董悦
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 骨髓干细胞诱导形成的内皮细胞在体内外环境中的稳定性被引量：1
- 2009年
- 采用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的CD34(FITC-CD34)、免疫细胞化学及透射电镜鉴定血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)诱导Sprague-Dawley(SD)大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)分化形成的内皮细胞(诱导组)。应用三维脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)支架组织,接种诱导形成的内皮细胞,种植于SD大鼠体内生长14天。同时采用不含VEGF的DMEM(DMEM组)和EGM-2培养基(EGM-2组),体外培养诱导形成的内皮细胞14天,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA)检测各组细胞上清液中内皮素(endothelin-1,ET-1)和Ⅷ因子相关抗原(Ⅷfactor related antigen,F-ⅧAg)含量,进行统计学处理。实验结果表明,VEGF诱导BM-MSCs培养14天,细胞呈"铺路石"样排列,FITC-CD34呈现绿色荧光,免疫细胞化学抗CD3l和CD34表达阳性,细胞质中含Weibel-Palade小体,具有内皮细胞的特征。在SD大鼠体内生长7天和14天,内皮细胞保留其特征,对抗CD31和CD34表达阳性。内皮细胞在体外不含VEGF的DMEM培养基和EGM-2培养基中各培养14天后,细胞回复到诱导前状态,FITC-CD34反应阴性。ELISA检测DMEM组和EGM-2组中ET-1和F-ⅧAg含量明显低于诱导组(P<0.05)。研究结果显示,BM-MSCs诱导形成的内皮细胞,在体内环境中生存能保留其特征;但在缺乏VEGF诱导的体外培养基中生长,不能维持其特征。
- 董悦张雷邵素霞尹青陈炜赵春芳
- 关键词：骨髓干细胞内皮细胞血管内皮生长因子
- 在关节镜手术中应用极内侧入路治疗膝关节外侧半月板前角损伤的疗效分析
- 董悦
- 缺血心脏成纤维细胞构建工程化心肌样组织的研究被引量：2
- 2010年
- 采用5μmol/L 5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)诱导Wistar大鼠缺血心脏成纤维细胞(fibroblasts of ischemia myocardium,FIMs)分化为心肌样细胞,利用抗心肌特异性肌钙蛋白(cardiacTroponin T,C-TnT)和抗α-横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin,α-SA)间接免疫荧光标记,透射电镜以及Real-time PCR检测血管紧张素原(angiotensinogen,AGT)和脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)mRNA含量,鉴定诱导分化的心肌样细胞。采用扫描电镜鉴定两种不同支架组织(脱细胞大肠肌膜和脱细胞胶原膜),将心肌样细胞分别接种于两种支架组织上生长5～7天,利用抗C-TnT,α-SA间接免疫荧光和扫描电镜,观察工程化心肌样组织生长情况。结果发现,诱导分化的心肌样细胞胞质内含有丰富的肌微丝,对抗C-TnT和α-SA间接免疫荧光标记反应阳性,Real-time PCR检测显示心肌样细胞内AGT和BNP mRNA表达明显高于对照组FIMs,差别有显著性(P<0.05)。在两种不同支架组织上生长,心肌样细胞呈多边形有突起或柱状分支状片状平铺排列,对抗C-TnT和α-SA反应阳性,细胞胞浆内可见肌微丝。研究表明,FIMs能诱导分化为心肌样细胞,在不同支架组织上生长,构建工程化心肌样组织。
- 董悦张雷邵素霞尹青陈炜赵春芳
- 关键词：成纤维细胞心肌样细胞
