胡文发
- 作品数：9 被引量：35H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：河南省教育厅自然科学基金国家重点实验室开放基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- A型口蹄疫病毒真核表达载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达被引量：2
- 2013年
- 为了构建A型口蹄疫重组表达质粒,并鉴定其在BHK-21细胞中的表达效果及免疫活性,通过设计引物及酶切位点,获得A型口蹄疫毒株AF/72的P1,2A及3C编码区的目的基因片段,利用设计的BamHⅠ及XbaⅠ酶切位点,定向将片段克隆于真核表达载体pcDNA3.1(+),经筛选、鉴定及序列分析后,将重组阳性质粒pcDNA3.1/P12A3C转染BHK-21细胞,通过双抗体夹心ELISA方法、间接免疫荧光标记方法及电镜透射法,检测细胞中表达的蛋白。结果表明:目的片段正确克隆到pcDNA3.1真核表达载体上,转染BHK-21细胞后,几种方法都能够检测表达蛋白。由此得出结论,构建的A型pcDNA3.1/P12A3C重组质粒能够在BHK-21细胞中正确表达目的蛋白并能组装成病毒空衣壳,表达蛋白具有良好的免疫活性,为进一步研究该质粒的动物免疫试验奠定了基础。
- 胡文发张永光王永录张攀唐华方玉珍蒋守田吕建亮周鹏张中旺刘新生潘丽
- 关键词：口蹄疫病毒BHK-21细胞电镜
- Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒的构建及表达被引量：1
- 2013年
- 为了构建Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒,采用多表位基因串联策略,合成包括口蹄疫病毒T细胞和B细胞表位基因的基因片段F,该基因片段由结构蛋白VP1上的2个B细胞表位(VP1135-159aa、VP1194-211aa)基因、非结构蛋白3A和3D上的T细胞表位(3A21-35aa、3D795-803aa)基因组成。利用限制性内切酶HindⅢ、XbaⅠ将基因片段F克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)。经酶切鉴定、序列分析正确后,利用LipofectamineTM2000将阳性重组质粒pc-F转染至BHK-21细胞。Western-blot和IFA分析结果显示,所表达的蛋白大小约25.4ku,能够与Asia 1型口蹄疫病毒标准兔抗血清发生特异性反应,证实所表达的蛋白具有较好的反应原性。结果表明,Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒pc-F构建成功,且能在BHK-21细胞中正确表达。
- 张攀张永光王永录潘丽胡文发唐华方玉珍蒋守田吕建亮周鹏张中旺刘新生
- 关键词：ASIABHK-21细胞
- 纳米微球介导FMDV抗原鼻内免疫诱导的黏膜免疫应答及抗病毒免疫保护效果
- 为评价鼻黏膜免疫对动物的免疫保护效果，在实验室前期研究的基础上，本实验制备了两种A型口蹄疫纳米微球鼻免疫疫苗：1：吸附壳聚糖海藻糖载FMD灭活抗原纳米微球，即对FMD灭活抗原进行浓缩、纯化，紫外分光光度计检测146S含量...
- 胡文发
- 关键词：黏膜免疫灭活抗原纳米微球
- 文献传递
- 铜钼对小鼠肾脏TNF-α蛋白表达的影响
- 为研究高钼低铜对小鼠肾脏TNF-α蛋白表达的影响,80只雄性昆明种小鼠随机分为四组.通过在饮水中添加不同剂量浓度的钼及铜,建立动物模型.在试验处理第90d时,采样研究高钼低铜对小鼠肾脏组奴病理学及TNF-α的表达的影响....
- 王宏伟周变华张樑张森胡文发杨自军
- 关键词：钼铜小鼠肾脏TNF-Α
- 文献传递
- 结肠小袋纤毛虫体外药物急性毒杀试验被引量：8
- 2009年
- 通过结肠小袋纤毛虫对甲硝唑、氟苯尼考和血虫净(三氮咪)的急性毒性试验,以机率单位法获得半数致死浓度(LC50),结果显示:甲硝唑、氟苯尼考对结肠小袋纤毛虫2 h的半数致死浓度(LC50,2 h)分别是457.8 mg/L,1705 mg/L,12 h的半数致死浓度(LC50,12 h)分别是25.64 mg/L、973.8 mg/L。血虫净(三氮咪)12h和24h半数致死浓度(LC50)分别是331.8 mg/L、295.4 mg/L。甲硝唑是杀灭结肠小袋纤毛虫的理想药物。
- 刘翠邓书民谷伟霞袁远华胡文发王天奇
- 关键词：结肠小袋纤毛虫
- RPMI 1640体外培养结肠小袋纤毛虫的正交试验被引量：2
- 2010年
- 利用L9(34)正交试验,研究了淀粉量、小牛血清比例和初始pH值3个因素对结肠小袋纤毛虫在RPMI 1640培养基中最高种群密度的影响。方差分析结果表明,初始pH值对最高种群密度影响最大,其次为小牛血清比例,淀粉量影响最小。最佳培养基组成为淀粉40mg/瓶、血清25%(RPMI 1640培养液2.25mL+小牛血清0.75mL);最适宜的RPMI 1640培养液初始pH值为7.0。
- 刘翠谷伟霞邓书民袁远华胡文发闫文朝王天奇
- 关键词：结肠小袋纤毛虫正交试验RPMI
- 铜钼对小鼠肾脏TNF-α蛋白表达的影响
- 为研究高钼低铜对小鼠肾脏TNF-α蛋白表达的影响，80只雄性昆明种小鼠随机分为四组.通过在饮水中添加不同剂量浓度的钼及铜，建立动物模型.在试验处理第90d时，采样研究高钼低铜对小鼠肾脏组织病理学及TNF—α的表达的影响。...
- 王宏伟周变华张樑张森胡文发杨自军
- 关键词：肾脏组织TNF-Α蛋白表达
- 文献传递
- 高钼低铜对小鼠肾脏结构及其表达TNF-α蛋白的影响被引量：15
- 2010年
- 为研究高钼低铜对小鼠肾脏结构及TNF-α蛋白表达的影响,选用80只雄性昆明种小鼠随机分为4组,在饮水中添加不同浓度的钼(600 mg/L)及铜(3mg/L),建立动物模型。在试验处理第90天时采样,研究高钼低铜对小鼠肾脏组织病理学及TNF-α表达的影响。结果显示,高钼组小鼠肾脏组织肾小体聚集,部分肾小球发生萎缩,间质中有大量炎性细胞浸润,有新月体出现。与对照组相比,高钼组肾脏TNF-α蛋白表达量上升15.60%(P<0.01);与低铜组相比,高钼低铜组肾脏TNF-α蛋白表达量上升24.60%(P<0.01);与高钼组相比,高钼低铜组肾脏TNF-α蛋白表达量上升7.14%(P<0.05)。表明高剂量钼导致肾脏发生明显的病理组织学损伤,显著提高了小鼠肾脏TNF-α的表达,低铜加剧了钼的毒性作用。
- 王宏伟周变华张樑张森胡文发杨自军
- 关键词：钼铜小鼠肾脏TNF-Α
- 口蹄疫病毒免疫学研究进展被引量：8
- 2013年
- 口蹄疫是偶蹄动物所患的一种顽固的急性、热性、高度接触性传染病,国际兽疫局(OIE)将其列为通报疫病。一旦暴发,经济损失巨大,影响恶劣。本文从口蹄疫病毒的主要抗原位点、口蹄疫病毒的细胞受体、口蹄疫病毒的免疫机理以及口蹄疫疫苗发展现状等几个方面做一综述。
- 胡文发潘丽张永光
- 关键词：口蹄疫病毒抗原位点细胞受体免疫机理口蹄疫疫苗
