郎志宏
- 作品数：115 被引量：384H指数：13
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 双抗夹心ELISA方法检测转cry8Ca基因烟草的杀虫蛋白
- 2009年
- 为了检测抗金龟子幼虫的转cry8Ca基因烟草杀虫蛋白的含量，对双抗夹心酶联免疫吸附法（DAS—ELISA）检测体系中的反应条件进行了优化。采用方阵法对血清抗体的反应浓度进行筛选，对提取液、包被液、封闭液和底物作用时间进行比较和优选，结果确定多克隆抗体浓度为1：3200，酶标结合物浓度为1：400，pH9．6碳酸缓冲液提取，pH7．4磷酸缓冲液包被，0．5％明胶．PBST封闭，TMB底物作用15min为最佳双抗夹心ELISA检测条件。通过这一检测体系，对转cry8Ca基因烟草植株进行检测，S12株系的Cry8C蛋白含量最高，每克鲜重含有12．683～14．461μg，占总蛋白量的0．052％-0．062％。
- 王容燕董建臻王金耀郎志宏曹伟平宋福平杜立新宋健冯书亮
- 关键词：转基因烟草金龟子幼虫
- 改造的mcry2Ab4基因及其应用
- 本发明涉及“改造的mcry2Ab4基因及其应用”，属于生物防治技术领域。改造的mcry2Ab4基因，编码具有SEQ ID NO4所示氨基酸序列的蛋白，其核苷酸序列如SEQ ID NO3所示。本发明通过调整cry2Ab4基...
- 张杰郎志宏梁革梅宋福平束长龙黄大昉
- 文献传递
- 对鞘翅目害虫高效的苏云金芽孢杆菌cry8H基因、蛋白及其应用
- 本发明涉及“对鞘翅目害虫高效的苏云金芽孢杆菌cry8H基因、蛋白及其应用”属于生物防治技术领域。本发明对鞘翅目害虫高毒力的cry8H基因的核苷酸序列，如SEQ ID NO1所示，人工设计合成的可以在植物中表达的cry8H...
- 束长龙宋福平王容燕张杰冯书亮黄大昉郎志宏
- 文献传递
- 玉米萜类合成酶基因tps6的功能及表达调控研究
- 植物次生代谢产物是植物在长期进化过程中植物与生物和非生物相互作用的结果,是对环境的一种适应,植物萜类化学物是一类重要的次生代谢物,在植物病虫害防御中起着重要作用。萜类合成酶（Terpene Synthase,TPS）催化...
- 李圣彦陈忠良王贵平高洪江汪海郎志宏
- 关键词：抗病虫转录调控进化分析
- 转基因作物的生态安全性问题及其对策被引量：6
- 2010年
- 随着转基因作物商业化进程的加快,转基因作物的安全性引起了人们越来越多的关注,主要就转基因作物生态安全性问题以及产生的原因进行综述,并提出我国现阶段应采取的对策。
- 王延锋郎志宏赵奎军黄大昉
- 关键词：转基因作物生态安全基因漂移安全性评价
- 甜高粱琥珀酸半醛脱氢酶SbSSADH基因克隆及原核表达被引量：3
- 2015年
- γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)代谢旁路是TCA循环的一个代谢支路,广泛存在于动植物和微生物中,植物GABA代谢旁路与植物生物和非生物胁迫响应相关。琥珀酸半醛脱氢酶(SSADH)是GABA旁路的一个关键酶,对GABA途径在生物体内发挥功能起着至关重要的作用。通过检索Maize GDB和Gramene数据库获得甜高粱Sb SSADH基因信息,利用同源克隆的方法获得了甜高粱Sb SSADH基因。序列分析结果表明,Sb SSADH基因与玉米、甘蔗在核酸序列的相似度为94.77%,但前端约200 bp的信号肽部分差异较大。通过以p ET-28a为表达载体构建Sb SSADH原核表达系统,Rosetta菌株为表达菌,表达出约50 k D的SSADH蛋白,将纯化的蛋白进行酶活分析,纯化蛋白具有琥珀酸半醛脱氢酶活性,并且受酶抑制剂ATP和AMP的抑制。
- 王龙海杨泽伟朱莉黄大昉郎志宏
- 关键词：甜高粱蛋白表达酶活测定
- 转2mG2-epsps基因烟草的草甘膦耐受性分析被引量：12
- 2009年
- 利用农杆菌介导法将耐草甘膦基因2mG2-epsps转入烟草,获得87株PCR阳性植株,阳性率为43%。对PCR阳性植株进行Southern杂交、RT-PCR、Western杂交和ELISA分析,结果显示外源基因已经整合到烟草基因组中并高效表达,转基因植株的叶片中2mG2-EPSPS蛋白的最高表达量可达26.03μg/g鲜重。转基因烟草草甘膦耐受性分析显示,其中有15个转化事件表现出较好的草甘膦耐受性,对草甘膦的耐受性可达到1%。转基因植株的种子可以在10 mmol/L草甘膦异丙铵盐浓度下萌发,T1代转基因烟草幼苗可以耐受浓度为0.8%的草甘膦。研究结果表明转2mG2-epsps基因烟草具有较高的草甘膦耐受性,2mG2-epsps基因可以用于耐除草剂转基因作物的培育。
- 孙鹤郎志宏陆伟林敏黄大昉
- 关键词：转基因烟草
- 玉米YABBY转录因子家族的特征及表达分析被引量：9
- 2015年
- YABBY基因家族是广泛存在于种子植物中的一类转录因子,参与植物的胚胎发育、侧生器官分化与逆境应答等生物学过程。玉米YABBY转录因子家族含有13个成员,其N端均为锌指结构域,C端为螺旋-转角-螺旋结构域。qRT-PCR表明YABBY家族具有明显的组织特异性,除了Zm YAB1不在雌穗表达外,其余成员在生殖器官中的表达量均明显高于营养器官。Zm YAB5、Zm YAB7、Zm YAB9、Zm YAB13基因整体表达水平比较高,而Zm YAB3、Zm YAB4、Zm YAB8基因则几乎不表达。同时对玉米YABBY基因家族逆境应答反应分析发现:在4℃环境中,Zm YAB1、Zm YAB5、Zm YAB13在处理3 h内下调幅度较大,Zm YAB9在处理24 h时表达量上调;在Na Cl处理中,整个家族呈现先上调,然后逐渐下调的趋势,在PEG处理中,整个家族表达量下调。在水杨酸处理中,Zm YAB5、Zm YAB13显著上调,Zm YAB1、Zm YAB6、Zm YAB7、Zm YAB9在处理3 h内上调幅度明显,并随后回落;Zm YAB9在处理超过12 h后出现下调。ABA处理中,Zm YAB1、Zm YAB2、Zm YAB6、Zm YAB9有不同程度的上调,Zm YAB7、Zm YAB10在处理超过6 h后出现明显下调趋势,Zm YAB5、Zm YAB13整体为上调的趋势。研究结果为进一步明确该家族成员的功能奠定了基础。
- 曹宇郎志宏王磊
- 关键词：玉米发育逆境
- 转基因抗虫玉米2HVB4外源插入片段的旁侧序列及其检测方法
- 本发明涉及转基因抗虫玉米2HVB4外源插入片段的旁侧序列及其检测方法。发明从转Bt cry2Ah‑vp基因的玉米植株中筛选到一个抗黏虫效果显著的转基因事件2HVB4；通过染色体步移的方法获得了其3’端边界序列和5’端边界...
- 李圣彦郎志宏张杰李梦桃黄大昉
- 文献传递
- Ⅱ型内含子介导的基因打靶技术及应用前景
- 2012年
- Ⅱ型内含子除具有核酶的特性之外,还可作为一种可移动的元件特异性地转移到基因组序列中,其转移过程需要内含子RNA和内含子编码蛋白质(IEP)来识别靶标位点,内含子已经作为一种新型的基因打靶工具应用于原核生物的基因插入失活和特定的基因敲除,并在真核生物基因组的功能基因组学和基因治疗中展现了广阔的应用前景。
- 潘阳阳郎志宏朱莉黄大昉
- 关键词：基因打靶
