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耿运琪: 作品数：155 被引量：318H指数：9; 供职机构：南开大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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全基因组SHIV-KB9克隆的构建及其在人、猴外周血单核细胞中的复制(英文)被引量：7: 2004年; 将分别携带SHIV-KB9 (SIV/HIV-1 KB9) 基因组的3′端和5′端的两个半长克隆,体外连接成SHIV-KB9全基因组克隆。含有全长基因的质粒培养时易发生同源重组和缺失,采用JM109作为宿主菌以及30℃、低转速的培养条件,可保持质粒的稳定性。通过PCR , RT-PCR 和猴免疫缺陷病毒(SIV) gag p27 核心抗原滴度检测表明:感染性克隆SHIV-KB9可有效在人、恒河猴及食蟹猴的外周血单核细胞中复制。; 吴颖运洪坤学陈佩陈启明耿运琪邵一鸣; 关键词：克隆基因组质粒恒河猴食蟹猴外周血单核细胞

类泛素修饰蛋白bISG15抗血清在体外修饰系统中的应用(英文)被引量：2: 2008年; ISG15由干扰素刺激基因15编码,是最早被发现的类泛素修饰分子.病毒感染以及干扰素刺激可以强烈诱导其表达.与泛素类似,ISG15可以共价连接到其他蛋白分子上进行修饰,但ISG15及其连接修饰的功能作用还有很多尚未知.最近的研究表明,ISG15及其修饰作用在先天免疫中起着重要的作用.将牛类ISG15基因克隆进入pET28a( +)原核表达载体,并且表达了可溶的融合有His-tag标签的bISG15融合蛋白.使用Ni-NTA葡聚糖进行纯化浓缩.纯化蛋白免疫Balb/c小鼠并获得抗血清.Western印迹实验显示,抗血清可以特异地识别在真核细胞中表达的bISG15 .浓缩的bISG15以及制备的抗血清用于建立bISG15的体外修饰系统.实验证明,使用该系统bISG15可以连接到细胞蛋白上进行修饰.; 刘畅史颖姣宣成昊耿运琪乔文涛

人免疫缺陷病毒跨膜蛋白gp41在大肠杆菌中的表达被引量：8: 2001年; 为研究廉价的 HIV血清学诊断系统 ,实现检测试剂国产化 ,用原核 p ET系统表达 HIV跨膜蛋白 gp41 .研究发现 ,全长及缺失 C端 1 / 3的 gp41在 E.coli中均不能有效表达 .仅保留 N端 1 / 3的 gp41 (包含 gp41主要抗原决定簇 ,5 94～ 61 3氨基酸 )有一定量的表达 ;通过金属螯合层析 ,产物得到部分纯化 ;Western blot显示产物有很好的反应原性 .推测 gp41在 E.coli中较低表达量可能与 m RNA的二级结构有关 .; 陈晨刘坤王金忠马明耿运琪陈启民朱效科夏建晖; 关键词：人免疫缺陷病毒 GP41 跨膜蛋白大肠杆菌免疫学检测艾滋病

牛免疫缺陷病毒(BIV)核心蛋白在大肠杆菌中的表达和鉴定被引量：2: 1993年; 牛免疫缺陷病毒(Bovine immunodeficiency-like virus,BIV)是近年来分离的一株慢病毒,可引起牛的淋巴结病、淋巴细胞增多症、中枢神经系统损伤和进行性消瘦等多种疾病,并可能干扰免疫系统的正常功能。BIV通过接触感染,但不传染人。BIV感染在美国和西欧流行较广,并造成较大的经济损失。; 耿运琪杨丽珠纪永刚陈启民马明孙庆曾毅; 关键词：免疫缺陷病毒核心蛋白

新型哒嗪类衍生物及其制备方法、抗HIV活性和抗TMV活性: 本发明涉及新型哒嗪类化合物I以及它们的制备、抗HIV活性和抗TMV活性。通式I具有很好的抗艾滋病病毒活性和抗烟草花叶病毒活性，能很好地抑制艾滋病病毒(HIV)和烟草花叶病毒(TMV)。<Image file="DSA00...; 汪清民王兹稳李悦谈娟王明晓姚雪乔文涛耿运琪刘玉秀王力钟; 文献传递

感染性嵌合病毒SHIV cDNA的构建及活性筛选: 2004年; 以感染性克隆SHIV-KB9cDNA为主要骨架,将其env基因区域的gp120和部分gp41(从N末端的50到650个氨基酸)的1.7kb片段,用来源于4个不同中国HIV-1B′/C毒株env的相应区域进行替换,构建了50个全基因SHIVcDNA克隆,大规模体外活性筛选实验,获得了能够在人的PBMC中进行生产性复制的SHIV-XJ02170cDNA克隆.; 吴颖运乔文涛陈启民耿运琪邵一鸣; 关键词：CDNA克隆活性筛选

JDVTat反式激活LTR与HIV-1Tat采用类似的细胞因子被引量：2: 2004年; 为分析 JDV Tat 在反式激活 JDV 及 HIV-1 LTR 过程中是否采用与 HIV-1 Tat 类似的细胞因子,本文构建了包含完整激活域的 jTat70 和 hTat47,同时构建了 cyclin T1 和 CDK9 真核表达及反义转译质粒。过量表达 hTat47和 jTat70 对 hTat 反式激活 HIV-1 LTR,jTat 反式激活 JDV 和 HIV-1 LTR 均有明显的抑制作用推测 jTat 和 hTat 的反式激活作用可能涉及类似的细胞因子。通过 cyclin T1 和 CDK9 的反义转译质粒对 jTat 反式激活的抑制作用证实这两种细胞因子参与了 jTat 对 JDV 和 HIV-1 LTR 的反式激活。; 邓刚莎日娜母俊杰乔文涛耿运琪陈启民; 关键词：人免疫缺陷病毒

HIV gp41基因分段低温诱导表达被引量：4: 2004年; Clone N3 and C from Human immunodeficiency virus(HIV) gp41 gene were expressed using the pET expression system. When induced by IPTG at 37℃, both two clones did not express in E.coli BL21(DE)3. Howerver, when induced at 16℃, the two clones were both overexpressed, and the amount of the product was about 20% of the total bacteria protein. In Western blotting test, the protein product could react with HIV-positive serum. After IPTG induction, E. coli cells had much higher death rate at 37℃ than at 16℃; [3H]uridine release assay also showed that after IPTG induction, E. coli had a higher release at 37℃. The results suggested that overexpression of the two proteins was due to their decreased toxicity at lower temperature.; 袁玉华毕昌昊李菊王学谦耿运琪陈启民; 关键词：人类免疫缺陷病毒 HIV 基因毒性

SHIV减毒株在AIDS疫苗研究中的应用被引量：2: 2004年; 吴颖运洪坤学耿运琪邵一鸣; 关键词：SHIV 减毒株疫苗获得性免疫缺陷综合症人免疫缺陷病毒 HIV-1

牛泡沫病毒中国株BFV3026 bet基因转录本的确定: 泡沫病毒属于反转录病毒科泡沫病毒亚科泡沫病毒属,具有广泛的宿主范围却至今未发现其致病性。泡沫病毒基因组在env与3’LTR之间有2个重叠的读码框(ORF-1和ORF-2)编码非结构蛋白,研究已证明ORF-1编码病毒的反式...; 吴凯韩英谈娟耿运琪陈启民乔文涛; 文献传递