王凯
- 作品数：19 被引量：42H指数：4
- 供职机构：中国人民解放军海军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脐带造血干细胞移植治疗儿童恶性或非恶性疾病死亡分析
- 2009年
- 目的探讨脐带造血干细胞移植治疗儿童恶性或非恶性疾病后患儿的常见死亡原因。方法对本院采用脐带造血干细胞移植治疗的28例儿童恶性疾病或非恶性疾病患儿的临床资料进行回顾性分析,包括24例恶性疾病和4例非恶性疾病。3例行同胞脐血干细胞移植,25例行异基因脐带造血干细胞移植,其中HLA高分辨全相合、5个位点相合各10例,4个位点相合5例,3个位点相合3例。预处理均采用清髓性方案,7例ALL采用全身放疗/环磷酰胺/抗胸腺Ig,余21例采用白消安/环磷酰胺/抗胸腺Ig。于0d回输脐血有核细胞中位数为8.51(4.27～12.2)×107/kg,CD34+细胞的中位数为1.81(1.27～2.31)×105/kg。预防急性移植物抗宿主病均采用环孢素和小剂量甲泼尼龙,其中3例另加霉酚酸酯,1例加CD20单抗。随访4～86个月。结果28例行脐血造血干细胞移植的恶性或非恶性疾病儿童,存活16例(57.1%),死亡12例(42.9%)。死于感染7例(25.0%),其中间质性肺炎、真菌感染性肺炎各3例,病毒性肺炎1例;死于复发3例(10.7%);死于急性移植物抗宿主病2例(7.1%)。结论儿童恶性疾病的原发病复发是脐带造血干细胞移植后常见的死亡原因之一,感染是儿童恶性疾病和非恶性疾病行脐血造血干细胞移植后另一常见死亡原因。
- 唐湘凤栾佐吴南海徐世侠黄友章王凯龚小军
- 关键词：间质性肺炎儿童
- 幼年粒单细胞白血病造血干细胞移植疗效初探被引量：5
- 2010年
- 目的探讨造血干细胞移植治疗幼年粒单细胞白血病(JMML)的疗效。方法 5例JMML患儿接受无关供者脐血造血干细胞移植治疗。预处理均采用Bu/Cy+Mel+ATG方案:马利兰(0.8～1.0)mg/kg,每6小时1次共用16次(-8d～-5d);环磷酰胺60mg/(kg·d)用2d(-4～-3d);马法兰140mg/m2用1次(-2d):抗胸腺细胞球蛋白2.5mg/(kg·d)连用4d(-4～-1d)。GVHD预防采用CsA+MP±MMF。结果 5例成功植入,3例复发,1例复发后死于卡氏肺囊虫肺炎,1例死于CMV感染相关间质性肺炎,1例长期无病存活。结论 5例JMML移植初步治疗结果不满意,移植失败主要原因为白血病复发。为减少复发,今后需进一步改进移植方法 ,包括选择其他供体、改进GVHD预防方案。
- 吴南海栾佐唐湘凤徐世侠龚小军王凯
- 关键词：脐带血
- 儿童难治性自身免疫性疾病自体外周血干细胞动员采集和分选的临床研究被引量：4
- 2010年
- 目的探讨儿童难治性自身免疫性疾病进行自体外周血干细胞动员采集的安全性和CD34^＋细胞分选纯化的可行性及其临床意义。方法8例儿童难治性自身免疫性疾病，包括4例系统性红斑狼疮、2例皮肌炎，1例幼年型类风湿关节炎和1例多发性硬化，予行CD34^＋细胞纯化的自体外周血于细胞移植。首先采用环磷酰胺（CTX）联合粒细胞集落刺激因子（G—CSF）方案动员外周血干细胞，然后采用CS-3000血细胞分离机采集外周血，通过CliniMACS细胞分选仪分选自体外周血CD34^＋细胞，将其用保养液配置冻存于-80℃冰箱。采用非清髓内去除T的预处理方案．即卡氮芥＋足叶乙苷＋阿糖胞苷＋马法兰＋抗胸腺球蛋白（ATG）或CTX＋ATG或CTX＋马法兰＋ATG，于第0天回输自体外周血CD34^＋细胞。结果儿童能够耐受自体外周血干细胞动员采集过程，无动员相关死亡，动员后获得的单个核细胞数和CD34^＋细胞数的平均值分别为8．35×10^8/kg和7．92×10^6／kg，纯化后的自体外周血CD34^＋和CD3^＋细胞数的平均值分别为6．28×10^6／kg和0．71×10^5／kg。回输后中性粒细胞和血小板的植入中位时间分别为＋11d和＋15d。结论经CTX联合G—CSF方案可动员出足量的外周血干细胞，经CS-3000血细胞分离机采集可获得足够的单个核细胞，在动员过程中原发病无明显进展恶化，患儿能耐受动员方案，采集过程顺利安全；经CliniMACS细胞分选仪分选的自体外周血CD34^＋细胞纯度高，移植后造血恢复；采用CD34^＋细胞纯化的自体外周血移植治疗是常规治疗无效的儿童难治性自身免疫性疾病的可选择治疗措施之一。
- 唐湘凤栾佐吴凤岐赖建铭吴南海王凯龚晓军黄友章
- 关键词：自身免疫疾病儿童
- 急性白血病形态学诊断及其发病特点——233例患者的10年回顾性分析被引量：3
- 2012年
- 本研究探讨急性白血病(AL)形态学诊断价值及AL发病特点。收集2001-2011年间本院初诊AL 233例患者骨髓和外周血细胞,进行形态学(M)、免疫学(I)、遗传学(C)和分子生物学(M)检查,比较形态学结论与MICM结论之间的关系,分析10年中AL的发病特点。结果显示:①形态学结论与MICM结论的符合率为84.3%,符合率依次是AUL与AML-M0ALL>HAL>AUL;在AML中,M2>M5>M4>M3>M1>M0>M6>M7>AP患者;⑤最小年龄1岁,最大88岁,中位发病年龄(岁):AUL为41.5,M0为40.8,M1为43.4,M2为46.3,M3为33.8,M4为42.6,M5为48.8,M6为77.3,M7为2.5,AP为65.0,ALL为29.1,HAL为40.3;⑥近5年患者数(139例)明显多于前5年(94例)患者数,特别是M1、M2、M3、M4和M5。结论:在AL的MICM诊断中,形态学诊断具有重要的临床价值,重视易混淆的白血病细胞形态及发病特点可提高诊断的准确性。
- 刘毅黄友章宫立众岑坚王立新向丹马巍娜唐湘凤吴南海龚小军王凯尹文杰赵德峰刘小鹏胡小山沈建良
- 关键词：急性白血病形态学免疫学细胞遗传学
- AD5/F35腺病毒载体对不同来源造血系统恶性细胞转染效率的研究被引量：8
- 2006年
- 本研究比较AD5/F35腺病毒载体对不同来源的血液系统恶性细胞系感染效率的差异和细胞毒性反应。用AD5/F35-EGFP以不同MOI(感染复数)感染不同来源的血液恶性细胞系并用AD5-EGFP作为对照;用流式细胞术检测荧光阳性细胞比例,进行荧光显微镜照相并用MTT法检测病毒对感染靶细胞的杀伤作用。结果表明:对于髓系来源的细胞在MOI为30时,AD5/F35载体的感染效率大于99%,AD5载体在MOI为1000时感染效率为26.4%;对于B系来源的细胞在MOI为1000时,AD5/F35载体感染效率为11.7%,AD5载体为5.7%;AD5/F35和AD5载体都不能有效地感染T系来源细胞,在MOI达到1000也未检测到荧光阳性细胞。在MOI为1000的情况下AD5/F35载体对感染靶细胞也无明显杀伤作用。结论:AD5/F35载体对不同来源的血液恶性细胞的感染具有一定的选择性,对髓系来源细胞感染能力强,对B系来源细胞有一定感染能力,而且对感染靶细胞毒性小。AD5/F35载体优于常用的5型腺病毒载体,在以髓系细胞为靶细胞的基因治疗中有着较好的应用前景。
- 王凯彭建强袁振华吴小兵
- 关键词：细胞毒作用
- “和谐使命-2011”儿科医疗服务工作回顾被引量：1
- 2012年
- 目的分析在加勒比地区进行海外医疗服务时儿童门诊就诊情况,为今后开展类似的医疗服务提供经验。方法根据此次前出执行任务所登记的内容进行分类统计分析。结果 4国门诊患儿以呼吸系统疾病、皮肤过敏性疾病、运动系统疾病及先天性畸形为主,疾病中以上呼吸道感染、湿疹、哮喘为主,使用药物中以抗生素和抗过敏药物为主。结论通过本次执行任务对当地的儿童卫生状况有了初步的了解,分析了相关问题。为今后开展此类工作提供了经验。
- 徐世侠王凯陈燕
- 关键词：儿童加勒比地区门诊医院船
- 脐血移植治疗儿童恶性或非恶性疾病的死亡原因分析
- 2008年
- 目的探讨脐带造血干细胞移植治疗儿童恶性或非恶性疾病后患儿的常见死亡原因。方法对采用脐带造血干细胞移植治疗的28例儿童恶性或非恶性疾病患儿的临床资料进行回顾性分析。结果移植后共死亡12例(42.9%),分别死于感染7例(肺部间质性肺炎3例、霉菌感染3例、病毒性肺炎1例),复发3例,急性移植物抗宿主病2例。结论原发病复发和感染是脐带造血干细胞移植后患儿最常见的死亡原因。
- 唐湘凤栾佐吴南海徐世侠黄友章王凯
- 健康人与非白血病性血象异常患者骨髓中巨核细胞的比较被引量：7
- 2013年
- 目的探讨非白血病性血细胞异常患者骨髓内巨核细胞染色方法、形态分类与数量的表现在疾病诊断与鉴别诊断中的意义。方法收集造血干细胞移植体检及(或)排除白血病外的血细胞异常的患者骨髓细胞涂片共1482例,分别行瑞氏-姬姆萨(W-G)、过碘酸-雪夫反应(PAS)和巨核细胞酶标组化(SPA,CD_(41)^+)染色,显微镜下将1.5cm×3.0cm面积内巨核细胞行形态分类,比较不同疾病骨髓中巨核细胞的亚类与数量。结果辨认颗粒、产板和Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型巨,W-G、PAS和SPA染色,差异无显著性;辨认原、幼巨PAS>SPA>W-G;辨认Ⅰ型巨SPA>PAS>W-G。巨核细胞总数最多者是ITP,其次hyS>Evans>PV>MDS>PTT;比健康人稍多,MegA>ACD>IDA>MF>MA>AIHA>TTP>PNH,比健康人少甚至为0者是PRCA和AA;原、幼巨增多的疾病有hyS>MegA>MF>PNH>Evans;ITP患者主要为颗粒巨增多、产板型减少,其中26.9%的患者未见产板型;与ITP类似的还有Evans和PNH;hyS与健康人比,颗粒和产板型巨均增多,检出率100%;病态型巨核数量MDS>ITP>MegA>Evans>PV>hyS>AIHA>ACD>PNH>MA>MF>PTT>IDA>PRCA;MDS为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型病态巨均增多,其他疾病少见Ⅰ型,增多者多为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型病态巨增多,Ⅰ型巨MDS>PV>MF>MegA>ITP>Evans>ACD。结论观察正常巨核时用PAS染色,观察病态巨核细胞时用SPA染色。病态巨虽不是MDS所特有,但数量和检出率对诊断有重要意义。
- 岑坚黄友章尹文杰宫立众刘毅王立新马巍娜向丹唐湘凤吴南海王凯赵德峰刘小鹏胡小山沈建良
- 关键词：巨核细胞
- 造血干细胞移植治疗儿童EB病毒相关T/NK细胞淋巴组织增殖性疾病疗效分析被引量：1
- 2012年
- 目的探讨造血干细胞移植治疗儿童EB病毒(EBV)相关T/NK细胞淋巴组织增殖性疾病(EBV-T/NK-LPD)的效果。方法海军总医院儿科2009-08-03收治1例EBV-T/NK-LPD患儿,年龄13岁6个月,经抗病毒药物、EB病毒特异性淋巴毒细胞(EBV-CTL)、白细胞介素-2(IL-2)及化疗治疗无效,行HLA基因位点6/6全相合同胞外周血造血干细胞移植。预处理采用TBI/Cy+VP16方案:全身放射治疗(TBI)总剂量12Gy,分8次,术前8d至术前5d;环磷酰胺(CTX)60mg/(kg·d),术前3d至术前2d;依托泊苷(VP16)30mg/kg,术前4d。输入干细胞数量:单个核细胞(MNC)6.34×108/kg,CD34+细胞3.80×106/kg。移植物抗宿主病(GVHD)预防采用环孢菌素A+短程甲氨蝶呤(CsA+sMTX)。结果移植后造血恢复顺利,术后16d重建粒系造血,术后37d重建巨核系造血,术后60d后血象恢复正常。未出现严重感染、出血性膀胱炎、肝静脉闭塞症、间质性肺炎(IP)等并发症,未出现巨细胞病毒(CMV)感染。术后62d出现皮肤Ⅱ度GVHD。移植预处理前EBV-DNA1.2×105拷贝/mL,术后14dEBV-DNA转阴,造血重建后每周监测EBV-DNA持续阴性。移植后黄疸消失,肝功能恢复正常;复查颈部及腹部B超,未见颈部淋巴结肿大,肝脾未见异常,肝门及腹主动脉旁肿大淋巴结消失;肺CT扫描:未见肺门淋巴结肿大,纵隔无异常。移植后随访18个月,持续缓解。结论国内首例造血干细胞移植治疗EBV-T/NK-LPD,植入顺利,能持续缓解病情并可能治愈该病。
- 吴南海龚小军栾佐王凯唐湘凤
- 关键词：EB病毒T/NK细胞淋巴组织增殖性疾病造血干细胞移植儿童
- rAAV2-GPⅡb/GPⅢa载体构建和体外表达、功能实验被引量：2
- 2006年
- 为了研究rAAV载体介导的血小板无力症基因治疗的可行性,构建了由CMV启动子调控的rAAV2-Ⅱb、rAAV2-Ⅲa病毒载体,并采用多种方法验证了rAAV2-Ⅱb和rAAV2-Ⅲa病毒载体在真核细胞中的表达能力,其中包括用RT-RCR方法检测BHK-21细胞感染24小时(MOI=1×105v.g/cell)后目的基因在mRNA水平的表达,用流式细胞术的方法检测不同MOI和目的基因表达之间的量效关系,采用Westernblot的方法检测BHK-21细胞感染48小时后(MOI=1×105v.g/cell)目的基因在蛋白水平的表达,用免疫荧光法检测BHK-21细胞感染48小时后(MOI=105v.g/cell)目的基因在细胞表面的表达,以及应用PAC-I结合试验验证所表达的GPⅡb/Ⅲa蛋白功能。结果表明,在MOI=1×105v.g/cell条件下,在BHK-21细胞感染24小时后即可在mRNA水平上检测到目的基因的表达,在48小时可在蛋白水平检测到目的基因的表达;在一定剂量范围内目的基因的表达量随着MOI的增加而增加,但MOI过高反而使表达量下降,目的基因表达产物活化之后能与PAC-I结合,并具有正常的生物学活性。结论:rAAV2载体能有效地介导GPⅡb、GPⅢa基因在真核细胞内表达,所表达的产物都具有正常的生物学活性,此结果为rAAV2载体在血小板无力症基因治疗中的应用打下了基础。
- 王凯彭建强陈方平吴小兵
- 关键词：腺相关病毒载体血小板无力症
