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王冰

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
发文基金：辽宁省自然科学基金更多>>
相关领域：生物学化学工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇化学工程

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇点突变
  • 1篇定点突变
  • 1篇胰岛
  • 1篇胰岛素
  • 1篇胰岛素样
  • 1篇胰岛素样生长...
  • 1篇胰岛素样生长...
  • 1篇胰岛素样生长...
  • 1篇胰外
  • 1篇脂质体
  • 1篇脂质体介导
  • 1篇质粒
  • 1篇葡萄糖
  • 1篇葡萄糖浓度
  • 1篇重组质粒
  • 1篇结合蛋白
  • 1篇介导
  • 1篇基因
  • 1篇基因重组

机构

  • 1篇中国医科大学...

作者

  • 1篇张锦
  • 1篇王冰
  • 1篇袁凤山
  • 1篇杜宁
  • 1篇王大会
  • 1篇王玉霞
  • 1篇吴志香

传媒

  • 1篇中国生物工程...

年份

  • 1篇2005
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
人胰岛素原基因B10位定点突变对增强胰外表达效率的实验研究
2005年
目的构建在肝细胞内增强表达成熟人胰岛素的生理调控性人胰岛素原基因重组质粒。方法利用PCR定点突变技术在B-C及C-A连接处已两点突变的人胰岛素原基因上进行B10位突变,并在其上游连接肝细胞特异的3倍体葡萄糖反映元件(GLRE3)和胰岛素样生长因子结合蛋白-1启动子(IGFBP-1P)。经酶切后将含有调控元件的3点突变人胰岛素原基因(GLRE3-IGFBP-1P-3mINS)插入逆转录病毒载体(pLXSN),脂质体介导转染大鼠肝癌细胞CBRH7919后检测成熟胰岛素表达情况及与含有调控元件的2点突变人胰岛素原基因(GLRE3-IGFBP-1P-3mINS)表达体的表达差异。结果人胰岛素原基因的B10位组氨酸编码序列CAC突变为门冬氨酸编码序列GAC。构建了含调控元件的B10位门冬氨酸人胰岛素原基因逆转录病毒载体质粒(pLXSN-GLRE3-IGFBP-1P-3mINS),酶切、PCR及测序鉴定各段基因碱基序列及连接方向正确。pLXSN-GLRE3-IGFBP-1P-3mINS经脂质体包裹转染大鼠肝癌细胞,细胞外液含5.0、25.0mmol/L的葡萄糖浓度下胰岛素含量分别为5.03±0.72、43.90±2.30mU/L。未进行B10位突变的重组体转染组在同样葡萄糖浓度下胰岛素含量分别为<2.00、2.10±0.23mU/L。结论成功构建了含调控元件的B10位门冬氨酸人胰岛素原基因逆转录病毒载体重组质粒,该重组体已整合入鼠肝癌细胞基因组,其表达效率显著提高并受葡萄糖生理性调控。
袁凤山王大会王冰张锦王玉霞吴志香杜宁
关键词：定点突变胰岛素样生长因子结合蛋白-1基因重组质粒葡萄糖浓度脂质体介导
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