谭彬
- 作品数：20 被引量：36H指数：5
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金高等学校学科创新引智计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学电子电信更多>>
- 胰岛素生长因子-1(IGF-1)通过PI3K/Akt通路抑制骨髓间充质干细胞(BMSCs)凋亡被引量：8
- 2018年
- 该研究通过构建高表达胰岛素生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)的异常微环境模型探讨IGF-1对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)凋亡的影响及可能的作用机制,为BMSCs作为载体在靶向治疗肿瘤过程中的安全应用提供前期实验基础。取分离纯化的大鼠BMSCs,用流式细胞术鉴定BMSCs表面标志,将实验分为4组:BMSCs空白对照组、IGF-1刺激组、IGF-1+LY294002阻断剂组和IGF-1+MK2206阻断剂组。加药处理2周后,CCK-8法检测细胞增殖能力;Hoechst 33342染色观察细胞核形态及凋亡比例;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞线粒体膜电位变化;RT-qPCR检测细胞Akt、Bad、Bcl-xl、c-Myc、STAT3的m RNA水平;Western blot检测细胞Akt、p-Akt、Bad、p-Bad、Bcl-xl、c-Myc、STAT3、p-STAT3的蛋白水平。结果显示:IGF-1刺激组细胞与BMSCs空白对照组比较增殖率升高,凋亡率减低;IGF-1刺激组Bad、Bcl-xl、cMyc、STAT3的mRNA的表达均显著高于BMSCs空白对照组(P<0.05);IGF-1刺激组p-Akt、Bad、p-Bad、Bcl-xl、c-Myc、STAT3、p-STAT3的蛋白表达水平显著高于BMSCs空白对照组(P<0.05)。而阻断剂组细胞(IGF-1+LY294002阻断剂组、IGF-1+MK2206阻断剂组)与IGF-1刺激组比较增殖率均降低,凋亡率增高,相关分子m RNA和蛋白表达水平均明显降低。以上结果表明,IGF-1能通过活化PI3K/Akt通路,激活下游增殖和凋亡相关分子,从而促进BMSCs增殖,抑制BMSCs凋亡。
- 黎鑫朱静田杰谭彬崔向荣向中平
- 关键词：骨髓间充质干细胞IGF-1P-AKT凋亡
- microRNA 26b-5p靶向下调p300对人脐带间充质干细胞的增殖作用
- 2015年
- 目的探讨潜在microRNA靶向下调p300表达水平对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)增殖的影响。方法通过双荧光素酶报告基因(Firefly/Renilla Luciferase)系统筛选出作用于p300 3'UTR的目标microRNA,mimic转染UC-MSCs后RT-q PCR检测miRNA表达水平的变化,Western blot检测p300蛋白水平变化,RT-q PCR和Western blot检测多潜能转录因子表达水平的变化,MTT法检测UC-MSCs增殖能力的变化,并比较克隆形成能力的差异。结果证实mir 26b-5p通过不完全互补配对结合p300的3'UTR区,显著降低了荧光素酶的相对活性(P<0.05);mir 26b-5p mimic转染后抑制p300蛋白表达水平(P<0.05),并下调Nanog基因和蛋白表达水平(P<0.05);mir 26b-5p mimic转染后UC-MSCs的增殖受到抑制(P<0.05),克隆形成能力下降(P<0.05)。结论 UC-MSCs高表达mir 26b-5p能够显著抑制p300蛋白表达和干性相关基因Nanog的表达,并且抑制UC-MSCs的增殖能力和克隆形成能力。
- 李娅莎杨珂朱静毕杨谭彬田鹤锋易勤钟海英
- 关键词：人脐带间充质干细胞NANOG
- ACK1在子痫前期孕妇胎盘中的表达及其对滋养细胞侵袭功能的调控被引量：6
- 2019年
- 目的:研究活化的Cdc42结合激酶(activated Cdc42 associated kinase,ACK1)在正常足月孕妇胎盘与子痫前期(preeclampsia,PE)孕妇胎盘组织中的表达差异及其对滋养细胞功能的调控作用,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法:收集2015年10月至2016年10月在重庆医科大学附属第一院产科行计划性剖宫产手术的23例正常足月孕妇胎盘和23例PE孕妇胎盘组织,使用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测胎盘组织中ACK1的表达及差异情况。滋养细胞株(HTR8/SVneo)分为3组:常氧对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)及ACK1基因序列慢病毒敲降组(ACK1 shRNA组),使用Transwell实验分析检测各组细胞的侵袭情况,采用流式细胞仪检测各处理组细胞凋亡率。使用Western blot检测各组细胞中ACK1蛋白,金属蛋白质酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9及其特异性抑制因子(the tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP)-2的蛋白表达差异。结果:与正常足月孕妇胎盘比较,ACK1在人类子痫前期胎盘中表达明显降低(t=3.890,P=0.018)。细胞学实验中,与N组比较,ACK1 shRNA组和H/R组ACK1蛋白表达明显降低(t=12.260,P=0.000;t=10.740,P=0.000),ACK1 shRNA组和H/R组MMP9蛋白表达均明显降低(t=8.071,P=0.000;t=7.745,P=0.001),TIMP1蛋白表达显著升高(t=10.690,P=0.000;t=14.330,P=0.000)。ACK1 shRNA组和H/R组细胞迁移至下室的细胞数明显减少(t=12.260,P=0.000;t=11.320,P=0.000),H/R组细胞凋亡率显著升高(t=2.260,P=0.000),但ACK1 shRNA组细凋亡率无明显改变(t=8.317,P=0.088)。结论:ACK1的表达下调可抑制滋养细胞的侵袭,可能在子痫前期发病机制中有重要的作用。
- 刘洋铭车平袁雨谭彬王平珍漆洪波单楠
- 关键词：子痫前期
- 人偏肺病毒胞吞入胞时间的研究
- 2018年
- 病毒入胞是病毒入侵的第一步。本研究前期已经率先发现人偏肺病毒存在胞吞的入胞方式。病毒的胞吞过程需要经历粘附,胞吞体和膜融合的过程。病毒入胞是病毒感染的第一个关键步骤,因此如果可以找到人偏肺病毒病毒胞吞入胞发生的关键时间段,不仅对于其入胞机制的研究,还有抗病毒策略的设计都大有帮助。本研究在研究前期基础上,通过全内反射荧光显微技术、激光共聚焦技术、R18/DiOC双波长成像技术等形态学的观测方式建立了一套观测病毒入胞时间段的方法。通过这套方法发现人偏肺病毒入胞的时间主要集中在感染后的前15 min。为了进一步验证入胞的关键时间段,本研究利用离心可以增强病毒感染的方法,验证了感染前15 min确实是人偏肺病毒入胞的关键时间段。本研究通过形态学观测的方法并验证发现人偏肺病毒入胞主要发生在感染后的前15 min,因此本研究将为今后人偏肺病毒入胞机制的阐明,抗病毒策略设计等提供关键信息,从而为疫苗和抗病毒药物研发提供理论基础。
- 何浩杨晖谭彬陈素花赵耀
- 关键词：人偏肺病毒
- 妊娠期糖尿病对大鼠雌性子代缺血再灌注后心脏收缩功能的影响及其机制被引量：5
- 2016年
- 目的利用大鼠模型探讨妊娠期糖尿病(GDM)对雌性子代心脏功能的影响及潜在机制。方法雌性野生型SD大鼠在妊娠中期给予腹腔注射链脲佐菌素(35 mg/kg)建立GDM模型(GDM组),另设正常对照组。分娩后,雌性F1子代饲养至24周,期间测定随机血糖、血压和心率,进行葡萄糖耐量试验、胰岛素耐量试验。构建心脏离体缺血再灌注(I/R)模型,Western blotting检测心脏蛋白激酶B(Akt)、腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)信号通路。结果 GDM组雌性F1子代离体I/R后心脏收缩功能显著低于正常对照组(P=0.048 6);Western blotting显示离体I/R后GDM组雌性F1子代大鼠心脏AMPK和ACC磷酸化水平显著低于正常对照组(P=0.005 6)。结论 GDM可引起子代雌性大鼠对心脏I/R损伤不耐受,这可能与其心脏AMPK磷酸化对I/R刺激反应迟钝有关。
- 邹虹姜小雪王寒冰袁雨罗晓芳谭彬张华Philip N Baker童超漆洪波
- 关键词：妊娠期糖尿病子代心脏缺血再灌注
- 过表达CXCR4/CXCR7影响人脐带间充质干细胞迁移和增殖
- 2016年
- 目的探讨SDF-1/CXCR4及SDF-1/CXCR7对人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)迁移和增殖活性的影响。方法用Ad-EASY腺病毒质粒系统分别构建表达CXCR4和CXCR7的重组腺病毒,感染h UC-MSCs后用FCM分别检测细胞膜的CXCR4和CXCR7受体的表达,Transwell法检测细胞迁移,MTT检测h UC-MSCs增殖活性,以及在H2O2诱导细胞毒性作用对细胞存活的影响。结果成功构建表达人源的CXCR4和CXCR7的重组腺病毒,感染后h UC-MSCs细胞膜上的CXCR4/CXCR7受体阳性表达率分别达到93.7%和78.5%(P<0.01),高表达CXCR4和CXCR7均显著增强SDF-1诱导的h UC-MSCs细胞迁移,其中CXCR7效应稍弱;高表达CXCR7而不是CXCR4显著提高SDF-1诱导的h UC-MSCs增殖活性和氧化应激状态下的细胞存活率(P<0.05)。结论 CXCR4/CXCR7均参与介导了SDF-1诱导的h UC-MSCs细胞迁移作用,同时CXCR7还介导了SDF-1诱导的h UC-MSCs增殖和H2O2处理损伤的保护。
- 李娅莎杨珂赵丽谭彬龚梦嘉董世访毕杨
- 关键词：人脐带间充质干细胞细胞迁移细胞增殖
- 人偏肺病毒通过胞吞途径进入宿主细胞
- 杨晖何浩谭彬赵晓东赵耀
- 发动蛋白(dynamin)抑制剂Dyngo-4a在大鼠骨髓间充质干细胞内吞葡聚糖过程中存在脱靶效应被引量：1
- 2023年
- 目的研究发动蛋白(DNM)抑制剂Dyngo-4a在依赖DNM的内吞途径中可能存在的脱靶作用。方法分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)并进行流式细胞术鉴定,将细胞分为抑制剂对照组、Dyngo-4a处理组、转染阴性对照(si-NC)组、DNM2小干扰RNA(si-DNM2)转染组、转染和Dyngo-4a共处理组。反转录PCR和Western blot法验证DNM2基因沉默效率,CCK-8法检测Dyngo-4a处理后细胞活性变化,共聚焦显微镜检测内吞的Dylight649标记的转铁蛋白(transferrin-Dylight649)和四甲基罗丹明标记的葡聚糖(dextran-TMR)阳性的囊泡数量以及平均荧光强度。结果使用小干扰RNA能显著下调BMSC的DNM2的mRNA和蛋白表达,转染组内吞的转铁蛋白囊泡数量与转染阴性对照组比较明显降低,si-DNM2转染组内吞的葡聚糖囊泡数量和平均荧光强度与si-NC组比较变化不明显,转染si-DNM2和Dyngo-4a共处理组与单独si-DNM2转染组比较,Dyngo-4a处理组与抑制剂对照组比较,葡聚糖囊泡数量和平均荧光强度均明显降低。结论Dyngo-4a作为靶向DNM的抑制剂在葡聚糖内吞进BMSC过程中存在脱靶效应。
- 张颖张颖朱静朱静颜亮许皓易勤谭彬
- 关键词：内吞作用葡聚糖
- TNF-α对肿瘤微环境中BMSCs生物学特性的影响被引量：7
- 2018年
- 目的探讨C6脑胶质瘤细胞微环境中肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学特性的影响。方法将BMSCs与C6脑胶质瘤细胞非接触间接共培养7d,将细胞分为BMSCs组、共培养组、共培养+0.5ng/ml TNF-α组及共培养+5ng/mlTNF-α组(在共培养基础上分别加入0.5ng/mlTNF-α及5ng/mlTNF-α)。ELISA分别检测BMSCs、共培养细胞上清中游离TNF-α蛋白的表达情况。采用倒置显微镜观察各组细胞的形态变化;采用CCK8法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell检测细胞迁移能力;采用Real-time PCR检测细胞中c-Myc、CyclinD1mRNA的表达,Westernblotting检测细胞中NF-κB/P65、c-Myc、CyclinD1蛋白的表达。结果共培养细胞上清中游离TNF-α表达水平[(162.45±31.82)pg/ml]明显低于BMSCs细胞上清[(467.90±150.98)pg/ml](P<0.05)。BMSCs组细胞排列整齐,成纤维状生长,共培养+5ng/ml TNF-α组与BMSCs形态较一致,但凋亡细胞增多,而共培养组及共培养+0.5ng/mlTNF-α组细胞形态显著改变。共培养组细胞增殖能力、G2+S期细胞所占比例以及迁移能力均高于BMSCs组(P<0.05),且CyclinD1、c-MycmRNA及蛋白水平表达也高于BMSCs组(P<0.05),而共培养+5ng/mlTNF-α组细胞增殖能力、G2+S期细胞所占比例以及迁移能力均明显低于共培养组、共培养+0.5ng/mlTNF-α组(P<0.05),CyclinD1、c-Myc mRNA及蛋白水平表达明显低于共培养组、共培养+0.5ng/mlTNF-α组(P<0.05)。结论 C6脑胶质瘤微环境使BMSCs产生肿瘤相关生物学特性的改变,且共培养后TNF-α表达降低可能是引发其生物学特性改变的重要因素,加入高浓度的TNF-α对于维持干细胞本身生物学特性的稳定性有重要意义。
- 向中平崔向荣谭彬田杰朱静
- 关键词：骨髓间充质干细胞肿瘤坏死因子-Α生物学特性
- 低氧低糖及血清剥夺联合处理抑制Nrf2信号通路诱发大鼠骨髓间充质干细胞氧化应激和凋亡被引量：1
- 2023年
- 目的探讨低氧低糖血清剥夺(GSDH)处理对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)氧化应激及凋亡的影响。方法在体外对提取纯化后的原代BMSCs利用低氧(1%O_(2))、低糖(1.0 g/L)及血清剥夺联合处理建立BMSCs细胞损伤模型。采用集落形成实验、细胞周期测定以及CCK-8实验检测细胞增殖能力;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力;通过细胞凋亡试剂(AnnexinV-FITC/PI)、线粒体膜电位检测试剂(JC-1)染色和线粒体荧光探针(Mito-Trancker)检测细胞凋亡;细胞活性氧簇(ROS)和钙离子(Fluo-4AM)检测细胞氧化应激水平;Western blotting检测抗氧化应激相关分子谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)等以及核因子红细胞系2相关因子2(Nrf2)信号通路中关键分子的蛋白表达水平。结果大鼠原代BMSCs表面标志物高表达CD29、CD71,低表达CD45、CD34;GSDH处理抑制BMSCs细胞增殖(P<0.05)和迁移(P<0.05),增加ROS和钙离子水平(P<0.05),且抑制抗氧化应激相关分子GPX4等蛋白表达(P<0.01);与空白对照组相比,GSDH处理后BMSCs凋亡显著升高(P<0.05),线粒体膜电位降低(P<0.01),网络化减少(P<0.01)。Nrf2信号通路中Nrf2蛋白及下游关键分子的蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论GSDH处理诱发的BMSCs氧化应激及进一步导致的凋亡损伤与Nrf2信号通路被抑制有关。
- 谢秋敏孙艳婷许皓刘蕙文易勤谭彬田杰朱静
- 关键词：氧化应激骨髓间充质干细胞免疫印迹法
