牛丹丹
- 作品数:75 被引量:135H指数:7
- 供职机构:天津科技大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程文化科学更多>>
- 一种从食醋发酵过程中提取微生物总基因组的方法
- 本发明涉及传统食醋发酵过程样品中微生物总基因组的通用提取方法,属于分子生物学技术领域。本发明要解决的技术问题是提供一种适合于从固态发酵、半固态发酵和液态发酵的不同状态的传统食醋样品中提取微生物总基因组的方法。本发明的微生...
- 王敏聂志强郑宇申雁冰韩玥骆健美牛丹丹
- 文献传递
- 一种果糖基转移酶及其高产菌株
- 本发明属于微生物发酵和酶工程领域,具体涉及一种果糖基转移酶、其高产菌株的构建和果糖基转移酶的高效发酵制备。本发明分离获得一株具有较好合成果糖基转移酶的黑曲霉菌株,确定其果糖基转移酶及其编码基因;进一步通过无痕基因交换方法...
- 王正祥路福平牛丹丹田康明
- 文献传递
- 一种以蔗糖为原料生产乳酸单体的生产菌株及其获得方法
- 本发明公开了一种以蔗糖为原料生产乳酸单体的生产菌株及其获得方法,包括在现有合成乳酸单体的代谢工程大肠杆菌中表达蔗糖酶,获得了高效代谢蔗糖的菌种,此菌种能够直接发酵蔗糖高效合成乳酸单体,其蔗糖到乳酸单体的转化率达到102%...
- 王正祥田康明牛丹丹路福平
- 文献传递
- 一种低聚异麦芽糖的制造方法及其催化剂
- 本发明提供了一种以淀粉及其衍生物为原料,酶法生产低聚异麦芽糖的方法,通过将来源于黑曲霉的α-葡萄糖苷酶编码基因组合表达,并由固定化α-葡萄糖苷酶催化合成低聚异麦芽糖和由非水双相体系进行产品-固定化酶的快速分离与再循环。本...
- 王正祥路福平牛丹丹
- 文献传递
- 红曲菌9903A转化体系影响因素的研究被引量:4
- 2007年
- 采用PEG介导的原生质体转化方法,研究了将含有潮霉素抗性基因的质粒pMP-Hygro转入红曲菌9903A的影响因素。实验结果表明,原生质体转化最佳条件为:1.0mol/L的山梨醇为渗透压稳定剂;以含有50mmol/L的Ca2+和最终质量分数为40%的PEG4000为转化介质;最佳原生质体浓度和载体DNA用量分别为1×108个/mL、1μg/100μL原生质体;原生质体再生培养基采用不含无机盐的培养基,再生方式采用原生质体液涂布单层再生培基平板法。得到的平均DNA转化率可达160个/μgDNA。本文所研究的PEG介导的原生质体转化方法可以较好的向红曲菌细胞导入外源DNA,并使外源DNA在红曲菌细胞内大量表达。
- 夏永军牛丹丹王正祥许赣荣
- 关键词:红曲菌原生质体转化潮霉素抗性
- 一种乳糖酶及其应用
- 本发明属于酶工程技术领域,具体涉及一种乳糖酶及其应用。本发明以两种来源的乳糖酶(来源于环状芽胞杆菌B2301的BglD305和来源于环状芽胞杆菌ATCC 31382的BglD)分子为基础进行分子进化,获得合成低聚半乳糖效...
- 牛丹丹王正祥田康明
- 一种快速鉴定细菌的方法被引量:8
- 2007年
- 16S rDNA基因同源性分析是一种常用的细菌分子鉴定方法,16S rDNA基因的扩增需要细菌染色体DNA作为模板。传统的细菌染色体DNA提取方法费时费力,限制了细菌分子鉴定的规模化。文中建立了1种新的快速高效的细菌染色体DNA提取方法,整个提取过程仅耗时20min,从而使得细菌的快速鉴定成为可能。用该方法制备的染色体DNA无需任何处理即可作为模板用于PCR扩增细菌的16S rDNA基因,并获得了良好的扩增结果以及扩增产物的测序结果。
- 陈源源牛丹丹王正祥
- 关键词:细菌DNA扩增
- 中温α-淀粉酶在地衣芽孢杆菌中的异源表达被引量:4
- 2015年
- 提高中温α-淀粉酶生产菌株的发酵温度,对减少冷却水消耗降低生产成本有重要意义。本文利用基因删除技术删除了地衣芽孢杆菌CBBD302菌株α-淀粉酶的编码基因(amy L)获得突变株D402。将表达解淀粉芽孢杆菌中温α-淀粉酶基因Ba A的重组质粒p HY-WZX-Ba A转化D402,获得表达中温α-淀粉酶的重组地衣芽孢杆菌D402/p HY-WZX-Ba A。摇瓶发酵实验显示,重组菌最适发酵温度为42℃,比原生产菌株提高8℃,最高产酶水平达到301 U/m L。30 L发酵罐发酵试验,78 h达到最高酶活531 U/m L。重组酶的最适作用温度为60℃,最适作用p H 6.5,在90℃保温20 min可以完全失活,保持了中温α-淀粉酶既能在淀粉糊化温度下保持稳定又便于灭酶的优良性能。
- 范如意牛丹丹应喜娟沈微陈献忠
- 关键词:解淀粉芽孢杆菌地衣芽孢杆菌异源表达
- 过量表达辅酶PQQ合成蛋白的基因工程醋酸菌及其应用
- 本发明涉及一种重组表达辅酶PQQ(吡咯喹啉醌)生物合成蛋白的基因工程醋酸菌的构建方法,所述PQQ生物合成蛋白为PqqA、PqqB、PqqC、PqqD、PqqE,以及它们的功能等同物。将来源于巴氏醋杆菌中的乙醇脱氢酶启动子...
- 郑宇王敏申雁冰牛丹丹骆健美聂志强殷海松
- 文献传递
- 全基因合成方法学研究(英文)被引量:4
- 2007年
- 通过基因全合成实现基因的分子改造和人工组建正成为一种实验室常规手段,因此,建立一种能够在相对低廉和短时间内准确和高效地设计和合成长片段基因的方法十分重要.本研究报道了一种重复性好、错误率低、低成本和简便的基因设计和全合成方法.此方法包含经DNA2.0软件的序列优化,Gene2Oligo软件的寡核苷酸设计,覆盖全长基因双链的寡核苷酸的组合和引物介导下的全基因的合成等步骤.运用此方法,对3个不同长度的基因(分别为653bp,1309bp和1498bp)成功地进行了密码子优化和一步全合成.其中的amyFF在大肠杆菌中表达量提高了12倍.
- 牛丹丹王正祥
- 关键词:基因设计