王贝
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 3种菌株产木聚糖酶同工酶及其酶解产物的比较被引量：2
- 2012年
- 探讨3种菌株所产木聚糖酶组分及其酶解产物的差异,为酶制剂和功能低聚木糖的研发和应用提供理论依据。采用SDS-PAGE电泳,研究黑曲霉C71、康宁木霉M46及XYNB重组工程菌G81所产的木聚糖酶同工酶。结果表明,C71、M46及G81分别产3种、4种和2种木聚糖酶同工酶;以桦木木聚糖为底物,在酶添加量为70U/g、底物20g/L、反应时间10h条件下进行酶解,采用TLC及HPLC分析酶解产物。TLC结果表明,C71和M46酶解液中含有木糖、木二糖和木三糖;G81酶解液中含有木二糖、木三糖和木四糖。HPLC结果表明,C71酶解液中木糖、木二糖和木三糖的质量浓度分别为2.4、1.3和1.7g/L;M46酶解液中木糖、木二糖和木三糖的质量浓度分别为1.5、1.8和2.1g/L;G81酶解液中木二糖、木三糖和木四糖的质量浓度分别为2.6、2.7和1.4g/L。不同菌株所产木聚糖酶组分及其酶解产物存在差异,低聚木糖的研发应根据酶学特性,选择不同的单一或复合酶制剂。
- 王贝王俊丽闫潇张建新侯彩霞聂国兴
- 关键词：同工酶酶解产物TLC
- 低聚木糖的制备及其在鲤鱼饲料中的应用研究
- 聂国兴王俊丽明红马金友赵海鹏聂鑫琳朱浩拥王贝吴春闫潇冯军厂李元龙徐小国尚国胜宋义晖
- 研究内容:1、碱法提取玉米芯木聚糖工艺条件的研究.2、酶法制备玉米芯低聚木糖工艺条件的研究.3、低聚木糖对鲤鱼肠道菌群、肠道形态、免疫力和生长性能的调控.成果创新点:1、该成果建立了简便、操作性较强的碱法提取木聚糖工艺,...
- 关键词：
- 关键词：饲料低聚木糖鲤鱼饲料添加剂
- 鲤肠道sglt1基因的表达与抗体制备被引量：4
- 2012年
- 钠/葡萄糖共转运载体1(sodium/glucose cotransporter 1,Sglt1)是协助葡萄糖吸收的主要蛋白。实验首先采用RT-PCR获取sglt1基因全长,克隆至PGME-T载体进行序列及免疫原性分析,选择长度为92个氨基酸(544～637)的多肽作为目的片段(sglt1-P)),扩增sglt1-P,引入双酶切位点EcoRⅠ和HindⅢ后,连接至pET-32a(+)上,构建表达载体pET-32a(+)-sglt1-P,转化至E.coli Rosetta中,获得重组基因工程菌,通过IPTG诱导表达,获得目标多肽,并以此为抗原制备Sglt1特异性抗体。SDS-PAGE电泳分析表明,目标多肽分子量约为30 ku。采用耳缘静脉结合皮下注射,免疫新西兰长耳兔,免疫总时长为38 d。制备了鲤Sglt1抗体,ELISA测得效价为1∶105;免疫组化结果表明,抗体具有较高亲和力和特异性,可以应用于鲤Sglt1的表达定位研究。该抗体的获得为鲤肠道Sglt1表达及转运活性的系统研究奠定了基础,同时,获取的Sglt1抗体亦可用于其它鱼类Sglt1转运蛋白表达定位和定量研究。
- 聂国兴王贝闫潇侯彩霞张建新张新胜郑俊林王俊丽
- 关键词：原核表达ELISA抗体效价
