欧璇
- 作品数:4 被引量:4H指数:1
- 供职机构:武汉大学基础医学院更多>>
- 发文基金:深圳市科技局资助项目国家自然科学基金广东省中医药管理局基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 耐拉米夫定乙型肝炎病毒变异株全基因组克隆及鉴定被引量:1
- 2006年
- 目的:扩增并克隆耐拉米夫定乙型肝炎病毒(HBV)变异株全基因组DNA,为构建含双体HBV YMDDDNA质粒和HBV YMDD变异株细胞模型及研究药物筛选奠定基础。方法:从一名耐拉米夫定的慢性乙型肝炎病人血清中提取HBV病毒DNA,用错配PCR结合限制性片段长度多态性(RFLP)进行变异分析,然后采用PCR方法在HBV负链开环缺口处及基因组中单一酶切点(SpeⅠ)处,设计两对引物从两个方向分别扩增1.15 kb和2.05 kb的单链及双链DNA区,利用基因重组技术,将两片连接后克隆至质粒pcDNA3.1-中,再进行DNA序列测定。结果:错配PCR结合RFLP分析证实该病毒存在YVDD变异,通过两段法克隆出HBV全基因组,经序列分析所得为HBV YMDD变异株全基因组。结论:成功克隆出HBV YMDD变异株全基因组。
- 邓欣李辉欧璇刘钦蒋小玲伍欣星
- 关键词:YMDD拉米夫定多聚酶基因乙型肝炎病毒
- 宫颈癌细胞中HMAT1基因的功能预测及其干扰小RNA的筛选被引量:1
- 2005年
- 目的 预测宫颈癌细胞中人类与鼠同源乳腺转化基因(HMATI)的功能及筛选出能有效沉默该基因的干扰小RNA。方法 采用细胞原癌基因、抑癌基因分类芯片对原发性宫颈癌标本进行筛选,通过生物信息学分析HMAT1 基因,针对HMAT1基因设计了三条特异性干扰小RNA,分别与pRNAU6.1 Hygro重组后,与含有该基因的重组体瞬时共转染B16F0细胞,用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)技术检测对HMAT1基因的干扰效果。结果 细胞原癌基因、抑癌基因分类芯片筛选出表达量明显上调的基因共四条。对其中上调明显的HMAT1基因,通过生物信息学预测其为一个调节细胞生长的看家基因,其编码的蛋白质为一个Ⅰ型跨膜蛋白,且其酪氨酸蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点可能与HMAT1 蛋白功能活化有关。半定量检测结果表明其中第一条特异性干扰小RNA有显著性抑制效果(P<0.05)。结论 初步预测HMAT1 基因很可能是与宫颈癌相关的癌基因,其编码的蛋白质可能参与细胞的信号转导,设计出针对该基因的干扰小RNA可以有效沉默HMAT1基因。
- 欧璇赵旻左泽华李辉魏芸伍欣星
- 关键词:宫颈肿瘤RNA干扰
- 癌相关基因HMAT1的功能预测及其小干扰RNA的筛选
- 宫颈癌是危害广大妇女健康的主要恶性肿瘤之一,占癌症造成妇女死亡的第二位。中国在世界上宫颈癌发病率国家中居第二位,其中湖北、陕西和江西三省为中国宫颈癌的高发区。
本文首先采用生物信息学的方法对HMAT1基因在核酸及氨...
- 欧璇
- 关键词:宫颈癌癌基因生物信息学RNA干扰
- 文献传递
- 新型转染试剂Superfect^(TM)转染效率的初步研究被引量:2
- 2004年
- Superfect TM是一种新型的纳米转染载体 ,该实验以小鼠黑色素瘤细胞为靶细胞 ,以 p EGFP-C1为导入基因 ,探讨了其转染效率和细胞毒性。结果显示 ,当质粒剂量为 0 .5 ug,载体与质粒用量比为 5 :1,两者形成的复合物与细胞孵育 3 h时 ,Superfect TM具有较高的转染效率 ,且细胞毒性较低。高效低毒的 Superfect
- 王璐魏芸欧璇王同祥邵荣江
- 关键词:转染效率细胞毒性基因治疗