路璐
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：北京大学口腔医院更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人胚胎干细胞分化为角质形成细胞过程中标志物的表达特点被引量：4
- 2015年
- 目的:诱导人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,h ESCs)定向分化为角质形成细胞K-h ESCs(keratinocyte derived from human embryonic stem cells),并分析诱导过程中K-h ESCs不同标志物的表达特点。方法:运用含骨形成蛋白4、维甲酸和N2添加剂的上皮分化培养基直接诱导h ESCs分化为K-h ESCs,通过染色体核型分析检测K-h ESCs核型,通过实时定量PCR检测K-h ESCs在分化的不同时期基因的表达及其与原代人牙龈上皮细胞(human gingival epithelial cells,HGECs)、人永生化口腔上皮细胞(human immortalized oral epithelial cells,HIOECs)、人永生化皮肤角质形成细胞Ha Ca T的基因表达差异;利用免疫组织化学检测不同标志物在K-h ESCs的蛋白表达。结果:运用上皮分化培养基成功地诱导h ESCs分化为上皮样细胞K-h ESCs;K-h ESCs核型具有正常46条染色体,无结构异常;K-h ESCs中角质形成细胞标志物基因p63的表达明显低于Ha Ca T细胞(P<0.05),而与HGECs和HIOECs中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:运用上皮分化培养基可成功诱导h ESCs分化为具有正常核型的Kh ESCs;标志物的表达特点提示诱导h ESCs分化为K-h ESCs的过程是从h ESCs向单层上皮干细胞分化继而转向复层上皮终末分化发展的趋势,最终得到的K-h ESCs类似于单层鳞状上皮干细胞向终末分化初始阶段的角质形成细胞,该阶段的细胞由上皮干细胞静止状态被激活,处于分化初始高增殖活力阶段。
- 任玉兰战园路璐李盛林傅歆俞光岩曹彤刘鹤
- 关键词：胚胎干细胞角蛋白细胞核型分析上皮细胞
- 利用人胚胎干细胞评价反式维甲酸的胚胎发育毒性被引量：3
- 2014年
- 目前,药品安全、食品安全和环境污染等问题受到国人的广泛关注,也受到政府的特别重视。医用化学品、食品添加剂和环境污染物等通过各种途径进入体内,可能产生胚胎发育毒性;因此,建立新的高通量、高灵敏的胚胎发育毒性检测和评价十分重要。研究尝试利用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,RA)对人胚胎干细胞H9的细胞毒性和分化抑制,评价RA的胚胎发育毒性。通过CCK8检测不同浓度下RA对人胚胎干细胞H9和鼠胚胎成纤维细胞3T3的细胞存活百分数和半数增殖抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50),发现处理5 d和10 d,RA对人胚胎干细胞H9的IC50分别是9.23μg/mL和7.20μg/mL,明显低于3T3细胞。通过实时定量PCR检测不同RA浓度下,自然分化20 d的细胞中Nkx2.5、α-MHC、ACTC1和TNNT2基因的表达,发现0.3μg/mL及其以上浓度RA显著抑制H9细胞向心肌细胞分化。RA对H9细胞α-MHC、TNNT2和ACTC1的半数抑制分化浓度(ID50),分别为0.16、0.07和0.05μg/mL,ACTC1和TNNT2的ID50明显低于α-MHC的,提示ACTC1和TNNT2可能更适合作为人胚胎干细胞分化抑制的评价的指标。
- 路璐李盛林俞光岩任玉兰曹彤
- 关键词：人胚胎干细胞
- 人胚胎干细胞源角质形成细胞用于药物毒理检测的探讨
- 2020年
- 目的:探讨人胚胎干细胞源角质形成细胞(keratinocytes derived from human embryonic stem cells,K-hESCs)用于药物细胞毒理检测反应的可行性,为建立新的生物安全性评价模型提供依据.方法:应用CCK-8法检测细胞活性和细胞毒性.观察维A酸(RA)、5氟尿嘧啶(5-FU)、地塞米松(DEX)和青霉素G(PG)对K-hESCs、人原代牙龈上皮细胞(human gingival epithelial cells,HGECs)和人永生化口腔上皮细胞系(human immortalized oral epithelial cells,HIOEC)的细胞毒性反应.采用SPSS 16.0软件包对数据进行统计学分析.结果:RA作用于HGECs、HIOEC和K-hESCs 3种角质形成细胞后,其药物半数抑制浓度(IC50)分别为6.1±0.03、5.62±0.05和6.58±0.02;5-FU作用于3种细胞后,IC∞分别为1.65±0.02、3.00±0.02和1.72±0.04;DEX作用于3种细胞后,IC50分别为113.67±0.014、328±0.002和126.17±0.05;PG作用于3种细胞后,IC50分别为2200±1.34、3795±2.42和2880±1.5.4种药物对HIOEC和HGECs的IC50有统计学差异(P<0.05).对K-hESCs和HIOEC的IC50差异也有统计学意义(P<0.05),但对K-hESCs和HGECs的IC50差异无统计学意义(P>0.05).结论:在一般细胞毒性上,K-hESCs的药物半数抑制浓度比HIOEC更接近HGECs,可模拟人体正常细胞的反应.
- 任玉兰路璐李盛林俞光岩刘鹤
- 关键词：人胚胎干细胞角质形成细胞细胞毒性
- 基于人胚胎干细胞健康安全评价体系的构建
- 2016年
- 食品、药品、医疗器械和材料、生物制剂以及环境的质量和健康安全是政府和民众十分关注的热点问题。目前国际标准的健康安全评价检测方法以微生物、动物及其细胞作为载体,不能准确反映人类的生物学特征,预测人体心、肝等靶器官毒性及发育毒性的准确率偏低,在技术层面严重制约了人类健康安全的评价和监控。如何建立准确反映人类生物学特征的健康安全评价体系是关系国民健康安全的重大科学问题^（[1]）。
- 俞光岩曹彤邹晓晖张学慧傅歆彭双清邓旭亮李盛林刘鹤肖苒欧阳宏伟彭晖陈晓赵增明王晓颖方海琴路璐任玉兰徐明明
- 关键词：胚胎干细胞毒性试验细胞分化体外研究
