赵干
- 作品数：17 被引量：199H指数：8
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金科技部基础研究重大项目前期研究专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 草原兔尾鼠GST-LZP3融合蛋白的原核表达及其抗体制备被引量：15
- 2004年
- 目的 :在原核中表达并纯化草原兔尾鼠卵透明带 3 (zonapellu cida3 ,ZP3 ) ,并以其作为抗原 ,制备抗ZP3的抗血清。方法 :将LZP3基因的核心片段克隆到原核表达载体pGEX 4T 1中。经酶切和序列分析后 ,用重组质粒转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) ,并经丙基β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导产生GST LZP3融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫新西兰兔制备抗血清。抗血清的效价及特异性采用ELISA和Westernblot检测。结果 :成功地构建GST LZP3融合蛋白表达载体 ,并在大肠杆菌中高效表达特异性的GST LZP3融合蛋白。以该融合蛋白免疫兔子获得抗GST LZP3融合蛋白的高效价抗血清。结论 :获得原核表达的GST LZP3融合蛋白并制备了兔抗LZP3的抗血清 。
- 张爱莲赵干王宾张富春
- 关键词：卵透明带3原核表达融合蛋白抗血清
- HPV16-E7在Pichia pastoris酵母中的分泌表达
- 2003年
- 本研究利用酵母Pichia pastoris真核表达系统表达人乳头瘤病毒16(HPV16)E7蛋白,试图解决新疆维吾尔妇女高发宫颈癌的诊断、疫苗的研究中抗原蛋白需要的问题.依据新疆维吾尔妇女宫颈癌组织克隆获得的HPV16-E7基因序列设计引物,并分别在5’引物和3’引物中引入了EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ酶切位点,经PCR扩增后连接到pMD18-T载体上,再将HPV16-E7克隆至穿梭质粒pGAPZαA上,获得的重组穿梭质粒pGAPZαA-E7经线性化后.采用LiCl法将重组穿梭质粒转入酵母细胞内,Zeocin+筛选阳性克隆,经小瓶发酵后,取上清作SDS-PAGE,并做Western印迹检测表达的蛋白质,结果表明HPV16-E7成功地在酵母真核表达系统获得表达,表达产物的分子量分别是22KDa和88KDa,为深入开展HPV16-E7蛋白功能和应用的研究奠定了理论基础.
- 刘忠渊张富春赵干钟哲王宾
- 关键词：人乳头瘤病毒16SDS-PAGEWESTERN印迹
- 几种新疆荒漠昆虫抗冻蛋白基因克隆及其抗冻活性分析
- 本研究以同源序列克隆侯选基因的方法开展三种新疆荒漠昆虫抗冻蛋白基因的克隆;将所克隆基因进行大肠杆菌表达和酵母表达;检测抗冻蛋白的抗冻保护活性等，为了验证原核大肠杆菌及真核酵母菌所表达的准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白是否具有生物学...
- 赵干
- 关键词：基因克隆抗冻蛋白准噶尔小胸鳖甲抗冻活性荒漠昆虫
- 文献传递
- 手术应激反应的新概念——神经免疫内分泌学说被引量：86
- 1995年
- 神经免疫内分泌学说认为神经内分泌系统与免疫系统间存在双向调节、交互影响的基础,更引人关注的是,免疫系统通过释放细胞因子、分泌内分泌激素、感受抗原刺激等三方面发挥调节神经内分泌反应的功能。在手术应激反应的研究中不能忽视免疫系统的参与作用及围术期多种因素对其影响。
- 刘忠渊张富春赵干钟哲王宾
- 关键词：应激反应神经系统免疫系统内分泌
- 新疆家蚕抗菌肽(Cecropin-XJ)特性的研究被引量：13
- 2004年
- 探讨了新疆家蚕抗菌肽 (Cecropin -XJ)的抗菌特性。根据琼脂糖孔穴扩散法 ,检测抗菌肽的热稳定性、抑菌效价、对氨苄青霉素抗性菌的抑菌作用 ,检测抗菌肽对酸碱盐、人造胃液的耐受性及其抗菌谱。结果表明新疆家蚕抗菌肽 (Cecropin -XJ)具有很强的热稳定性、能够杀灭氨苄青霉素抗性菌、对酸碱盐、人造胃酸有一定的耐受性 ,其杀菌活力为 :1μg/ μl抗菌肽与 2 4 0 0 0单位的氨苄青霉素杀菌活力相当。新疆家蚕抗菌肽能够杀灭革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 ,而对革兰氏阳性菌的抗菌活力高于革兰氏阴性菌 ,这一发现将为抗菌肽在农业、医疗卫生、畜牧业等方面的应用奠定基础 。
- 刘忠渊张富春蔡伦赵干单文娟钟哲王宾
- 关键词：新疆家蚕抗菌肽抗菌特性热稳定性
- 花粉管介导的准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白转基因棉花的筛选被引量：4
- 2008年
- 利用新疆荒漠昆虫抗冻蛋白基因进行遗传转化是培育新疆棉花抗寒品种的新途径。研究采用RT-PCR结合RACE技术从新疆荒漠昆虫准噶尔小胸鳖甲(Microdera puntipennis dzungarica)中克隆获得抗冻蛋白(Antifreeze protein)基因MpAFP149。将MpAFP149克隆至pBI121上,获得重组质粒后采用电转化法将重组质粒转入农杆菌EHA105内,PCR筛选鉴定重组子,并测序确定抗冻蛋白植物表达载体构建正确。将pBI121-MpAFP通过田间的花粉管导入技术转化棉花,收取转化的棉花种子,经检测证明在转化10 000朵花中,卡那霉素抗性筛选出13株,PCR检测有2株阳性植株。实验结果为进一步开展抗冻蛋白基因转化棉花的研究奠定了基础。
- 马纪李春平邱立明徐建辉赵干李素丽
- 关键词：准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因转化棉花
- 酵母菌中表达的新疆家蚕抗菌肽(Cecropin-XJ)的特性研究被引量：30
- 2003年
- 研究酵母菌中表达的新疆家蚕抗菌肽 (Cecropin XJ)的抗菌特性。根据琼脂孔穴扩散法 ,检测抗菌肽的热稳定性、抑菌效价、对氨苄青霉素抗性菌的抑菌作用 ,并检测了抗菌肽对酸碱盐、人造胃液的耐受性及其抗菌谱。结果显示新疆家蚕抗菌肽具有很强的热稳定性、能够杀灭氨苄青霉素抗性菌、对酸碱盐、人造胃酸有一定的耐受性 ,其杀菌活力为 :1mg抗菌肽与 1 2 0 0U的氨苄青霉素杀菌活力相当。新疆家蚕抗菌肽能够不同程度地杀灭革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 ,这一发现将为抗菌肽在农业、医疗卫生、畜牧业等方面的应用奠定基础 。
- 刘忠渊张富春蔡伦赵干王宾
- 关键词：酵母菌新疆家蚕抗菌肽抗菌活性热稳定性抗菌谱
- 新疆准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因的克隆和抗冻活性分析被引量：35
- 2005年
- 根据GenBank中已发表的昆虫抗冻蛋白基因的保守序列设计引物,利用RT-PCR技术结合3’-RACE扩增的方法,从新疆荒漠昆虫准噶尔小胸鳖甲Microderapunctipenisdzunarica中获得了长约294bp不含信号肽的抗冻蛋白cDNA片段,命名为MpAFP5,其全长序列为363bp(GenBank注册号为AY821792)。基因测序结果表明,MpAFP5cDNA片段与加拿大拟步甲DendroidescanadensisAFP8基因片段、黄粉甲TenebriomolitorTHP4-9基因片段的核苷酸同源性分别达68.4%和71.8%,氨基酸序列同源性分别达70%和81%。将MpAFP5构建到原核表达载体pGEX4T-1中,重组质粒pGEX4T-1-MpAFP5在大肠杆菌BL21(DE3)中能够表达融合抗冻蛋白,SDS-PAGE分析显示融合蛋白的分子量约为37kD,Western印迹分析证明MpAFP5在大肠杆菌中正确表达。细菌的抗冻实验结果显示准噶尔小胸鳖甲融合抗冻蛋白对细菌具有显著的抗冻保护作用,保护效果与抗冻蛋白剂量呈正相关性。
- 赵干马纪薛娜杨长庚专芳芳张富春
- 关键词：准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白RT-PCR抗冻活性
- 准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白生物学特性研究
- 邱立明马纪赵干王芸刘忠渊张富春
- 关键词：抗冻蛋白
- 草原兔尾鼠卵透明带3基因原核表达条件的优化
- 2004年
- 目的 :通过大肠杆菌原核表达系统制备草原兔尾鼠卵透明带 3(LZP3)融合蛋白 ,作为草原兔尾鼠疫苗免疫抗生育研究的抗原物质。方法 :将LZP3基因的核心片段构建到融合表达载体pGEX - 4T - 1中GST的 3’端 ,形成GST -LZP3融合基因 ,经酶切鉴定和序列分析证实基因序列的正确性。在不同温度、不同时间和不同IPTG浓度进行诱导后 ,用SDS -PAGE检测融合蛋白的表达 ,发现有一条分子量约 6 3kD的新增蛋白条带。结果 :研究表明在 37℃、2 5℃的不同温度条件下均能诱导出LZP3蛋白 ,经SDS -PAGE和间接ELISA法检测 ,初步证明了LZP3基因能够在大肠杆菌中有效表达可溶性的融合蛋白。结论 :获得了LZP3融合蛋白表达的最佳诱导条件 ,为大量诱导产生LZP3融合蛋白奠定了理论基础。
- 张爱莲赵干王焱冰张富春
- 关键词：草原兔尾鼠卵透明带3原核表达融合蛋白
