郗永义
- 作品数：29 被引量：66H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学政治法律农业科学更多>>
- 核糖体蛋白rpS6在核仁中的定位与其磷酸化无关
- 2012年
- 核糖体蛋白S6(rpS6)是核糖体小亚基40S的一个组成成分。在该研究中,利用免疫荧光和邻位连接技术证明rpS6不仅是核糖体小亚基的组成成分,而且还可与核仁中的U3核蛋白复合体的标志性蛋白Mpp10共定位并且存在相互作用。rpS6蛋白的C端有5个丝氨酸磷酸化位点,为了研究rpS6蛋白在核仁中的分布是否与其磷酸化有关,构建了rpS6蛋白的两个突变体rpS6A和rpS6D分别与EGFP和HA的融合蛋白。rpS6A是将C端的5个丝氨酸位点全部突变为丙氨酸;rpS6D是将C端的5个丝氨酸位点全部突变为天冬氨酸。研究表明:rpS6、rpS6A和rpS6D与EGFP和HA的融合蛋白均可分布在核仁中,与内源性rpS6蛋白的分布情况一致,说明rpS6蛋白在核仁中的定位与其磷酸化无关,为探索rpS6蛋白在核仁中的功能奠定了良好的基础。
- 张朵高丽华邵勇郗永义胥照平陈惠鹏胡显文
- 长链非编码RNA HOTTIP对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响被引量：7
- 2015年
- 目的研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HOXA末端转录本反义RNA(HOXA transcript at the distal tip,HOTTIP)对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法将HOTTIP小干涉RNA(siRNA)及negative siRNA转染He La和C-33A宫颈癌细胞系,通过实时荧光定量PCR(q PCR)技术确认HOTTIP在细胞中表达水平的敲低,采用CCK8及克隆形成实验检测HOTTIP降低表达后对He La和C-33A细胞增殖的影响,细胞划痕实验检测HOTTIP降低表达后对He La和C-33A细胞增殖及迁移能力的影响,Matrigel细胞侵袭实验检测HOTTIP降低表达后对He La及C-33A侵袭能力的影响。结果向宫颈癌细胞系He La和C-33A中转染HOTTIP siRNA 48 h后,经q PCR检测He La及C-33A细胞中HOTTIP均出现明显下调;CCK8及克隆形成实验结果显示,HOTTIP降低表达能显著抑制He La及C-33A细胞的增殖(P<0.01);细胞划痕实验结果显示,HOTTIP降低表达能减弱He La和C-33A细胞增殖及迁移能力;Matrigel细胞侵袭实验结果显示,HOTTIP降低表达能减弱He La及C-33A侵袭能力。结论HOTTIP siRNA转染He La及C-33A宫颈癌细胞系能有效降低HOTTIP的表达,同时HOTTIP降低表达后能抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
- 刘芳李立安张欢张唯一吴晓洁郗永义周艳荣陈红星林艳丽
- 关键词：宫颈肿瘤细胞增殖细胞运动肿瘤浸润
- 用弱化dhfr双顺反子载体在CHO细胞中高效表达低分子量尿激酶突变体被引量：1
- 2006年
- 将二氢叶酸还原酶基因（dhfr）克隆至pIRES载体中弱化的脑心肌炎病毒（ECMV）内部核糖体进入位点（IRES）的下游，构建了含有弱化dhfr筛选标记和可用氨甲蝶呤（MTX）加压提高表达水平的双顺反子真核表达载体pIRES—dhfr。利用该表达载体表达了一种无糖基化和具有凝血酶抗性的低分子量尿激酶型纤溶酶原激活剂（LMW—uPA）突变体（缺失尿激酶原的1—143位氨基酸，Arg156→Lys，Asn302→Ala），用脂质体转染方法将表达载体pIRES—dhfr／LMW—UK转染CHO—dhfr-细胞后经过一轮MTX筛选，几乎所有获得的单克隆细胞株都表达LMW—UK，其中约50％为表达水平较接近（500—5000IU／10^6cells／d）的高表达阳性克隆。用转瓶无血清培养表达水平约为17．5pg／cell／d的rCHO细胞系LB2-UK，收集的上清经过阳离子交换柱和凝胶过滤层析两步纯化后，获得的重组蛋白的纯度可以达到99％。用S-2444发色底物法检测，所获得的突变体双链UK比例大于98％。
- 潘淑媛高丽华胡显文杨波殷亮胥照平张正光郗永义陈惠鹏
- 关键词：突变体内部核糖体进入位点重组CHO细胞
- 抗VEGF/VEGFR靶向肿瘤血管药物的研究进展被引量：10
- 2014年
- 研究表明,肿瘤的生长转移和新血管的生成有密切关系,其中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其信号途径在肿瘤血管生成中起关键作用。阻断该途径的任何环节均可有效抑制肿瘤血管的生成,进而抑制肿瘤的生长和转移。近年来,已有多种以VEGF/VEGFR为靶点的抗肿瘤血管生成药物投入临床应用,其中bevacizumab为第一个获批上市的抗肿瘤血管生成药物。继bevacizumab后,一种以基因工程手段获得的人Fc融合蛋白Zaltrap也成功在美国上市,这种杂交分子的药代动力学明显优于单克隆抗体,能更好的遏制肿瘤血管的发生并消退已形成的肿瘤血管。在肿瘤的临床治疗中,Zaltrap比bevacizumab显示出更大的优势。此外,VEGFC/D Trap及小分子酪氨酸激酶抑制剂也能有效抑制肿瘤血管的生成。在此对以VEGF/VEGFR为靶点的抗肿瘤血管生成药物进行综述。
- 李伊培郗永义张连成高丽华邵勇刘羽潘芸高招刚胡显文陈惠鹏张嵘
- 关键词：VEGF/VEGFR肿瘤血管生成抗肿瘤药物AFLIBERCEPT
- 重组人尿激酶原冻干产品的稳定性被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨重组人尿激酶原(rhPro-UK)冻干产品的稳定性。方法:采用S-2444发色底物法测定贮存在4℃和-20℃的rhPro-UK冻干产品的活性、单链比例随时间的变化规律;用SDS-PAGE及RP-HPLC肽图分析贮存在-20℃的rhPro-UK冻干产品的结构与组成的变化。结果:4℃保存3年后的rhPro-UK冻干产品的总活性和单链比例基本没有变化,但随着贮存时间的延长,有部分产品降解,如贮存78个月的样品,总活性可降低13%～15%;-20℃保存78个月后,rhPro-UK冻干产品的总活性和单链比例未见明显变化。SDS-PAGE及RP-HPLC肽图图谱显示,-20℃贮存78个月后的rhPro-UK冻干产品的组成和结构没有变化。结论:rhPro-UK冻干产品在4℃的贮存寿命可达3年;长期贮存于-20℃的rhPro-UK冻干产品,其总活性、单链比例及结构组成非常稳定。
- 高丽华张正光胡显文胥照平肖成祖郗永义邵勇
- 关键词：重组人尿激酶原稳定性冻干
- 健康成人身高相关基因研究进展被引量：7
- 2005年
- 身高是一由多基因控制的数量遗传性状,并受环境因素的影响。通过候选基因法已发现一些与其相关的基因多态性位点,如维生素D受体基因、多巴胺D2受体基因等。另外,利用全基因组扫描技术结合连锁分析法也发现人类染色体上的一些区域与身高发育有关。
- 郗永义霍塞虎梁小锋郑秀芬
- 关键词：身高候选基因法全基因组扫描身高发育维生素D受体基因基因多态性位点多基因控制
- 炭疽毒素受体结构和功能研究进展被引量：2
- 2013年
- 肿瘤血管内皮标志物8(TEM8)和毛细血管形态发生蛋白2(CMG2)是已知的两个炭疽毒素受体,它们的主要功能是当炭疽杆菌侵染细胞时介导炭疽毒素进入宿主细胞。这两个受体都是涉及到细胞外基质动态平衡的I型跨膜蛋白,并且都因为它们在血管生成或血管内皮细胞中表达增强而被发现。有研究发现TEM8能够调节内皮细胞迁移和血管形成,而CMG2则在内皮细胞增殖过程中起重要作用。进一步的研究显示它们与整联蛋白同源性较高,但它们确切的生理功能和作用机制尚不明确。本文中,主要讨论这两种蛋白的结构和它们作为炭疽毒素受体介导炭疽毒素进入细胞的分子机制,然后我们简单探讨一下TEM8在靶向肿瘤血管内皮细胞的抗血管生成和抗肿瘤疗法方面的研究进展,最后我们展望了下一步炭疽毒素受体研究的热点-它们的配体及生理功能研究。
- 张连成高丽华郗永义邵勇贾康杰胡显文陈惠鹏
- 关键词：炭疽毒素细胞受体血管生成
- PA4-Fc的融合蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种PA4-Fc的融合蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白，是如下1）或2）中任一所述的蛋白质：1）由序列表中的序列2的氨基酸残基序列组成的蛋白质；2）将序列表中的序列2氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸...
- 胡显文郗永义段海锋高丽华邵勇陈惠鹏胥照平张连成
- 文献传递
- 肿瘤细胞外泌体中融合基因的检测
- 2017年
- 目的:探究肿瘤细胞分泌的外泌体中是否可以检测到来源于源细胞的融合基因m RNA。方法:培养人非小细胞肺癌NCI-H3122细胞,采用外泌体试剂盒提取细胞上清中的外泌体,并用Western Blot实验验证外泌体是否提取成功。分别提取外泌体以及H3122细胞中的总RNA,将RNA反转录为c DNA,通过PCR反应扩增v1型EML4-ALK融合基因片段,经琼脂糖凝胶电泳确定目的条带后,将两种PCR产物送公司进行基因测序,最后对测序结果进行比对分析。结果:从H3122细胞上清中成功提取了外泌体,并且在外泌体中检测到来源于H3122细胞的m RNA;从H3122细胞外泌体中检测到EML4-ALK融合基因,并发现外泌体中的EML4-ALK融合基因的融合形式为V1,与在H3122细胞中检测到的EML4-ALK融合基因的融合形式完全相同。结论:肿瘤细胞分泌的外泌体中可以检测到肿瘤细胞来源的m RNA,并且外泌体中的m RNA可以反映肿瘤细胞m RNA的基因融合情况等生物学特性。
- 殷慧慧郗永义吴晓洁谭招丽崔琮邵勇高丽华法云智胡显文王友亮孙兆增
- 关键词：外泌体EML4-ALK基因融合MRNA
- 重组血管内皮生长因子受体及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种重组血管内皮生长因子受体及其编码基因与应用。本发明所提供的重组血管内皮生长因子受体为一种融合蛋白，自氨基端至羧基端依次为血管内皮生长因子受体1的结构域1-3、人IgG1的Fc片段。实验证明，本发明所提供的...
- 胡显文师明磊郗永义高丽华邵勇冯立陈惠鹏赵志虎
- 文献传递
