赵薇
- 作品数：39 被引量：75H指数：5
- 供职机构：宁夏医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金宁夏回族自治区卫生厅科研项目更多>>
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- 雄激素非依赖性前列腺癌细胞系LNCaP-ADR的建立与鉴定
- 2021年
- 目的建立雄激素非依赖性前列腺癌细胞系LNCaP-ADR,为进一步研究前列腺癌的去势抵抗治疗机制奠定实验基础。方法将雄激素依赖性的前列腺癌细胞LNCaP作为亲本细胞,用含有10%木炭-右旋糖酐剥离的胎牛血清无酚红的RPMI 1640培养基进行雄激素剥夺培养,建立雄激素非依赖性的前列腺癌细胞系LNCaP-ADR。通过MTS实验和平板克隆形成实验,比较LNCaP亲本细胞和LNCaP-ADR细胞在雄激素剥夺培养条件下的增殖能力及对雄激素受体(AR)拮抗剂比卡鲁胺的敏感性;采用流式细胞术观察两种细胞在雄激素剥夺培养或比卡鲁胺处理下的细胞凋亡率,采用RT-qPCR检测AR信号通路靶基因PSA、TMPRSS2的表达变化。结果MTS实验和平板克隆形成实验结果表明,在雄激素剥夺培养条件下,雄激素非依赖性前列腺癌细胞系LNCaP-ADR的增殖能力和克隆形成能力较LNCaP亲本细胞增高(P均<0.01);细胞凋亡结果显示,LNCaP亲本细胞在雄激素剥夺培养条件下的细胞凋亡率高于LNCaP-ADR细胞(P<0.05);细胞毒性实验及凋亡检测结果表明,与LNCaP亲本细胞相比,LNCaP-ADR细胞对比卡鲁胺的敏感性降低(LNCaP IC_(50)=49.18μmol·L^(-1)、LNCaP-ADR IC_(50)=94.21μmol·L^(-1)),相同浓度比卡鲁胺诱导LNCaP-ADR细胞发生的凋亡率较LNCaP亲本细胞减少;RT-qPCR结果显示,在雄激素剥夺培养条件下,LNCaP-ADR中AR下游靶基因PSA、TMPRSS2的表达水平较亲本细胞增高(P<0.01)。结论本实验成功构建了雄激素非依赖性前列腺癌细胞系LNCaP-ADR,该细胞系对雄激素剥夺及雄激素受体拮抗剂比卡鲁胺具有较强的抵抗特性。
- 史昕艺芦晓红吴晓婷罗明秀陈捷珲王芳赵薇高玉婧
- 关键词：前列腺癌LNCAP细胞雄激素依赖性
- X射线辐照引起GC1小鼠精原细胞凋亡诱导因子核转位并诱导其凋亡被引量：1
- 2017年
- 目的研究X射线辐照后GC1小鼠精原细胞凋亡诱导因子(AIF)细胞定位的变化。方法 GC1细胞分别给予0、3、6、9 Gy X射线辐照,溴脱氧尿苷(Brd U)掺入实验检测辐照对细胞增殖速率的影响;辐照后48 h,4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞核凝集情况,免疫荧光细胞化学染色检测胞质及胞核中AIF蛋白定位的变化,Western blot法分析细胞总蛋白、胞质蛋白及核提取物中AIF蛋白的水平。结果随着辐照剂量的增加,GC1细胞增殖速率显著减慢,细胞活性降低。6 Gy X射线辐照后全细胞提取物中AIF蛋白总量变化不大,但细胞核提取物中AIF显著增多,即AIF出现核转位的现象。结论 X射线辐照能够诱导小鼠精原细胞发生凋亡,该过程中伴有AIF入核的现象。
- 杨慧莹丁敬宾王志军丁娟夏新舍赵薇
- 关键词：凋亡诱导因子X射线
- 小鼠Ccr2基因真核表达载体的构建及稳定转染细胞株的建立被引量：1
- 2010年
- 目的:构建小鼠Ccr2基因真核表达载体,转染RAW264.7,建立稳定转染Ccr2的RAW264.7细胞系。方法:应用RT-PCR从小鼠脾脏组织中扩增Ccr2mRNA全序列,插入真核表达载体pEGFP-N1中。用脂质体将重组质粒pEGFP-N1/Ccr2转染RAW264.7细胞,通过G418筛选建立Ccr2稳定转染的RAW264.7细胞系。经RT-PCR、Western blot检测、荧光显微镜和流式细胞仪FCM检测,了解Ccr2在RAW264.7细胞中的表达水平及细胞内定位。结果:成功构建了pEGFP-N1/Ccr2重组质粒,建立了稳定转染的RAW264.7细胞株。RT-PCR和Western blot检测证实,Ccr2基因在该细胞系中成功表达,荧光显微镜下观察到该基因定位于细胞膜上,FCM显示90%以上的细胞膜上均有CCR2的表达。结论:构建了Ccr2真核表达载体并建立了稳定转染的RAW264.7细胞株。为进一步研究MCP1/CCR2信号通路在结核杆菌诱导巨噬细胞凋亡中的作用奠定了基础。
- 赵薇芦晓红裴秀英
- 关键词：趋化因子受体真核表达转染RAW264.7细胞
- 论文式实验报告在生物化学实验教学中的应用被引量：7
- 2011年
- 通过对学生实验报告采用论文式的书写方式，激发学生进行生物化学实验的兴趣，提高生物化学实验教学的质量。方法学生分为对照组和实验组，对照组学生按常规的要求书写实验报告，实验组学生按论文的格式书写实验报告。实验结束后对两组学生进行考试。结果：实验组学生的实验报告成绩和实验考试成绩均较对照组有显著提高。结论：论文式实验报告的书写可以增强学生参与实验研究的兴趣，提高生物化学实验的教学质量。
- 姚青张继荣李燕李建宁张茜赵薇裴秀英
- 关键词：生物化学教学
- 重组质粒pFLAG-CMV2-FcDDR2的构建及应用
- 2015年
- 目的构建人盘状结构域受体2(DDR2)与IgG Fc段嵌合受体的重组质粒(pFLAG-CMV2-Fc DDR2),检测其自主磷酸化水平。方法设计Fc DDR2克隆引物,以质粒pSec Tag2B-Fc DDR2为模板,PCR扩增IgG Fc段与DDR2跨膜区和胞内区的c DNA序列(Fc DDR2),将其插入pFLAG-CMV2真核表达载体中。PCR扩增鉴定并测序验证重组质粒pFLAG-CMV2-Fc DDR2后,将其转染人胚肾HEK293T细胞,Western blot法验证HEK293T细胞中目标蛋白Fc DDR2的表达效率。将pcDNA3.1-DDR2转染HEK293T细胞,给予2型胶原蛋白刺激后作为阳性对照,用小鼠来源抗DDR2抗体免疫沉淀`pFLAG-CMV2-Fc DDR2阳性的HEK293T细胞及胶原刺激的pcDNA3.1-DDR2阳性的HEK293T细胞,4G10抗体分析DDR2的磷酸化水平,评价Fc DDR2的自主磷酸化能力。结果重组质粒pFLAG-CMV2-Fc DDR2的PCR扩增产物为大小约2800 bp左右的片段,与预期相符,测序验证正确。Western blot结果提示pFLAG-CMV2-Fc DDR2转染后的HEK293T细胞,FLAG-Fc DDR2表达水平显著上调。免疫沉淀结合Western blot分析提示FcDDR2的磷酸化水平与胶原刺激后的DDR2水平相当。结论成功构建了pFLAG-CMV2-FcDDR2真核表达载体,Fc DDR2的自主磷酸化与胶原蛋白刺激后DDR2的活化水平相当,可以用作DDR2经胶原蛋白刺激后的活化替代形式。
- 赵薇张昭黄同列穆楠田菲张伟
- 关键词：重组质粒磷酸化
- 金雀异黄酮对骨质疏松大鼠体内Sost表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:观察金雀异黄酮对去卵巢大鼠骨质疏松发生的影响并探讨其分子机制。方法:将60只雌性SD大鼠随机分为:空白对照组、模型对照组、尼尔雌醇组、金雀异黄酮高(18mg/kg)、中(9mg/kg)、低(4.5mg/kg)剂量组。除空白对照组外,其余大鼠切除双侧卵巢诱发骨质疏松。模型复制成功后,给予含有不同剂量金雀异黄酮的饲料喂食骨质疏松大鼠。12周后行股骨干骨密度测定并行RT-PCR和Western blot检测股骨组织中sost基因表达水平的变化。结果:和模型对照组相比,中剂量金雀异黄酮组大鼠骨密度显著增加(P<0.01)股骨组织中sost表达明显下调。结论:金雀异黄酮对骨质疏松大鼠有治疗作用,该作用可能与下调sost表达有关。
- 赵薇王志军李燕
- 关键词：金雀异黄酮SOST去卵巢大鼠骨质疏松
- 锌指蛋白146对吡柔比星诱导的精原细胞DNA损伤的保护作用
- 赵薇
- 类风湿性关节炎滑膜细胞中DDR2相互作用蛋白的筛选被引量：1
- 2015年
- 目的筛选盘状结构域受体(discoidin domain receptors 2,DDR2)的相互作用蛋白。方法原代培养类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLSs)。用人DDR2过表达腺病毒(Ad5-DDR2)感染FLSs,上调DDR2的表达。采用Ⅱ型胶原诱导的方法活化FLSs细胞膜上的DDR2;提取细胞总蛋白,通过小鼠来源的DDR2抗体免疫沉淀FLSs中的DDR2蛋白复合物;双向电泳分离抗原抗体复合物,质谱分析确认DDR2活化前后的差异蛋白。结果 Ad5-DDR2感染RA FLSs后,Westernblot结果显示细胞中DDR2表达水平显著上调。双向电泳分离DDR2免疫沉淀复合物,考马斯亮蓝染色显示胶原刺激前后,DDR2免疫复合物存在7个差异蛋白点。质谱分析及生物信息学分析显示,DDR2相互作用蛋白主要包括波形蛋白(vimentin)、膜脂联蛋白A2(Annexin A2)、免疫球蛋白和肌动蛋白等。结论筛选获得了两个可能与RA病程相关的DDR2相互作用蛋白——波形蛋白和膜脂联蛋白2,为DDR2-MMPs通路作用机制的阐明奠定了基础。
- 赵薇董晓薇舒震徐玉金张伟
- 关键词：滑膜成纤维细胞盘状结构域受体2相互作用蛋白
- 槐定碱对急性心肌缺血大鼠血清MDA、SOD、GSH-PX及NO的影响被引量：9
- 2009年
- 目的研究槐定碱对急性心肌缺血大鼠血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及NO的影响。方法将SD大鼠随机分为8组,每组8只,分别为正常对照组、假手术组、模型组、丹参组、硝酸甘油组、槐定碱2.5、5和10mg/kg剂量组。结扎左冠状动脉前降支(LAD)制备大鼠急性心肌缺血模型,采用比色法检测静脉注射槐定碱各组血清中MDA、NO含量和SOD、GSH-PX活性。结果与模型组相比,槐定碱2.5、5、10mg/kg组可降低急性心肌缺血大鼠血清MDA含量、升高SOD活性和NO含量(P<0.05或P<0.01)。槐定碱5、10mg/kg组能升高GSH-PX活性(P<0.05或P<0.01)。结论槐定碱对急性心肌缺血损伤保护作用的机制可能与其清除氧自由基和抗脂质过氧化作用有关。
- 丁娟赵薇聂黎虹彭涛周旭
- 关键词：槐定碱急性心肌缺血氧自由基
- 绝经后骨质疏松妇女血清骨硬化蛋白与雌二醇的相关性分析被引量：10
- 2010年
- 目的:探讨血清雌激素水平的变化与绝经后骨质疏松妇女血清骨硬化蛋白含量之间的关系。方法:比较分析100例健康妇女和100例绝经后骨质疏松妇女血清SO和E2水平的变化特点及相关性。结果:PMOP组血清E2水平显著下降(P<0.01),sost基因的mRNA水平和蛋白水平则明显上调(P<0.05),两者之间呈负相关(r=-0.57)。结论:PMOP患者存在sost基因表达显著上调的现象,该变化可能是由E2水平下降所至。
- 赵薇王志军丁娟吕金捍
- 关键词：雌二醇绝经后骨质疏松
