王泽生
- 作品数：15 被引量：76H指数：3
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- c-Src结构域真核表达载体的构建及鉴定
- 2011年
- 通过聚合酶链式反应(PCR),将c-Src的三个结构域SH3、SH2和KD分别定向克隆至C端带有HA蛋白标签序列的真核表达载体pcDNA3中.经HindIII和XbaI双酶切分析和测序鉴定正确后,应用脂质体法转染HeLa细胞48 h,蛋白免疫印迹法可以检测到细胞内SH3、SH2和KD的表达,证明重组表达质粒pcDNA3-SH2、pcDNA3-SH3和pcDNA3-KD构建成功,为进一步研究Src激酶在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础.
- 张瑶楠石冲马永超王泽生张玉祥
- 关键词：SRCSH2KD真核表达载体
- 内源性一氧化氮与缺血/再灌性室性心律失常的关系被引量：3
- 1998年
- 为探讨内源性一氧化氮（ＮＯ）在缺血／再灌性室性心律失常发生中的作用，观察缺血／再灌注损伤早期的室性心律失常（ＶＡ），血中ＮＯ及心肌一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）活性。结果：①缺血／再灌组（Ｉ／Ｒ组）动物缺血及再灌注期各种心律失常均高于对照组（Ｐ＜０．０１），而血中ＮＯ含量皆低于对照组（Ｐ＜０．０５）。ＶＡ等级与ＮＯ含量呈负相关（ｒ＝０．７４５１４，Ｐ＜０．０５）。提示：血中ＮＯ量的减少与缺血／再灌注性ＶＡ增加有密切关系。②Ｉ／Ｒ组与对照组心肌中ＮＯＳ活性无显著差异。提示血中ＮＯ减少，可能不是生成减少而是消耗增多所致。
- 张立克朱盈芬芦玲巧王泽生褚金花顾瑞孙林丁鼎武
- 关键词：一氧化氮心肌缺血再灌注损伤心律失常
- 人胰腺癌HPAC细胞中Furin蛋白的表达和序列分析研究
- 2013年
- [目的]研究人胰腺癌HPAC细胞中furin蛋白的表达,并对furin蛋白序列进行分析,探讨furin对HPAC细胞的作用及影响。[方法]采用Western Blot方法检测HPAC中furin蛋白的表达,并运用生物信息学技术对furin蛋白序列进行分析。[结果]Furin在进化过程中保守性不强,而furin蛋白与Furin基因不同,在进化过程中高度保守,并且含有较多的螺旋和折叠结构。胰腺癌细胞系HPAC中的furin蛋白能高度表达;生物信息学分析结果显示,Peptidase S8/S53 domain是furin的主要功能结构域。[结论]可以通过对Peptidase S8/S53 domain进行突变,进一步分析furin的生物学功能,为胰腺癌靶向治疗提供理论依据。
- 刘京津王泽生张玉祥
- 关键词：FURIN胰腺癌细胞生物信息
- 兔抗人纤维蛋白抗体的制备
- 1998年
- 兔抗人纤维蛋白抗体的制备首都医科大学病理解剖学教研室李良董小黎生化教研室王泽生于培兰首都医科大学附属北京红十字朝阳医院内科容凯纤维蛋白是在血液凝固过程中，由纤维蛋白原经一系列酶催化的化学链锁反应转化而来，因此在防治血栓性疾病时，研究纤维蛋白的形成及其...
- 李良董小黎王泽生于培兰容凯
- 关键词：纤维蛋白原抗人纤维蛋白抗体
- Notch1在前列腺癌细胞PC3中对其配体Jagged1表达的调控被引量：4
- 2007年
- 目的探讨在前列腺癌细胞PC3中,Notch1和Jagged1对细胞生长的影响,及Notch1对其配体Jagged1表达的调控作用。方法通过siRNA干扰的方法分别抑制Notch1和Jagged1蛋白的表达,用MTT法检测PC3细胞的生长;分别通过siRNA干扰和转染质粒的方法,抑制和促进PC3细胞中Notch1蛋白的表达,用Western blot检测Jagged1蛋白水平,用Real-timePCR检测Jagged1 mRNA水平。结果抑制Notch1和Jagged1蛋白的表达后,PC3细胞的生长减慢;抑制Notch1的表达引起Jagged1的蛋白水平下降而过表达Notch1引起Jagged1的蛋白水平上升,同时,Jagged1蛋白水平与mRNA水平的变化不一致。结论Notch1和Jagged1对前列腺癌细胞PC3的生长有重要影响。Notch1可以调控其配体Jagged1的表达。
- 倪勤余和芬王泽生
- 关键词：前列腺癌PC3NOTCH1JAGGED1
- HSP70-GST融合蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2006年
- 目的构建小鼠热休克蛋白70(HSP70)重组原核表达质粒,获取小鼠HSP70-GST融合蛋白。方法先用RT-PCR方法从小鼠脑基因组中扩增出HSP70基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆到质粒pMD—Tvector,经DNA测序证实基因碱基无误后,亚克隆到原核表达质粒pGEX-4T-1 中进行表达。结果表达产物经Western Blot分析,在109 KD处有一明显特异带,与预期结果相符。结论构建重组融合表达载体pGEX—HSP70,用基因工程的方法在原核细胞中成功表达出小鼠 HSP70-GST融合蛋白。
- 油红捷王泽生
- 关键词：RT-PCR热休克蛋白70基因表达
- 利用RNA捕获法在全基因组进行egfr启动子片段的富集被引量：1
- 2011年
- 目的以表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,egfr)启动子片段为目标靶序列,用RNA捕获法在全基因组进行靶序列的富集,结合第二代测序技术,实现候选基因区段的深度测序。方法本研究以宫颈癌细胞系HeLa S3 egfr启动子为模型,提取基因组后用MboⅠ酶切,补平加PE接头,回收400 bp～1000 bp的DNA片段作为模板,并用egfr启动子RNA与制备的基因组模板杂交将egfr启动子片段富集,富集的DNA片段PCR扩增15轮后用Solexa高通量测序。结果通过生物信息学技术分析,从实验组中随机取总条数为106 reads,比对到egfr启动子片段reads条数为1 889条,而比对到随机挑选的notch 1、pdgf-B、src基因reads条数分别为2、3、3条。从人类全基因组随机取总条数为106的等长reads作为对照组,比对到notch 1、pdgf-B、src、egfr基因reads条数分别为3,2,3,2条。在本实验中egfr启动子片段通过RNA捕获法被富集了630倍。结论用本研究建立的RNA捕获法进行基因组靶序列捕获、富集、测序文库建立的技术路线可行,所建DNA文库可直接用于Solexa测序仪的测序。RNA捕获技术与第二代高通量测序技术结合能应用于靶区域的重测序,研究可变剪切、核小体分布,发现和分析新的单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphisms,SNPs)位点,寻找许多复杂疾病相关基因及位点,针对性强,简便易行,节约成本。
- 杨锦邹斌斌张玉祥王泽生
- 关键词：高通量测序
- 毛细管电泳技术分离哺乳动物脑组织中神经节苷脂被引量：3
- 1996年
- 利用毛细管电泳（ｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＣＥ）分离猪脑、鼠脑组织中主要几种神经节苷脂ＧＭ_１、ＧＤ_（１ａ）、ＧＤ_（１ｂ）、ＧＴ_（１ｂ），在缓冲液中加入α－环状糊精（α－ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ，α－ＣＤ）来提高分离的选择性和效率，并对缓冲液的ｐＨ值、α－ＣＤ浓度和电压等变化因素进行研究。结果表明在含１５．０ｍｍｏｌ／Ｌα－环状糊精的２．５ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸级冲液（ｐＨ８．６）中，电压为２５ｋＶ时能很好的分离生物样品。从猪脑提取物中分离出ＧＭ_３、ＧＭ_１、ＧＤ_（１ａ）、ＧＤ_（１ｂ）、ＧＴ_（１ｂ）和含唾液酸的其他糖脂类物质，鼠脑中分离出ＧＭ_１、ＧＤ_（１ａ）和ＧＴ_（１ｂ），说明毛细管电泳可用于分离神经节苷脂，具有快速、简便、节约等特点。
- 黄如彬王泽生潘颖佟大山史小玲韩淑杰
- 关键词：神经节苷脂毛细管电泳哺乳动物
- 一种抑制蛋白激酶CK_2活性的新多肽的分离和鉴别被引量：1
- 2004年
- 从猪肾上腺髓质嗜铬细胞分泌颗粒裂解物中纯化出 3种新多肽 ,经N 末端降解分析和质谱测定 ,它们分别位于猪嗜铬颗粒蛋白A(CgA) 3 0 8— 3 2 4、3 0 8— 3 2 8及 3 0 8— 3 2 9肽段 ,具有相同N 端区 ,而C 端长度不同。合成的CgA 3 0 8— 3 2 4肽段 ,即GN 1 7在浓度低于 6μmol/L时即可竞争性抑制CK2 活性 ,IC50 为 5 0 μmol/L。
- 王泽生杨晓梅油红捷杜毅峰Etienne J.Nouwen
- 关键词：活性肽质谱蛋白激酶CK2
- 嗜铬颗粒蛋白B-GST融合蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达
- 2006年
- 目的构建小鼠嗜铬颗粒蛋白B(chromogranin B,CgB)重组原核表达载体。方法先用RT-PCR方法从小鼠脑基因组中扩增出CgB基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆到质粒pMD-T vector,经DNA测序证实基因碱基无误后,亚克隆到原核表达质粒pGEX-4T-1中进行表达。结果表达产物经Western Blot分析,在140处有一明显特异带,与预期结果相符。结论构建重组融合表达载体pGEX-CgB,在原核细胞中成功表达出小鼠CgB-GST融合蛋白。
- 油红捷毋晓涛潘颖王泽生
- 关键词：RT-PCR基因表达
