王婉灵
- 作品数：6 被引量：42H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 后适应对大鼠脑缺血-再灌注损伤线粒体结构和功能的影响被引量：5
- 2007年
- 目的观察后适应对大鼠脑缺血-再灌注损伤线粒体结构和功能的影响。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血-再灌注模型组(MCAO)、MCAO+预适应组、MCAO+后适应组和MCAO+尼莫地平组。大鼠脑缺血-再灌注24 h后,取脑进行TUNEL染色,免疫组织化学检察Bcl-2,Bax,Casepase-3和p53的蛋白表达,测定大鼠脑组织线粒体肿胀度、膜流动性、膜磷脂(PL)和丙二醛(MDA)含量、测定线粒体Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并观察线粒体超微结构的改变。结果脑缺血-再灌注后半暗带线粒体的MDA含量明显增高,PL含量减少,膜脂流动性降低;ATP含量及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、SOD活性明显降低。与MCAO组比较,后适应组大鼠凋亡细胞和Bax、Casepase-3、p53蛋白表达明显减少,ATP含量及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、SOD活性明显升高。MCAO组大鼠脑线粒体肿胀,线粒体嵴断裂、溶解和消失,后适应明显减少缺血-再灌注引起的线粒体损伤程度。结论后适应对MCAO大鼠脑和线粒体的保护作用可能与其减少神经原凋亡,抑制p53、Bax、casepase-3表达,增加线粒体Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、SOD活性有关。
- 方芳王婉灵余术宜谢立新詹志学王晨静吴建华李健哲方云祥
- 关键词：脑缺血CASEPASE-3
- 后适应对大鼠实验性局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用被引量：28
- 2007年
- 目的研究后适应对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用与氧自由基的关系。方法大脑中动脉线拴法(MCAO)制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型:50只♂性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、脑缺血/再灌注模型组(MCAO)、预适应组(MCAO+preconditioning)、后适应组(MCAO+postconditioning)和尼莫地平组(MCAO+nimodip-ine),每组10只大鼠。术后对大鼠进行神经缺陷评分,并取脑组织测量梗死体积。另取50只大鼠,分组、实验方法及步骤同上,术后取梗死侧脑组织做成匀浆,检测脑组织中丙二醛(MDA)、乳酸(LA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)含量。结果后适应能减少大鼠实验性局灶性脑缺血的梗死体积、降低脑含水量,改善其神经行为。脑组织匀浆生化指标检测发现缺血后适应能降低脑组织中MDA和LA含量;升高SOD和GSH含量,与MCAO模型组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论缺血后适应能诱导脑缺血耐受,对脑缺血/再灌注损伤产生保护作用,其保护作用与增加脑组织的抗氧化能力有关。
- 方芳王婉灵余术宜张辉谢立新方云祥
- 关键词：缺血后适应缺血预适应脑缺血
- 重组克胰素的基因工程表达及药效学研究
- 第一章重组克胰素的真核表达和鉴定
目的：构建克胰素真核表达体系，纯化和鉴定重组克胰素，探索规模化重组克胰素制备技术。
方法：根据克胰素的cDNA序列，设计引物，在虎纹蜘蛛毒素的cDNA文库中，用PCR...
- 王婉灵
- 关键词：药效学胰蛋白酶钾离子通道基因工程
- 酶联免疫吸附法定量检测生物样品中的鼠神经生长因子
- 2008年
- 目的验证酶联免疫吸附（EUSA）法定量测定生物样品中的鼠神经生长因子（mNGF）。方法利用双抗体夹心原理，建立mNGF测定方法学，考察方法学特异性、灵敏度、线性范围、精密度与准确度；并用此法研究比格犬肌注mNGF后的药物动力学。结果方法特异性良好，线性范围31．2～2000Pg·mL^-1，可靠定量下限（LLOQ）为31．2pg·mL^-1批内及批间精密度均〈16％，准确度为-9．3％～12．1％。结论ELISA法灵敏度高、通量大、重复性、准确度及精密度好。适用于生物样品中mNGF的定量检测。
- 王婉灵邹佳陈方王清清方云祥
- 关键词：鼠神经生长因子酶联免疫吸附法药物动力学
- 虎纹捕鸟蛛毒素-X的化学合成及其鉴定被引量：1
- 2008年
- 应用芴甲氧羰基(Fmoc)固相方法化学合成了虎纹捕鸟蛛毒素-X(huwentoxin-X,HWTX-X),并在含5mmol/L GSH和0.5mmol/L GSSG的0.1mol/L Tris-HCl溶液(pH8.0)中氧化复性;复性产物与天然多肽具有相同的分子质量,在反相HPLC上共洗脱,其一维核磁共振谱规则分散,表明合成多肽形成了3对二硫键和稳定的空间结构,并与天然多肽相同;此合成的多肽能专一性抑制大鼠背根神经节细胞上N-型电压敏感钙离子通道,其IC50约40nmol/L.HWTX-X的成功合成和鉴定为进一步研究HWTX-X的结构与功能关系、药理学性质以及新型镇痛药物研发奠定了基础.
- 王婉灵刘中华钱万强梁宋平
- 关键词：化学合成
- 后适应对大鼠脑缺血神经细胞凋亡和内皮型一氧化氮合酶与诱导型一氧化氮合酶的影响被引量：12
- 2006年
- 目的研究缺血耐受(后适应和预适应)对脑缺血再灌注神经细胞凋亡及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达的影响。方法50只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、脑缺血再灌注模型组(MCAO)、预适应组(MCAO+preconditioning)、后适应组(MCAO+postcon-ditioning)和尼莫地平组(MCAO+nimodipine),每组10只大鼠。预适应组大鼠在MCAO前24h,双侧颈总动脉夹闭2min,再灌注20min,循环两次。后适应组大鼠在脑缺血再灌注开始时,再灌注20s,栓塞20s,循环3次。大鼠大脑中动脉阻断1.5h,再灌注24h。用TUNEL法和免疫组化染色法分别检测缺血半暗带凋亡细胞和iNOS、eNOS蛋白表达。结果与MCAO组比较,后适应组大鼠脑缺血半暗带的凋亡细胞显著减少,eNOS蛋白表达显著增加,iNOS蛋白表达显著减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论缺血后适应能诱导脑缺血耐受,对脑缺血/再灌注损伤产生保护作用,其保护作用与促进eNOS蛋白的表达,抑制iNOS蛋白的表达有关。
- 方芳王婉灵余术宜张辉谢立新方云祥
- 关键词：缺血后适应缺血预适应脑缺血ENOS
