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镉对HepG2细胞DNA损伤作用以及对gadd基因表达的影响被引量：2: 2011年; 目的探讨氯化镉对HepG2细胞DNA损伤作用以及对gadd153和gadd45β启动子和mRNA表达的影响。方法应用彗星试验检测氯化镉对HepG2细胞的DNA损伤作用；分别构建含有gadd153和gadd45β启动子和荧光素酶报告基因的载体pGADD153-Luc和pG45-Luc，荧光素酶活性检测反映gadd153和gadd45β启动子的活性，生物发光检测荧光素酶活性；反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测gadd153和gadd45β基因mRNA的表达。结果彗星试验结果显示，在100、300μmol/L氯化镉处理细胞24h后，Olive尾矩（分别为0．78±0．06、1．10±0．12）明显高于对照组（0．53±0．08），差异有统计学意义（P〈0．05），并有良好的剂量-效应关系（r=0．9761，P〈0．05）；报告基因分析显示，1、5、10μmol/L氯化镉处理组gadd153启动子表达1分别为（9．45±1．26）、（11．76±1．12）、（21．14±1．47）RIU／μgPro]均明显高于对照组[（7．02±0．82）RIU／μgPro]差异均有统计学意义（P〈0．05），并有良好的剂量-效应关系（r=0．8755，P〈0．05）；5、10μmol／L氯化镉处理组gadd45β启动子表达明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），并有良好的剂量一效应关系（r=0．8856，P〈0．05）；RT—PCR结果显示，1、5、10μmol／L氯化镉处理组gadd153mRNA表达均明显高于对照组，5、10μmol/L氯化镉处理组gadd45βmRNA表达明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论氯化镉可诱导HepG2细胞DNA损伤，较低剂量氯化镉即使未引起明显的DNA损伤，亦可促进HepG2细胞gadd153和gadd45β启动子和mRNA的表达。; 张荣牛玉杰张振杰陈庆郭会彩赵娟李尧樊龙刚; 关键词：镉 DNA损伤基因

基于双荧光素酶报告基因检测环境致癌物DNA损伤修复作用: 目的:随着工农业的发展，越来越多的化合物投入生产。如此众多的化学物质中，致癌化学物质占有相当的比例。近年来，我国肿瘤发病率升高明显，显然与环境致癌物的污染有关。在基因组的遗传稳定中，DNA损伤与修复具有十分重要的地位，因...; 樊龙刚; 关键词：DNA损伤遗传毒性

基于双荧光素酶报告基因的DNA损伤与修复检测系统的建立与应用: 2013年; 目的:建立一种能够同时对环境致癌物所致HepG2细胞DNA损伤和细胞对损伤DNA的修复能力进行快速检测的系统。方法:5μmol/L氯化镉体外损伤质粒pTK-RL,质粒pgadd153-luc和体外受损的质粒pTK-RL共转染到HepG2细胞中,以16种已知致癌物或3种无遗传毒性的非致癌物刺激细胞,利用双荧光素酶检测方法同时检测DNA损伤和细胞的修复能力;双荧光素酶检测系统检测居民区、垃圾焚烧厂和农田3个不同污染区土壤中非挥发性有机提取物对DNA的损伤作用和细胞对该损伤的修复能力;彗星实验检测DNA的损伤。结果:双荧光素酶报告基因检测系统均可检出已知环境致癌物对DNA损伤与修复能力的影响,非致癌物均未检测到DNA损伤作用和对细胞DNA修复能力的影响;3个不同污染区土壤中非挥发性有机提取物均可诱导DNA损伤并抑制细胞对DNA损伤的修复能力,强度为居民区>垃圾焚烧厂>农田土壤。结论:在本研究条件下建立了可同时检测环境致癌物DNA损伤与细胞修复能力的双荧光素酶报告基因检测系统并可用于环境污染区检测。; 张荣牛玉杰樊龙刚石磊王茜王秀荣; 关键词：DNA损伤 DNA修复致癌物质

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樊龙刚

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