毛秉智
- 作品数：172 被引量：511H指数：12
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程文化科学更多>>
- Mpl相互作用蛋白RACK1的筛选与鉴定被引量：4
- 2005年
- 目的:筛选新的血小板生成素(TPO)受体胞内区相互作用蛋白并确定相互作用。方法:以TPO受体胞内区为诱饵蛋白,进行酵母双杂交文库的筛选,RT-PCR扩增筛选到的基因并克隆到相应载体上,Western印迹方法检测其在不同组织与细胞内的表达;进行哺乳动物细胞内双杂交、免疫共沉淀、激光共聚焦实验确证相互作用。结果:从酵母双杂交文库筛选到RACK1基因,检测到其在不同组织与细胞内表达都很丰富,哺乳动物细胞内双杂交、免疫共沉淀证明RACK1同TPO受体Mpl的胞内区存在相互作用,而细胞内共定位实验证明两者在哺乳动物细胞内存在共定位现象,即两蛋白的相互作用可能具有生理意义。结论:筛选到的RACK1蛋白同TPO受体Mpl的胞内区存在相互作用。
- 刘红岩从玉文陈波善亚君杨振赵振虎毛秉智
- 关键词：MPLRACK1双杂交系统技术相互作用血小板生成素
- 核与辐射恐怖袭击损伤伤员的三级医学救治
- ＜正＞ 核与辐射损伤伤员的医学救治是整个反核恐怖医学应急救援工作的重要组成部分,其主要任务是对受照射人员进行及时、正确地医学处理,最大限度地减少人员伤亡和远期危害,有效地保护公众的身体安全与心理健康。发生核与辐射恐怖袭击...
- 陈肖华毛秉智董波饶亚兰张军权王志东高荣莲
- 文献传递
- 肝细胞靶向pH敏脂质体介导的硫代反义寡核苷酸对HCV5′NCR基因表达的抑制作用被引量：3
- 2001年
- 反义寡核苷酸是一种阴离子大分子物质 ,细胞生物利用度较低且易被细胞溶酶体酶降解 ,为了增强反义药物在病变靶细胞内的有效浓度 ,根据受体介导的内吞作用原理 ,针对肝细胞专一性表达的去唾液酸糖蛋白受体 ,设计及制备了一种肝靶向性脂质体 ,这种脂质体同时具有pH敏性。采用竟争抑制实验及鸡红细胞溶血实验分析了其肝细胞靶向性及pH敏性 ;应用肝靶向pH敏脂质体作为药物运载工具 ,介导反义寡核苷酸HCV3 63作用于转基因细胞HepG2 .970 6细胞 ,通过荧光素酶活性检测 ,观察了硫代反义寡核苷酸对HCV 5′NCR调控功能的抑制活性。结果显示 ,不同浓度半乳糖溶液对 5 % 18 gal脂质体有一定的抑制作用 ,浓度超过 2 0mmol L时 ,达到饱和 ,最大抑制率为 3 8% ;溶血实验显示脂质体与红细胞膜融合作用有显著的pH值依赖性 ,pH <6时 ,血红素释放量明显增加 ;肝靶向pH敏性脂质体介导的HCV3 63对HepG2 .970 6细胞中HCV 5′NCR调控基因具有显著的剂量依赖性抑制作用 ,浓度为 1 0 μmol L时 ,抑制率达 86%。综上 ,所制备的脂质体具有一定的肝细胞靶向性及显著的pH敏感性 ,这种脂质体能够增强HCV特异性硫代反义寡核苷酸的细胞内抑制活性 ,这为针对肝炎病毒的反义寡核苷酸的体内活性评价提供了有用的转运体系。
- 王小红王升启文思远管伟毛秉智
- 关键词：丙型肝炎病毒反义寡核苷酸肝靶向性脂质体基因表达
- 急性放射病防治研究进展被引量：1
- 1998年
- 急性放射病的防治是核事故应急医学处理十分重要的环节，是放射医学与防护研究的重点内容，受到各国学者的高度重视。近些年来，由于生命科学研究的突飞猛进，带动了基础医学、分子生物学和临床诊治技术的不断发展，急性放射病的实验治疗和临床救治研究也取得了明显的进展...
- 毛秉智
- 关键词：急性放射病造血因子
- 我国放射医学与防护学研究新进展
- ＜正＞ 进入二十一世纪以来,随着科学技术进步和核辐射技术的广泛应用,我国放射医学与防护研究取得了明显的进展,在某些方面达到了国际水平并具有我国自己的特色。本文仅就主要进展作一概述。一、放射医学基础研究近年来,放射医学与防...
- 毛秉智
- 文献传递
- EMSA法分析STAT5信号分子与周期蛋白cyclin B1的相互作用被引量：3
- 2001年
- 利用蛋白凝胶电脉迁移率变动分析法 (EMSA)分析STAT5信号分子与周期蛋白cyclinB1的相互作用。探针位于cyclinB1启动子区的 - 783到 - 75 4之间 ,该区域包含SATAT5与cyclinB1的结合序列TTN5AA。STAT5与cyclinB1共形成a、b和c三条蛋白滞后带 ,当用点突变的探针作用时 ,仅剩下滞后带a和滞后带c 。
- 郭德煌邱丽玲柳晓兰罗庆良董波毛秉智
- 关键词：STAT5信号分子
- 一种新的GFP/DNA双标记流式细胞技术被引量：3
- 2004年
- 目的 :为了检测细胞转染了带绿色荧光蛋白 (GFP)标记的融合基因后细胞周期的改变 ,以研究目的基因与细胞周期的关系 ,建立GFP/DNA双标记流式细胞技术。方法 :①以小鼠脾细胞为模型 ,以不同浓度的多聚甲醛(PFA)预固定细胞不同时间 ,再换用 70 %乙醇固定细胞 2 4h以上 ,观察不同固定方法对细胞周期检测的影响 ;②以Ad EGFP感染的Hep 2细胞为模型 ,观察不同固定方法对细胞周期、GFP阳性细胞检出率和GFP的荧光强度的影响 ;③用最佳固定方法观察转染p2 1/WAF1/CIP1 EGFP融合基因的 2 93细胞的细胞周期 ,以验证方法的可靠性。结果 :0 .5 %PFA预固定 6 0min ,再换用 70 %乙醇固定细胞 ,不影响细胞周期检测 ,而且GFP荧光强度和转染效率的检测最佳。以此方法固定细胞 ,GFP/DNA双标记流式细胞技术检测了转染 p2 1/WAF1/CIP1 EGFP融合基因的2 93细胞的细胞周期 ,可观察到p2 1表达阳性的细胞发生了G0 /G1期阻滞。结论 :优化的细胞固定方法可以有效地阻止GFP从细胞内流出 ,建立的GFP/NDA双标记流式细胞技术可以用于研究带GFP标签的基因表达蛋白与细胞周期的关系。
- 董波饶亚岚鲁茁壮王澜从玉文陈肖华张军权高荣莲王治东毛秉智
- 关键词：细胞周期流式细胞术绿色荧光蛋白基因表达转染
- 基因药物研究现状和对策被引量：12
- 2004年
- 生物技术药物以人类体细胞的基因组、转录本组和蛋白质组三个层次生物大分子为目标 ,基因药物的研究主要针对致病基因的DNA和基因转录本mRNA两类生物大分子 .mRNA从结构上考虑是研发核酸药物的最理想靶标和策略之一 .反义寡核苷酸、特异水解基因mRNA的核酸酶(ribozyme和DNAzyme)以及具有干扰作用的双链RNA(siRNA)是药物设计的策略之二 .mRNA结构靶点研究是研发反mRNA基因药物的基础 ,mRNA分子具有高度折叠的二级及三级结构 ,阐明其可及性位点 ,筛选其结构靶位点序列是关键 .近年研究报道的靶点筛选有约 7种mRNA的实测新技术 ,以及计算机辅助软件预测分析 .但发展分子生物学实验新技术以分析、确认靶点是药物研发策略之三 .
- 毛建平毛秉智
- 关键词：基因药物生物技术药物可及性致病基因生物大分子
- rhIL-3和GM-CSF对γ线照射猴外周血淋巴细胞损伤的防护作用研究被引量：9
- 2004年
- 目的 观察重组人白细胞介素 3(rh IL 3)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)单用与伍用对 3.0 Gyγ线照射猴外周血淋巴细胞损伤的防护作用 ,为造血生长因子用于急性放射病的治疗提供依据。方法 30只恒河猴随机分为 rh IL 3(2 0和 6 0 μg· kg- 1· d- 1 )、GM CSF(10 μg· kg- 1· d- 1 )、IL 3+GM CSF、照射对照及正常对照共 6个组。γ线全身照射 3.0 Gy连续给药 2 1d后 ,用碱磷酶免疫组织化学法检测 T细胞亚群、Bax和 Bcl 2蛋白 ,用原位末端标记方法检测淋巴细胞凋亡率。结果 1照射后外周血淋巴细胞数、T细胞及其亚群均显著低于正常组 ,照射对照组 T、TH 和 Ts淋巴细胞分别下降至正常对照组的4 2 %、4 1%和 5 7%。2单独给予 GM CSF和 GM CSF+IL 3后 ,外周血淋巴细胞数量及 T、TH 细胞的降低均受到明显抑制 ,两组的淋巴细胞数均相当于照射对照组的 1.4 8倍 ,GM CSF组 T、TH 细胞分别为对照组的 1.5 7和 1.76倍 ,GM CSF+IL 3组 T、TH 淋巴细胞分别为对照组的 1.4 8和 1.72倍。 3照射后淋巴细胞出现大量凋亡 ;用 GM CSF和 GM CSF+IL 3后能明显抑制照射引起的淋巴细胞凋亡 ,两组淋巴细胞凋亡率分别降低到照射对照组的 4 1%和 4 8%。结论 一定剂量的 GM CSF或 GM CSF+IL 3能明显抑制照射引起的?
- 崔玉芳杨红罗庆良董波柳晓兰徐菡毛秉智王德文
- 关键词：BAX蛋白BCL-2蛋白T细胞亚群
- 一种改进的用于测定细胞周期的细胞制备方法被引量：37
- 2002年
- 目的 :减少细胞的聚集数量 ,提高测试效率和结果的准确性。方法 :在用酒精固定细胞时分别加入终浓度为 0 % ,1.5 % ,3% ,6 %和 12 %的小牛血清 ,置 - 2 0℃分别固定细胞 1d ,3d和 7d。比较了不同浓度的血清和保存不同时间粘连细胞的数量及对细胞周期分析结果的影响。结果 :加入血清可明显减轻细胞的粘连 ,减少了细胞的聚集数量 ,尤以 3%小牛血清组最佳。样品可不必过滤 ,在上机测试时 ,进样针不堵塞 ,上样速度快 ,细胞周期分析更准确。随着保存时间的延长 ,聚集细胞的数量有增加的趋势。结论 :在制备用于测定细胞周期的样品时 ,固定细胞的过程中加入终浓度为 3%的小牛血清是一种简单的、能有效地保护细胞膜使细胞不易粘连的技术措施 ,且固定细胞的时间不宜超过 7d。
- 董波陈肖华张浩张军权罗庆良史莲萍毛秉智
- 关键词：细胞周期流式细胞术
