谢莉 作品数:16 被引量:76 H指数:5 供职机构: 河北省科学院 更多>> 发文基金: 河北省科技攻关计划 河北省教育厅自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 生物学 医药卫生 更多>>
一种快速免疫检测牛奶中β-内酰胺酶的方法 本发明提供了一种快速免疫检测牛奶中β-内酰胺酶的方法,属于免疫检测技术领域。其特征在于利用包被于酶标板上的鼠抗β-内酰胺酶单克隆抗体,与兔抗β-内酰胺酶多克隆抗体和辣根过氧化物酶标记羊抗兔抗体组成三抗体夹心法试剂,进行三... 闫静辉 张小兵 吴萌 李春生 邸禄芹 齐颖颖 李君华 高志肖 陈英珠 程华 董超 李亚璞 谢莉 时玮文献传递 醇醛脱氢酶的分离纯化及其基因文库的构建和筛选 被引量:1 2007年 在维生素C的发酵生产过程中,普通生酮基古龙酸菌S2(Ketogulonigenium vulgare)能产生醇醛脱氢酶,将L-山梨糖转化为VC的前体2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)。通过超声波破碎菌体、硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析,QSepharose High Performance柱层析等过程,从普通生酮基古龙酸菌S2发酵液中分离纯化了醇醛脱氢酶,并用该纯化酶免疫新西兰兔制备出了合格抗血清。同时,普通生酮基古龙酸菌S2基因组DNA经Sau3AⅠ部分酶切后,与黏粒载体pKC505连接,用包装蛋白进行包装,转染大肠杆菌DH5浕,构建了基因组文库。最后应用免疫酶斑点技术(Dot-ELISA)从12000个克隆子中筛选得到一个阳性克隆K719#。通过检测该基因工程菌的活性,表明K719#具有使L-山梨糖转化为2-KLG的功能,从而使醇醛脱氢酶在大肠杆菌中获得了高效表达,这为简化VC的生产工艺奠定了基础。 谢莉 张铎 窦燕峰 张丽萍 赵宝华关键词:分离纯化 文库筛选 番茄内生拮抗放线菌的分离鉴定 被引量:2 2009年 采用组织分离法从健康番茄植株体内分离出253个内生放线菌菌株,采用平板对峙法筛选出对番茄灰霉病拮抗作用强而且性能稳定的菌株NO.37。通过形态特征观察、生理生化特性测定以及16S rDNA序列分析,鉴定NO.37为金色链霉菌(Streptomyces aureus)。 辛春艳 张丽萍 程辉彩 谢莉 张根伟 籍宝霞 李书生关键词:番茄 灰霉病 内生放线菌 金色链霉菌 梨黑斑病拮抗放线菌的选育及其抗菌物质研究 梨黑斑病是一类危害严重的世界性气传真菌病害,它的有效防治已经成为鸭梨生产和贮存中有待解决的难题。本研究从生物防治的角度出发,分离筛选梨黑斑病菌拮抗放线菌株,通过诱变育种提高其生产性能,并对突变株产生的抗菌物质及生防效果进... 谢莉关键词:梨黑斑病 拮抗放线菌 抗菌物质 文献传递 棉花黄萎病拮抗内生菌的筛选鉴定及抗菌物质研究 被引量:22 2008年 从棉株中分离筛选到一株对棉花黄萎病菌具有较强拮抗作用的内生细菌BSD-2.通过形态特征、生理生化特性以及16S rDNA碱基序列测定和同源性分析,鉴定其为枯草芽孢杆菌.平板对峙试验表明,BSD-2对多种植物病原真菌有抑制作用.BSD-2培养液以50%硫酸铵沉淀所得的拮抗物粗提液,具有良好的热稳定性和酸碱稳定性,对胰蛋白酶、蛋白酶K和胃蛋白酶均不敏感,对氯仿敏感,能够有效抑制黄萎病菌孢子萌发. 张铎 谢莉 张蕾 张丽萍 赵宝华关键词:棉花黄萎病 枯草芽孢杆菌 抗菌蛋白 一种快速免疫检测牛奶中β-内酰胺酶的方法 本发明提供了一种快速免疫检测牛奶中β-内酰胺酶的方法,属于免疫检测技术领域。其特征在于利用包被于酶标板上的鼠抗β-内酰胺酶单克隆抗体,与兔抗β-内酰胺酶多克隆抗体和辣根过氧化物酶标记羊抗兔抗体组成三抗体夹心法试剂,进行三... 闫静辉 张小兵 吴萌 李春生 邸禄芹 齐颖颖 李君华 高志肖 陈英珠 程华 董超 李亚璞 谢莉 时玮牛奶中抗生素残留检测试剂盒的研制及应用 被引量:6 2010年 对嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢的生成、营养基质、各成分添加比例等条件进行了研究,研制出检测牛奶中抗生素残留的96孔板试剂盒。此试剂盒对牛奶中青霉素G的检测极限为3ng/mL,阿莫西林的检测极限为4ng/mL,头孢匹林的检测极限为8ng/mL。同一批奶样检测结果证明,此试剂盒与西班牙ZEU-INMUNOTEC公司同类试剂盒产品质量相当,灵敏度高于国标TTC法,适于推广应用。 谢莉 程华 董超 李志平 朱俊平 闫静辉关键词:抗生素残留 牛奶 嗜热脂肪芽孢杆菌 普通生酮基古龙酸菌S_2基因文库的构建和筛选 2008年 在Vc生产的第2步发酵中,普通生酮基古龙酸菌S2能利用醇醛脱氢酶,将L-山梨糖转化为Vc的前体2-酮基-L-古龙酸(2-KLG).对普通生酮基古龙酸菌S2基因组DNA进行部分酶切,与黏粒载体pKC505连接后,用包装蛋白进行包装,转染大肠杆菌DH5α,构建成普通生酮基古龙酸菌S2基因组文库,得到12 000余个转化子.再利用纯化的醇醛脱氢酶免疫家兔制备出合格抗血清,应用免疫酶斑点技术(Dot-ELISA)对文库进行筛选,获得1个阳性克隆K719#.通过检测此基因工程菌的活性,表明在添加辅酶PQQ后,K719#具有使L-山梨糖转化为2-KLG的功能,从而使醇醛脱氢酶在大肠杆菌中得到了表达,这为简化Vc的生产工艺奠定了基础. 谢莉 窦燕峰 张铎 张丽萍 赵宝华关键词:文库筛选 乳及乳制品中β-内酰胺酶标准化检测技术研究-免疫快速检测方法研究 张小兵 吴萌 李春生 邸禄芹 齐颖颖 李君华 霍惠玲 刘松雁 高志肖 李亚璞 陈英珠 程华 董超 谢莉 时玮 闫静辉 该项目研制并制备出鼠抗β-内酰胺酶单克隆抗体,效价高达1:1310万;亲和力高达1×1010L/mol。研制并制备出兔抗β-内酰胺酶多克隆抗体。效价高达1:655万。研制出鼠抗β-内酰胺酶单克隆抗体三夹心检测方法,实现了...关键词:关键词:乳制品 Β-内酰胺酶检测 重组醇醛脱氢酶的分离纯化及性质研究 2007年 基因工程菌Y517#能表达醇醛脱氢酶,将L-山梨糖转化为VC的前体2-酮基-古龙酸(2-KGA)。通过超声波破碎菌体、硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose FastFlow阴离子交换层析,Q Sepharose High Performance柱层析等过程,从Y517#发酵液中分离纯化了重组醇醛脱氢酶,纯化倍数为11倍。研究发现,该酶分子量为66kD,最适作用温度为40℃,对热不稳定,在60℃下保温10min酶活力完全丧失。最适pH值为7.0,pH稳定范围为6.0~9.0。 谢莉 张铎 郭会灿 张丽萍 李曼 赵宝华关键词:基因工程菌 分离纯化 酶学性质