邹仲敏
- 作品数：176 被引量：555H指数：11
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金军队指令性项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学兵器科学与技术更多>>
- hPDGF-A/hBD_2双基因共表达腺病毒载体的构建及表达被引量：7
- 2007年
- 目的制备人血小板源性生长因子-A(human platelet-derived growth factor A,hPDGF-A)和人β防御素2(human beta defensins,hBD2)双基因共表达腺病毒载体并观察其在大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)中的表达。方法将hPDGF-A和hBD2通过内部核糖体插入位点(internal ribosome entry site,IRES)连接后,以同源重组的形式插入腺病毒表达载体,由人胚肾293细胞包装,获得有感染能力的重组腺病毒颗粒。重组病毒感染BMSCs后,用RT-PCR检测重组腺病毒的表达。结果①成功构建穿梭质粒pAdTrack-hPDGF-A-IRES2-hBD2。②成功构建重组腺病毒质粒pAdeasy-hPDGF-A-IRES2-hBD2。③293细胞包装获得有感染能力的重组腺病毒。④转染的BMSCs高表达hPDGF-A和hBD。结论构建了hPDGF-A/hBD双基因共表达腺病毒载体,证实其转染BMSC后的表达。
- 郝磊邹仲敏王军平董世武邓均闫国和王连友宁宇刘登群罗成基粟永萍
- 关键词：腺病毒血小板源性生长因子防御素
- 维生素D3通过抑制NLRP3炎性小体激活改善氮芥诱导角质形成细胞炎性损伤被引量：3
- 2020年
- 目的探讨NLRP3炎性小体在维生素D3(vitamin D3,VD3)改善氮芥(nitrogen mustard, NM)诱导角质形成细胞炎性损伤中的作用和机制。方法用20μmol/L NM单独或联合用10μmol/L caspase-1特异抑制剂(Ac-YVAD-cmk, YVAD)、10μmol/L NLRP3炎性小体特异抑制剂(MCC950)、5 nmol/L VD3处理人角质形成细胞株(HaCaT细胞)4 h。应用CCK-8法检测细胞增殖活力,Western blot检测NLRP3、caspase-1 p20、IL-1β和COX-2的表达水平,ELISA检测IL-1β释放量。结果 20μmol/L NM对HaCaT细胞增殖活力无显著影响,NM处理后可显著上调HaCaT细胞NLRP3、caspase-1 p20、IL-1β和COX-2的蛋白表达水平,增加细胞IL-1β释放(P<0.05)。而加入MCC950或YVAD处理后能显著抑制NM诱导的上述效应(P<0.05);同时,VD3干预能够明显抑制NM对NLRP3和caspase-1 p20蛋白表达的上调作用,并显著减少NM诱导的IL-1β和COX-2的表达和释放(P<0.05)。结论 VD3通过抑制NLRP3炎性小体激活减少角质形成细胞炎性因子生成,改善NM诱导的细胞炎性损伤。
- 董训虎陈明亮余文珮叶枫但国蓉邹仲敏
- 关键词：氮芥维生素D3角质形成细胞炎性反应
- 适宜附加电刺激的细胞培养皿
- 本实用新型公开了一种适宜附加电刺激的细胞培养皿，包括带盖子的培养皿本体，所述盖子上固定设置有延伸至培养皿本体培养孔内的正电极片和负电极片；所述培养皿本体上设置多个相互隔离的培养孔，每个培养孔内设置一对正负极电极片，各正电...
- 刘刚邹仲敏欧娜冯吉程晋姜帆
- 文献传递
- 基因捕获筛选TGF-β1诱导间充质干细胞C3H／10T1／2平滑肌分化的差异表达基因被引量：2
- 2014年
- 目的利用基因捕获方法,分离转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导小鼠胚胎间充质干细胞C3H/10T1/2(简称10T1/2细胞)平滑肌分化前后差异表达基因。方法 5 ng/mL TGF-β1诱导10T1/2细胞平滑肌分化,倒置显微镜下观察细胞形态学改变,RT-PCR鉴定平滑肌分化相关基因alpha平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,αSMA)、平滑肌22 alpha(smooth muscle 22 alpha,SM22α)、平滑肌肌球蛋白重链(smooth muscle myosin heavy chain,SM-MHC)和血清应答因子(serum response factor,SRF),免疫细胞化学实验检测αSMA。TGF-β1诱导建立的10T1/2细胞基因捕获阳性克隆库分化前后进行LacZ染色。cDNA末端快速扩增法(rapid amplification of cDNA ends,RACE)及电子克隆分离差异表达序列,在GenBank网站nBLAST进行生物信息学分析,用GenBank网站在线软件BankIt提交GenBank获取ID号,用pI/Mw软件计算蛋白分子量、等电点。Real-time PCR检测新基因mgt-16在BALB/c小鼠小肠、骨骼肌及心肌的表达。结果细胞形态学、RT-PCR及免疫细胞化学实验鉴定TGF-β1成功诱导10T1/2细胞平滑肌分化。LacZ染色筛选获得2个平滑肌分化后差异表达克隆。RACE、电子克隆和nBLAST分析后发现为线粒体核糖体蛋白S6(mitochondrial ribosomal protein S6,Mrps6)和新基因mgt-16。mgt-16基因位于19号染色体,编码一个93个氨基酸的蛋白(命名为mgt-16),相对分子质量为9 772.02,等电点为6.04,提交后ID号为GU266552。新基因mgt-16在BALB/c小鼠小肠表达较高,而在骨骼肌、心肌表达较低。结论利用基因捕获分离获得了TGF-β1诱导平滑肌分化前后2个差异表达基因:Mrps6和新基因mgt-16。
- 王明科姜帆孙慧勤叶枫程晋粟永萍邹仲敏
- 关键词：转化生长因子-Β1间充质干细胞平滑肌分化
- 培养小鼠骨髓间充质干细胞及其移植后在体内的定位分布被引量：27
- 2002年
- 周进明邹仲敏郭朝华何颖朱波王蒙冉新泽罗成基程天民
- 关键词：创伤小鼠骨髓间充质干细胞
- 美国糜烂性毒剂损伤和救治研究项目及其进展被引量：3
- 2012年
- 近年美国国立卫生研究院(NIH)资助的项目中,以研究中心承担主要任务,但各有侧重,可以满足转化医学研究的条件需求,也体现了NIH的先进管理理念。对糜烂性毒剂损伤和救治的研究包括损伤机制、药物研发、疗法评估等重要环节。目前在研的候选药物主要有抗炎药多西环素水凝胶、抗氧化剂(单/双硫醇、水飞蓟宾、AEOL10150)、亲核性清除剂(二硫嘌呤类和柔花酸)等。
- 邹仲敏赵吉清赛燕但国蓉蔡颖赵远鹏叶枫程晋姜帆
- 关键词：糜烂性毒剂芥子气药物研发
- 美国氰化物中毒救治药物研发项目及其进展被引量：5
- 2012年
- 美国政府和军队近年设立了多项氰化物相关的项目,旨在发生突发性化学事件和恐怖袭击时提供灵敏、快速的检测手段和及时、有效的救治措施。漫射分光技术无创,可定量测定有关生理终点指标和治疗反应,一种可野外使用的快速检测血氰化物水平的检测仪正处于立项研究阶段。正在研制的氰化物中毒救治药物主要有钴啉醇酰胺、3-巯基丙酮酸前体及两者的联合用药,较传统抗氰药高效,且可方便地经口服、肌注而达到治疗效果。
- 邹仲敏程晋叶枫但国蓉蔡颖王健董兆君
- 关键词：氰化物中毒药物研发解毒药
- E838对放烧复合伤造血功能防护效应的实验观察被引量：2
- 2001年
- 目的 研究新型抗放药E838对放烧复合伤和单纯放射损伤造血功能的防护效果。方法 动物致伤前、后不同时间给予E838腹腔注射 ,观察其存活率和死亡动物平活日 ,并在用药后不同时间检测其外周血白细胞计数、骨髓有核细胞数 (BMNC)、骨髓CFU GM和CFU S数。结果 E838预防用药能够明显提高损伤动物的 30d存活率及平均活存时间 ;对造血功能的研究结果亦表明 ,E838预防用药能够减少损伤后外周血白细胞、骨髓有核细胞数、骨髓粒 单系祖细胞数及GFU S等计数的下降幅度 ,并促进其恢复。结论 E838对放烧复合伤和单纯放射损伤具有确切的预防效果 ,对损伤小鼠造血功能也有很明显的保护作用。
- 郭朝华周燕虹邹仲敏孔佩艳史春梦周进明冉新泽粟永萍罗成基
- 关键词：E838放烧复合伤造血功能
- 人羊膜负载猪骨髓间充质干细胞体外生长的形态特点(英文)被引量：3
- 2007年
- 背景:人羊膜含胶原、糖蛋白、蛋白多糖、整合素和板层体等多种成分,表达多种生长因子及其mRNA的相关蛋白,能为细胞的增殖、分化提供丰富的营养成分,有利于细胞的生长繁殖,其能否负载培养猪骨髓间充质干细胞良好生长值得研究。目的:建立人羊膜负载培养猪骨髓间充质干细胞生长的组织工程方法,观察骨髓间充质干细胞生长增殖的形态特点。设计:随机对照观察。单位:创伤、烧伤和复合伤国家重点实验室,解放军第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所。材料:实验于2003-01/11在解放军第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。选用3只出生二三个月的贵州小香猪,雌雄不拘,体质量6～8kg,由解放军第三军医大学实验动物中心提供。主要试剂:IMDM培养基(Hyclone,USA);优质胎牛血清PAA(Germany);Eosin B(Sigma,USA);OCT包埋剂(USA)。主要仪器:BX51立式荧光显微镜(Olympus,Japan);IX70型倒置荧光显微镜(Olympus,Japan);恒冷切片机(2700-Frigcut,德国);骨髓穿刺针(江苏);超净工作台(苏净集团安泰公司);CO2恒温培养箱(QUEUE,USA)。方法:按文献所述方法准备人羊膜,将按文献所述方法分离、培养的贵州小香猪骨髓间充质干细胞贵州小香猪的骨髓间充质干细胞原代培养、传代扩增后,以不同密度(0.84×105/cm2,1.54×105/cm2,2.75×105/cm2)接种于人羊膜基质面,倒置显微镜及扫描电镜下观察不同培养密度骨髓间充质干细胞的生长增殖变化情况;将第2、3代骨髓间充质干细胞以1.54×105/cm2的密度作为合适种植密度接种到由聚酯环支撑的人羊膜的基质面,最长培养至18d,逐日经卷膜、切片、苏木精-伊红染色光镜下观察人羊膜负载骨髓间充质干细胞生长情况,同时给予扫描及透射电镜。主要观察指标:不同培养密度及不同时间点骨髓间充质干细胞在人羊膜上的生长情�
- 闫国和艾国平汪代杰邹仲敏冉新泽王军平李蓉粟永萍程天民
- 关键词：人羊膜体外生长
- 外周血MSCs的分离培养及对G-CSF的动员反应
- 2008年
- 目的建立多种种属外周血间充质干细胞(MSCs)的分离培养方法,探讨其对粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的动员反应。方法用percoll(1.131g/mL)分离多种种属外周血单个核细胞,进行贴壁培养MSCs。以G-CSF作为动员剂,培养骨髓和外周血来源的MSCs,计数动员前后的成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)。结果对多种种属进行外周血MSCs分离培养,成功率不同。在本实验条件下,可以稳定的直接分离培养出大鼠外周血的MSCs。G-CSF动员后,骨髓来源MSCs的CFU-F数量显著高于对照组(P<0.01);外周血来源MSCs的CFU-F数量也显著高于对照组(P<0.01),接近4倍。结论不同种属外周血MSCs分离培养难易不同,其直接原因是生理条件下外周血中存在的MSCs量少导致的。G-CSF可以有效地动员大鼠骨髓和外周血MSCs。
- 邓均邹仲敏张春雷王军平艾国平粟永萍
- 关键词：动员粒细胞集落刺激因子细胞培养
