赵宁
- 作品数：14 被引量：53H指数：4
- 供职机构：东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划国家基础科学人才培养基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学医药卫生农业科学更多>>
- 乳中主要致病菌分子生物学快速检测技术
- 姜毓君张英华赵宁崔英俊郭鸰王喜波张莉刘伟李一松吕琦毕宇涵
- 课题来源和背景：“乳中主要致病菌分子生物学快速检测技术”为黑龙江省青年科学技术专向资金项目（项目编号：QC05C55），起止年限为2005年1月至2007年12月，目前已经按照合同要求提前完成了预期目标。本项目是针对原料...
- 关键词：
- 关键词：致病菌牛乳
- 应用于转基因食品检测的PCR技术及其进展被引量：9
- 2007年
- 近几年全球转基因作物种植面积连年大幅度增加,随之产生的转基因食品更是琳琅满目,然而在转基因食品安全性尚无定论情况下,转基因食品的检测技术便显得尤为重要。在转基因食品检测中,PCR技术由于具有快速、灵敏、准确等一系列优点,从而得到了迅猛发展。本文介绍了转基因食品检测中使用的各种PCR技术,并根据它们各自的原理对其优缺点进行了比较和探讨,同时阐述了检测过程中应该注意的一些问题。此外,一些新技术与PCR的结合,对PCR技术的完善和发展提供了有力的支持,并在转基因食品检测中取得了良好的效果。
- 孙大庆闫冰赵宁姜毓君
- 关键词：转基因食品PCR靶序列
- 米尔贝逆转耐阿霉素人乳腺癌细胞多药耐药的作用被引量：1
- 2013年
- 目的探寻米尔贝类化合物尼莫克汀、米尔贝β1逆转人乳腺癌多药耐药细胞株(MCF-7/adr)多药耐药(multidrug resistance,MDR)的作用及机制。方法采用MTT比色法测定细胞生长抑制率及耐药指数;高效液相色谱(HPLC)检测细胞内阿霉素(ADR)的积累变化;荧光分光光度仪检测罗丹明123(Rh123)在肿瘤细胞内的积累;通过RT-PCR与流式细胞仪检测MDR1基因与P-糖蛋白(P-gp)表达的变化。结果 5μmol·L-1的尼莫克汀、米尔贝β1可明显增强MCF-7/adr对ADR的敏感性,增加细胞内ADR及Rh123的积累,且呈剂量依赖关系,不同程度降低MDR1和P-gp的表达。结论尼莫克汀、米尔贝β1对MCF-7/adr的耐药有一定的逆转作用,且尼莫克汀效果好于米尔贝β1。
- 高爱丽梁洪生王兆强刘帅王晴赵宁
- 关键词：多药耐药P-糖蛋白人乳腺癌阿霉素
- 食品级木聚糖酶黑曲霉工程菌的构建被引量：19
- 2013年
- 从黑曲霉CICC2462中扩增得到木聚糖酶基因xynB的成熟肽编码序列(746 bp),并针对黑曲霉CICC2462中高表达的糖化酶基因位点,通过重叠延伸PCR将xynB基因片段与糖化酶基因的5'同源臂、3'同源臂进行拼接得到同源重组表达框GBG,将其定向插入表达载体pSZH-CYM中,构建黑曲霉表达载体pSZH-xynB。将载体pSZH-xynB通过冻融法转化农杆菌AGL1,通过农杆菌介导法转化黑曲霉CICC2462菌丝体。经潮霉素筛选和PCR鉴定获得47株重组菌株,并从其中12株中筛选出在糖化酶基因位点发生基因置换的同源重组菌株9株。而后通过连续传代、筛选和PCR检测,获得消除潮霉素基因的纯合的同源重组菌株,获得符合食品级生产要求的工程菌。对工程菌进行发酵培养、酶活性检测和SDS-PAGE分析,表明在糖化酶摇瓶发酵条件下,工程菌培养液上清的木聚糖酶活性高达4 495.8975 U·mL-1。研究结果为生产低木糖苷酶活性的内切木聚糖酶提供新途径,为利用黑曲霉表达系统安全高效地生产其他酶制剂和重组蛋白提供参考。
- 李杰张会张莹莹双宝王多佳赵宁李勇赫福霞
- 关键词：木聚糖酶黑曲霉同源重组根癌农杆菌
- 不同来源Lfcin诱导Jurkat细胞凋亡的对比研究
- 2014年
- 本文以牛乳铁蛋白素LfcinB和人乳铁蛋白素LfcinH为研究对象,研究其通过降低线粒体膜电位抑制Jurkat细胞增殖效果及两者的差异性。采用MTT法检测LfcinB和LfcinH对Jurkat细胞增殖影响;Hoechst33258染色法荧光显微镜观察Jurkat细胞核的变化;运用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术将LfcinB和LfcinH促进Jurkat细胞凋亡的阶段进行区分;JC-1染色激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体膜电位的改变。结果显示:LfcinH和LfcinB对Jurkat细胞有显著的抑制作用(P<0.05),呈剂量依赖性;经LfcinB和LfcinH处理后的Jurkat细胞在荧光显微镜下均可见细胞核皱缩、碎裂呈凋亡特征;激光共聚焦显微镜观察到Jurkat细胞线粒体膜电位下降;流式细胞术检测发现Jurkat细胞经LfcinB和LfcinH处理48 h时主要发生早期凋亡。研究结果表明:Jurkat细胞凋亡的机制可能是通过影响线粒体膜电位导致Jurkat细胞凋亡并抑制细胞增殖;当两者浓度小于250μg/mL时LfcinH对Jurkat细胞抑制效果较强,浓度大于250μg/mL时两者对Jurkat细胞抑制效果相近。
- 赵宁许晓曦王静张艳杰张书义
- 关键词：JURKAT细胞细胞凋亡线粒体膜电位
- 不同来源Lfcin的抗肿瘤、抗炎症及免疫调节作用的对比研究
- 牛乳铁蛋白素(Bovine Lactoferricin，LfcinB)是牛乳中乳铁蛋白在胃蛋白酶酸性环境水解产生的一种活性多肽，人乳铁蛋白素(Human Lactoferricin，LfcinH)是人乳中乳铁蛋白水解产生...
- 赵宁
- 关键词：抗肿瘤活性抗炎症作用免疫调节
- 文献传递
- 不同来源Lfein的抗肿瘤、抗炎症及免疫调节作用的对比研究
- 赵宁
- 多拉菌素对人乳腺癌细胞阿霉素多药耐药性的体外逆转作用被引量：3
- 2014年
- 目的:探寻大环内酯类药物多拉菌素逆转人乳腺癌多药耐药细胞株(MCF-7/adr)多药耐药(multidrug resistance,MDR)的作用及机制。方法:采用MTT比色法测定细胞生长抑制率及逆转倍数;高效液相色谱(HPLC)法检测细胞内阿霉素(ADR)的积累变化;荧光分光光度仪检测罗丹明123(Rh123)在肿瘤细胞内的积累与外排;通过RT-PCR与流式细胞仪检测MDR1基因与P-糖蛋白(P-gp)表达的变化。结果:5μmol·L-1的多拉菌素可明显增强MCF-7/adr对ADR的敏感性,逆转倍数可达28.93,并增强了细胞内ADR及Rh123的积累,呈剂量依赖关系。同时,MDR1及P-gp的表达降低。结论:多拉菌素对MCF-7/adr的耐药有一定的逆转作用,有希望成为肿瘤多药耐药的逆转剂。
- 高爱丽梁洪生史国军刘欢王晴赵宁
- 关键词：多拉菌素多药耐药P-糖蛋白
- 农杆菌介导pepA基因对黑曲霉菌丝体的遗传转化被引量：2
- 2013年
- 通过重叠延伸PCR将宇佐米曲霉中1 347 bp的酸性蛋白酶基因pepA与黑曲霉糖化酶基因5'同源臂和3'同源臂进行拼接,构建pepA基因表达框。将此表达框插入载体pSZH中,构建黑曲霉同源重组表达载体pSZH-pepA。将载体pSZH-pepA通过冻融法转化农杆菌AGL1,进而通过农杆菌介导法转化高产糖化酶的黑曲霉菌丝体。以PDA作为共培养培养基,乙酰丁香酮(简称AS)浓度200μmol.mL-1的条件下,28℃恒温静置培养48 h,经潮霉素筛选和PCR鉴定获得3株重组菌株。以出发菌株作为对照,对3株重组菌株静置培养7 d后的发酵液上清进行酶活测定,结果发现酸性蛋白酶酶活最高达45.56 U.mL-1,而出发菌株的酸性蛋白酶酶活仅为3.72 U.mL-1,表明酸性蛋白酶基因pepA在高产糖化酶的黑曲霉中得到表达。研究建立了农杆菌介导的pepA基因导入黑曲霉菌丝体的转化体系,为实现酸性蛋白酶在黑曲霉菌丝体中高效表达奠定基础。
- 李杰李硕然张谷楠汪天虹钟耀华赵宁
- 关键词：酸性蛋白酶黑曲霉重叠延伸PCR
- 一种同时检测原料乳中多种致病菌的方法
- 一种同时检测原料乳中多种致病菌的方法，它涉及了一种检测原料乳中细菌的方法。本发明解决了现有检测原料乳中致病菌的方法中存在不能同时检测多种致病菌、耗时长、费用高或不适用于检测牛乳的问题。本发明同时检测原料乳中多种致病菌的方...
- 姜毓君满朝新赵宁吕琦赵凤刘伟韩希妍毕宇涵王明娜张光辉相丽闫冰
- 文献传递
