贺小红
- 作品数：6 被引量：16H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 子宫颈癌细胞中RAR-β基因表达缺陷与其DNA甲基化的关系被引量：8
- 2007年
- 目的观察宫颈癌细胞中 RAR-β基因表达的情况,并探讨 RAR-β基因 DNA 甲基化与RAR-β基因表达缺陷的关系。方法采用 RT-PCR 技术检测宫颈癌细胞系 SiHa、HeLa、C33A 和Caski 细胞中 RAR-β mRNA 的表达,免疫荧光化学染色法及蛋白印迹法检测其 RAR-β蛋白的表达,同时应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)技术检测宫颈癌细胞中 RAR-β基因 DNA 甲基化状态及采用5-脱氧-2′-杂氮胞苷(5-Aza-cdR)处理后 RAR-β基因 DNA 甲基化状态的变化,以及5-Aza-cdR 处理对 RAR-β基因表达缺陷的影响。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定5-Aza-cdR 对细胞增殖的影响。结果 SiHa、HeLa、Caski 和 C33A 细胞中 RAR-β mRNA 的表达水平分别为0.25±0.08、0、0.60±0.19、3.12±0.92,RAR-β蛋白表达水平分别为0.23±0.07、0、0.14±0.05、0.68±0.21。SiHa、HeLa、Caski 细胞中存在 RAR-β基因的表达缺失或低下,而 C33A 细胞中存在 RAR-β基因的表达。MSP 技术检测发现,SiHa、HeLa、Caski 细胞中存在 RAR-β基因 DNA 甲基化,而 C33A 细胞为非甲基化状态。5-Aza-cdR 处理后,SiHa、HeLa、Caski 和 C33A 细胞中 RAR-β mRNA 的表达水平分别为1.82±0.59、2.13±0.62、1.67±0.43、2.95±0.89,RAR-β蛋白表达水平分别为0.69±0.21、0.83±0.29、0.56±0.16、0.64±0.20。5-Aza-cdR 处理前后 SiHa、HeLa、Caski 细胞中 RAR-β mRNA 和蛋白的表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);C33A 细胞中 RAR-β mRNA 和蛋白的表达比较,差异则无统计学意义(P>0.05)。5-Aza-cdR 处理后能抑制宫颈癌细胞的增殖。结论 RAR-β基因的表达缺陷在宫颈癌的发生中起重要作用,RAR-β基因 DNA 异常甲基化是导致该基因表达缺陷的重要原因。
- 高艳萍李敏张颖颖王翰贺小红王泽华
- 关键词：DNA甲基化维甲酸阿扎胞苷基因表达
- 宫颈癌组织中DNA修复基因06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶启动子区过甲基化研究被引量：2
- 2007年
- 目的：研究宫颈癌中06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（06-Methylguanine-DNA Methyltransferase，MGMT）基因甲基化状态及其mRNA的表达，探讨MGMT基因甲基化与其基因表达缺陷的关系。方法：用甲基化特异性PCR（MSP）、半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测4株宫颈癌细胞、15例正常宫颈组织、20例宫颈上皮内瘤变及38例宫颈浸润癌组织中MGMT基因启动子区过甲基化状态及其mRNA的表达，同时分析MGMT基因甲基化与宫颈癌病理分级、临床分期及淋巴转移之间的关系。结果：4株宫颈癌细胞、正常宫颈组织及CINⅠ组织中无MGMT基因甲基化，MGMT甲基化在CINⅡ～CINⅢ组织中占27％，浸润性宫颈癌中占31％。MGMT基因甲基化在不同的病理分级（P=0．263）和临床分期（P=0．342）中差异无显著性，在有无盆腔淋巴结转移上，差异有显著性（Х^2=7．785，P=0．005）。所有MGMT甲基化的癌组织及CIN组织均无MGMT mRNA表达，而所有非MGMT甲基化癌组织、CIN组织和正常宫颈组织均有MGMT mRNA表达。结论：宫颈癌中MGMT基因启动子区异常甲基化是导致此基因表达缺陷的主要原因。
- 高艳萍王泽华李敏张颖颖王翰贺小红
- 关键词：甲基化宫颈肿瘤
- 子宫颈癌发生发展中维甲酸受体-β基因启动子甲基化状态的研究被引量：2
- 2008年
- 目的 研究维甲酸受体-β(RAR-β)基因在子宫颈癌发生、发展中的表达变化,分析其差异表达与甲基化的关系及临床意义.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测四种子宫颈癌细胞株、38例子宫颈浸润癌、30例子宫颈上皮内瘤变组织、10例正常子宫颈组织中RAR-β基因的表达,Western blotting对RAR-β蛋白进行定量检测,分析蛋白水平上的RAR-β表达的变化,并与正常子宫颈组织的RAR-β表达情况进行对照.应用甲基化特异性PCR(MSP)对细胞系和组织的RAR-βDNA进行甲基化分析,同时分析RAR-β基因的表达与子宫颈癌临床病理参数的关系.结果 子宫颈癌细胞系、子宫颈上皮内瘤变组织和子宫颈癌组织中RAR-β基因的表达缺失或下降,并与正常子宫颈组织中的RAR-β表达情况进行对照,差异具有统计学意义(P＜0.05).蛋白的表达检测也得到相同的结果.MSP检测发现3种子宫颈癌细胞株、11例癌组织、1例CIN Ⅰ级、5例CIN Ⅱ～Ⅲ级RAR-β第1外显子甲基化表现,甲基化者RAR-β表达均下降.RAR-β基因甲基化状态在不同的病理分级中差异有统计学意义(P=0.037),在不同的I临床分期(P≈1.000)及有无淋巴转移中差异无统计学意义(P≈1.000).结论 RAR-β基因的表达缺陷在子宫颈癌的发生中起重要作用,而启动子区异常甲基化是导致基因表达缺陷的主要原因.
- 高艳萍李敏张颖颖王翰贺小红王泽华
- 关键词：子宫颈肿瘤维甲酸甲基化
- 人宫颈癌发生中p16INK4A表达缺陷与其外显子甲基化的关系被引量：1
- 2006年
- 目的研究抑癌基因p16I NK4A在宫颈癌发生中的表达变化,分析这种差异表达与甲基化的关系。方法逆转录聚合酶链技术(RT-PCR)检测30例宫颈癌组织标本、48例宫颈上皮内瘤样病变(CI N)组织(CI NⅠ12例、CI NⅡ16例、CI NⅢ20例)中p16I NK4A基因的表达。Western Blot分析P16I NK4A蛋白水平的表达。甲基化特异性的PCR技术(MSP)对p16I NK4A DNA进行甲基化分析。以每例标本相应正常宫颈组织作为对照。结果70%(21/30)宫颈癌组织中p16I NK4A表达下降或缺失,与正常宫颈组织、CI NⅠ和CI NⅡ中的p16I NK4A表达相比,差异具有统计学意义(P<0.05),与CI NⅢ相比差异无统计学意义(P>0.05)。蛋白的表达检测也得到相似的结果。MSP检测发现宫颈癌组织中有9例p16I NK4A外显子甲基化,甲基化率为30%,其中8例年龄小于40岁,提示甲基化易于出现在年轻患者。而CI N组织中仅CI NⅢ发现1例甲基化,说明甲基化随着宫颈病变的发展而增多。分析甲基化与p16I NK4A表达的关系,发现42.86%(9/21)的宫颈癌组织中p16I NK4A表达下降与甲基化有关,甲基化的宫颈癌组织中p16I NK4A表达均下降。结论p16I NK4A作为一种抑癌基因,它的表达缺失或下降在宫颈癌的发生中起重要作用,外显子甲基化是导致其表达缺陷的部分原因。
- 李敏吴素慧贺小红王瀚李晓艳董卫红王泽华
- 关键词：P16INK4A宫颈癌甲基化
- 卵巢上皮性癌组织和细胞中BRCA1基因的DNA甲基化程度与其mRNA和蛋白表达的关系
- 2007年
- 文献报道，90％的家族性卵巢上皮性癌（家庭性卵巢癌，指有家族史的卵巢癌患者）与BRCA1基因突变有关，而BRCA1基因突变仅发生在极少的散发性卵巢癌（指患者的一级和二级亲属中未发现卵巢癌患者）中，但无论是在家族性还是散发性卵巢癌中，约90％的患者其癌组织中的BRCA1 mRNA和蛋白表达水平下降。除基因突变外，引起肿瘤抑制基因失活的另一个机制就是DNA甲基化。
- 贺小红李敏王瀚王泽华
- 关键词：BRCA1基因突变卵巢上皮性癌组织蛋白表达水平
- TMS1/ASC基因启动子甲基化与卵巢癌发生的关系被引量：3
- 2006年
- 目的探讨TMS1/ASC(targetofmethylation-inducedsilencing)基因在卵巢癌细胞株及组织中的甲基化状态及该基因表达在卵巢癌发病机制中的作用。方法选取人卵巢癌细胞株A2780,SKOV3,Angle,CAOV3,OVCAR3,SW626,COC1,以及18例卵巢癌组织和10例正常卵巢组织作为研究对象,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测卵巢癌细胞株以及卵巢癌组织中TMS1/ASC基因启动子区域甲基化的状态,用RT-PCR和WesternBlotting法分别检测其mRNA和蛋白的表达。用去甲基化药物5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理TMS1/ASC甲基化阳性细胞株并分析其mRNA和蛋白的表达的变化。结果4株卵巢癌细胞(A2780,SKOV3,Angle,SW626)和7例卵巢癌组织中检测出TMS1/ASC基因的异常甲基化。发生甲基化的细胞株TMS1/ASC基因的mRNA和蛋白表达较未发生甲基化的细胞株明显下降。10例正常卵巢组织中均未发现TMS1/ASC甲基化,差异有统计学意义(P<0·05)。用去甲基化药物5-Aza-CdR处理TMS1/ASC甲基化阳性细胞株SKOV3后,该细胞株中TMS1/ASC基因恢复表达。结论卵巢癌中存在TMS1/ASC基因甲基化,这可能是导致该基因沉默的重要原因,并在卵巢癌的发病机制中起作用。
- 王瀚李敏贺小红王泽华
- 关键词：卵巢肿瘤甲基化
