袁婺洲
- 作品数：119 被引量：244H指数：7
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家精品课程建设项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 基因工程精品资源共享课程建设的实践与体会
- 湖南师范大学《基因工程》本科生课程于2008年及2009年分别获得湖南省及国家精品课程建设立项,2012年通过精品课程建设复核,2013年获得国家级精品资源共享课建设立项。课程建设过程中,编写出版了《基因工程》教材一本,...
- 袁婺洲
- 关键词：基因工程课程建设
- 文献传递
- 果蝇血液发育标记基因Dox-A3多克隆抗体的制备
- 2012年
- 从野生型成体果蝇体内提取总RNA,以cDNA作为模板进行PCR扩增,获取Dox-A3部分基因片段,将这片段连接于原核表达载体pET-28a上,成功构建重组质粒pET-28a-Dox-A3.将重组质粒转化大肠杆菌菌株Rosetta,用ITPG诱导表达出融合蛋白,然后将经Ni-IDA凝胶柱纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备Dox-A3多克隆抗体,通过Western-Blot检测效价和特异性.结果表明,实验获得了高质量的多克隆抗体.
- 苏勇蔡哲彦江志钢袁婺洲吴秀山
- 关键词：果蝇原核表达多克隆抗体
- 斑马鱼心脏发育标记基因Wnt11的多克隆抗体制备被引量：1
- 2011年
- Wnt11为Wnt家族的成员,是参与Wnt信号途径调控的转录因子,对心脏的正常发育起着非常重要的作用.根据已报道的Wnt11基因序列,通过RT-PCR从斑马鱼心脏组织中得到Wnt11部分编码区序列,将其连接到pGEX-4T-1原核表达载体上.经酶切及测序鉴定后,质粒构建成功,将重组质粒(pGEX-4T-Wnt11)转化E.coli BL2l,通过IPTG诱导表达出融合蛋白,采用谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化.将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体的效价和特异性.结果显示,获得了Wnt11原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗Wnt11多克隆抗体,为Wnt11功能的进一步研究奠定了基础.
- 雷孝锋江志钢李志王华万永奇袁婺洲吴秀山
- 关键词：融合蛋白斑马鱼多克隆抗体
- 果蝇心脏发育标记基因lbe的多克隆抗体制备
- 2012年
- lbe是已经证明的心脏标记基因。为了深入研究lbe在心脏发育中的功能,需要获得lbe蛋白并制备其抗体。首先提取野生型成体果蝇的总RNA,反转录获得其cDNA文库,通过PCR克隆出lbe编码区序列,将其连接到pET-28a原核表达载体上。经酶切及测序鉴定后,质粒构建成功。将重组质粒(pET-28a-lbe)转化大肠杆菌菌株Rosseta,用IPTG诱导表达出融合蛋白,经Ni-IDA凝胶柱纯化后,最后将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备lbe多克隆抗体,并用Western blotting检测抗体的效价和特异性。结果显示获得了lbe原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗lbe多克隆抗体,为lbe功能的进一步研究奠定了基础。
- 徐腊梅朱玲刘腾吴秀山邓云袁婺洲
- 关键词：果蝇融合蛋白多克隆抗体
- RNAi机制研究的最新进展被引量：12
- 2003年
- RNAi即RNA干涉,是近几年才发现的一种由双链RNA引起的基因沉默的现象.从无脊椎动物到脊椎动物,从低等真菌到高等植物都普遍存在RNAi.RNAi的机制也成为人们关注的焦点,出现了许多有关RNAi机制的报道.从基因组甲基化,转录后水平以及转译水平三个层次对近两年来关于RNAi机制研究的最新进展结合我们的工作作一较为详细的综述.
- 袁婺洲吴秀山
- 关键词：RNAI基因沉默
- 心脏高表达基因ZNF425在肺癌中功能的探究被引量：1
- 2020年
- 为研究ZNF425与肺癌之间的关系,先利用生物信息学的方法研究ZNF425与肺癌的相关性。基于癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)数据库、癌症和正常基因表达谱公共数据库(GEPIA)中ZNF425与肺癌两种亚型肺腺癌(LUAD)和肺鳞状细胞癌(LUSC)的数据进行后期运算分析,发现在癌组织中ZNF425表达降低,这种现象在肺癌Ⅲ期尤为明显。同时数据显示ZNF425高表达患者生存率更高。再利用人类肺癌样本免疫组化证实了生物信息学的分析结果,与癌旁组织相比,Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ期癌症组织中的ZNF425显著下调。最后,构建ZNF425过表达质粒在肺癌A549细胞系瞬时过表达ZNF425后,WB显示A549细胞中的JNK和P38活性受到抑制。因此,推测ZNF425可能具有抑制早中期肺癌的功能,而且这种能力与MAPK信号通路具有相关性。
- 林礼揭雨婷刘凤萍王志宏吴星瑶张雨璐邓璐瑶刘帆肖梓淇丁浩东刘超范雄伟袁婺洲
- 关键词：肺癌MAPK信号通路
- Nulp1基因抑制P19CL6细胞向心肌细胞分化被引量：1
- 2010年
- Nulp1基因是已克隆的一个新的bHLH转录因子亚家族成员。前期的研究表明:Nulp1蛋白作为一个转录抑制子对SRF信号途径有极强的抑制作用。为了进一步研究Nulp1基因在心肌分化中的作用,在能够高效分化为心肌细胞的P19CL6细胞系中过表达Nulp1基因,发现心肌分化标志基因的表达被抑制;用RNA干扰技术,使Nulp1基因在P19CL6细胞系中的内源表达降低,发现心肌分化标志基因的表达提高,说明Nulp1基因能够抑制P19CL6细胞系向心肌细胞的分化。
- 刘仕杰梁洁宋怀婷邓云莫小阳万永奇李永青袁婺洲江志钢吴秀山王跃群
- 关键词：心肌分化RNA干扰
- 果蝇Bves蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备
- 2013年
- 目的为了进一步研究细胞粘附分子Bves在肿瘤的发生及转移过程中的作用,需要获得Bves蛋白并制备其抗体。方法根据Flybase网站所提供的Bves基因序列,以果蝇的总RNA为模板进行PCR扩增,得到Bves部分编码序列,随后将其连接到pET-28a载体上获得原核表达载体。重组表达质粒经酶切测序鉴定后,转化入大肠杆菌BL21感受态细胞中,并用IPTG诱导融合蛋白的表达,使用活化的Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,将纯化后得到的His-Bves融合蛋白免疫注射新西兰大白兔制备Bves多克隆抗体,并用Western blot对抗体效价进行检测。结果和结论获得了Bves原核表达重组融合蛋白及高效价的兔抗Bves多克隆抗体,为后期深入研究Bves基因的功能奠定了基础。
- 彭佩莹赵阳王静周英郝建军曾群陈思行任恋戴悦袁婺洲吴秀山邓云戴国
- 关键词：果蝇融合蛋白多克隆抗体
- 影响果蝇心脏发育的基因突变被引量：1
- 2001年
- 最近的研究表明，果蝇与脊椎动物及人的心脏早期发育具有极为相似的基因控制机理，果蝇已成为研究人体心脏早期发育基因控制的理想模式动物。利用化学诱变剂甲磷酸乙酯大规模地诱变影响果蝇心脏发育的基因，利用心脏特异性抗体染色进行筛选，获得了１１２个有心脏突变表型的致死系，其中３２个致死系的心脏畸变表型有别于目前已知心脏发育基因的突变表型。细胞遗传学定位研究表明在多线染色体的１３个带纹区内的某些隐性致死突变基因是目前未知的，其功能可能与心脏发育有关的基因。
- 李冬玲戴琦袁婺洲吴秀山李敏
- 关键词：果蝇心脏发育基因突变抗体筛选
- 可诱导表达Mesp1的慢病毒载体构建及P19细胞稳定表达系的建立
- 2014年
- Mesp1属于b HLH转录因子家族,对早期心脏中胚层的形成十分重要。为研究Mesp1在心脏发育过程中的功能,本文构建了可诱导表达Mesp1的慢病毒载体,转染进P19细胞,经嘌呤霉素筛选并扩大培养后,成功建立起经强力霉素诱导后可稳定过表达Mesp1基因的细胞系P19-Mesp1,为研究Mesp1心脏发育相关功能提供有用的细胞研究模型。
- 宋文高建芳陈辉邓云李永青袁婺洲吴秀山戴国王跃群
- 关键词：强力霉素P19稳定细胞系
