王小强
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 供职机构：江苏科技大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目江苏省科技厅基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 家蚕耐氟近等基因系SSH文库的构建及初步分析
- 家蚕耐氟品系T6和敏感品系733新构建耐氟近等基因系,以回交11代的家蚕耐氟近等基因系群体中的耐氟个体和敏感个体中肠为材料,构建家蚕耐氟近等基因系抑制消减杂交(SSH)cDNA文库.
- 王小强徐安英李刚张月华钱荷英孙平江郭锡杰
- 家蚕基因(q)的SSR标记定位分析
- 对家蚕幼虫斑纹突变基因（，q）进行分子标记定位，有助于对性状的分子标记辅助选择和对该基因的定位克隆研究。利用家蚕雌性染色体在减数分裂过程中不发生交换的特点，采用幼虫斑纹为( q)的家蚕品系g03 和幼虫斑纹为素斑（p）的...
- 钱荷英张月华王小强徐安英孙平江黄勇平郭锡杰
- 关键词：家蚕基因基因定位SSR标记
- 谷胱甘肽硫转移酶参与家蚕氟化物耐受性形成的研究被引量：2
- 2018年
- 利用对氟化物高度敏感的家蚕品种733新和高度耐受性品种T6构建耐氟近等基因系,对回交15代的近等基因系群体从幼虫2龄眠起开始至4龄第3天连续添食200 mg/kg Na F溶液浸渍的桑叶,调查蚕体重要代谢酶类谷胱甘肽硫转移酶（glutathione S-transferase,GST）基因表达和酶活性的变化。解剖获取4龄3 d幼虫中肠组织进行双向电泳分析的结果显示,近等基因系群体中耐氟个体中肠的GST表达量比敏感个体明显上调。进一步利用实时荧光定量PCR检测GST基因在耐氟个体与敏感个体中肠、血淋巴、脂肪体和马氏管中的相对表达量,并对5龄1~6 d幼虫中肠、血淋巴中的GST酶活力进行测定。结果表明,家蚕对氟化物的抵抗力可能与体内GST酶活力的强弱有关,由于受氟化物刺激的诱导,可能导致GST基因表达水平发生了变化。研究结果为进一步探索家蚕耐氟机制提供了有用信息。
- 李刚王小强翁欣欣钱荷英徐安英
- 关键词：家蚕双向电泳谷胱甘肽硫转移酶实时荧光定量PCR
- 家蚕耐氟近等基因系差异表达基因的研究
- 我国是世界蚕业的发源地,栽桑养蚕、缫丝织绸已有5000多年的历史。栽桑养蚕是中国农业的一个重要组成部分,在国民经济中,已形成了一个农工贸完整的丝绸产业体系。蚕丝的出口贸易在我国国民经济中占有重要地位。蚕桑业的稳定发展对我...
- 王小强
- 关键词：家蚕抑制消减杂交双向凝胶电泳实时定量PCR
- 文献传递
- 家蚕碱性丝氨酸蛋白酶基因Asp的克隆及在不同耐氟性家蚕组织中的表达差异
- 2013年
- 在家蚕耐氟近等基因系SSH文库中发现一条差异表达的EST序列。以家蚕耐氟近等基因系群体的幼虫中肠cDNA为模板,利用RACE技术克隆了该基因的全长cDNA序列,将该基因命名为Asp(GenBank登录号:JX312360)。该基因cDNA全长868 bp,包括20 bp的5'-UTR和77 bp的3'-UTR,ORF为771 bp,编码256个氨基酸。该基因由4个外显子和3个内含子组成,编码蛋白质为亲水性蛋白,属于丝氨酸蛋白酶家族,在第17～18氨基酸残基处存在信号肽切割位点。荧光定量PCR检测该基因在家蚕耐氟近等基因系群体幼虫的中肠、脂肪体及马氏管中都有表达,以中肠的表达量最高,表达量因个体的耐氟性而存在差异:中肠中,敏感个体的表达量是耐氟个体的2.49倍;脂肪体中,敏感个体与耐氟个体之间的表达量差异不显著;马氏管中,敏感个体的表达量是耐氟个体的8.16倍。该基因在不同耐氟性家蚕品种5龄幼虫中肠的表达量存在极显著差异,在耐氟性品种的表达量是氟敏感品种的50倍。研究结果提示,该碱性丝氨酸蛋白酶基因可能与家蚕的耐氟性有一定的关联。
- 张华光吴萍徐安英钱荷英张月华孙平江王小强
- 关键词：家蚕荧光定量PCR
- 家蚕绵茧突变品系中部丝腺的差异蛋白组学分析
- 2012年
- 为了获取与家蚕绵茧突变形成相关蛋白质的基础信息,采用蛋白质双向电泳技术对结茧性状具有明显差异的正常茧、绵茧、丝胶茧3个家蚕品系5龄期幼虫中部丝腺不同区段的蛋白质进行双向电泳(2-DE)分析,图谱中的蛋白点主要集中在分子质量14～70 kD、等电点(pI)4～9的区域。采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对部分表达量差异显著的蛋白点进行鉴定,获得35种可信的蛋白质,绵茧突变品系与正常茧、丝胶茧品系相比表达量有显著差异的蛋白质包括参与能量代谢、蛋白质合成等生物学过程的功能蛋白质,其中丝氨酸蛋白酶抑制剂16(serpin16)和丝氨酸蛋白酶抑制剂18(serpin18)可能与家蚕绵茧突变形成相关。
- 张俊徐安英王小强李刚张月华钱荷英孙平江
- 关键词：家蚕差异蛋白质双向电泳
- 家蚕斑纹突变基因(q)的SSR标记定位分析被引量：1
- 2013年
- 对家蚕幼虫斑纹突变基因(q)进行分子标记定位,有助于对性状的分子标记辅助选择和对该基因的定位克隆研究。利用家蚕雌性染色体在减数分裂过程中不发生交换的特点,采用幼虫斑纹为鹑斑(q)的家蚕品系g03和幼虫斑纹为素斑(p)的家蚕品系C108,组配正反交群体g03♀×(g03×C108)F1♂和(g03×C108)F1♀×g03♂,分别记作BC1M和BC1F。用已经构建的家蚕SSR分子标记连锁图谱中第7连锁群上的12对SSR标记引物在亲本间进行多态性筛选。BC1F群体中的普斑个体均表现出与(g03×C108)F1相同的杂合型带型,而所有个体的带型与亲本g03一致,为纯合型。结果筛选出S0703、S0707和S0710共3个与q基因连锁的SSR标记。利用BC1M群体构建了家蚕q基因及其连锁的SSR标记遗传连锁图,图距为18.0 cM,3个SSR标记及q基因的排列次序为S0703-q-S0707-S0710,q位于4.5 cM处,与q基因最近的标记为S0703,遗传距离为4.5 cM。
- 钱荷英张月华郭锡杰王小强孙平江徐安英
- 关键词：家蚕SSR标记基因定位遗传连锁图
- 家蚕耐氟近等基因系SSH文库的构建及部分差异表达基因的分析被引量：5
- 2011年
- 为了获取与家蚕耐氟性状相关的基因信息,利用家蚕耐氟品种T6和氟化物敏感品种733新建立耐氟近等基因系,以回交11代的家蚕耐氟近等基因系群体中的耐氟个体和敏感个体的中肠为材料,构建家蚕耐氟近等基因系抑制消减杂交(SSH)cDNA文库。通过对抑制消减杂交cDNA文库中随机挑选的153个阳性克隆测序和聚类拼接,得到19个重叠群(con-tig)、47个已知功能基因(un igene)和28个未知功能基因。获得的表达序列标签(EST)经BLASTx比对和同源性分析,初步发现这些基因参与家蚕体内物质转运、能量代谢、基因转录、蛋白质合成与降解、蛋白质加工、信号转导、机体免疫防御、细胞结构形成等诸多生物学过程。采用实时定量RT-PCR方法,对部分基因在家蚕耐氟近等基因系群体中的耐氟个体和敏感个体的不同组织的表达进行定量分析,发现磷酸根离子转运蛋白基因、三磷酸腺苷(ATP)合成酶基因、液胞型H+-ATP酶基因、脂肪酶基因以及主要过敏原蛋白基因在耐氟个体的中肠、马氏管、脂肪体组织中的表达量有较明显上调。
- 王小强徐安英李刚张月华钱荷英孙平江郭锡杰
- 关键词：家蚕抑制性消减杂交实时定量RT-PCR
