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王飞
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1
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供职机构:
中国科学院遗传与发育生物学研究所
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
张云龙
西北农林科技大学
黄华樑
中国科学院遗传与发育生物学研究...
陈毓荃
西北农林科技大学
张众
中国科学院遗传与发育生物学研究...
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张众
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陈毓荃
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张云龙
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王飞
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1篇
2004
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蛋白内含子介导纯化的表达载体的构建及应用
2004年
将抗膀胱癌单链抗体 (PG)融合在蛋白内含子 (intein)的C末端 ,利用intein的N末端具有的chitinbindingdomain(CBD)对几丁质柱的吸附特性及intein的自切割活性对PG进行一次性纯化。同时 ,引入大肠杆菌分子伴侣肽基脯氨酰顺反异构酶 (Fk pA)与目的蛋白进行共表达及融合表达 ,以使目的蛋白以可溶形式存在。结果显示 ,PG融合蛋白对几丁质柱的吸附效率很高 ,in tein的自切割释放PG的效率也较高 ,但PG仅出现在SDS洗脱液中。FkpA与PG共表达能显著地提高目的蛋白的可溶性。Intein介导的纯化系统前景远大。
张云龙
张众
王飞
陈毓荃
黄华樑
关键词:
单链抗体
INTEIN
CBD
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