较有明显降低[(13.04±0.60)%vs(18.89±1.26)%,P<0.05];6μg/mL标记的软骨细胞,其条带的灰度值比值与未标记软骨细胞比较无明显差异[(27.32±1.02)%vs(28.56±1.15)%,P>0.05]。结论 PEI-SPIO可达到安全有效标记软骨细胞的要求,PEI-SPIO标记液为6μg/mL,标记24 h是PEI-SPIO标记软骨细胞的适宜标记浓度和标记时间,既可达到标记软骨细胞的目的,又不对软骨细胞的活性、增殖和Ⅱ型胶原蛋白基因的表达造成影响。
- 林肖王凤玲陈加荣林兴德杨柳
- 关键词：SPIO磁标记
