金立方
- 作品数：24 被引量：47H指数：3
- 供职机构：绍兴文理学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 白念珠菌细胞凋亡促进因子基因及其用途
- 本发明公开了一种白念珠菌细胞凋亡促进因子基因<I>CaWWM1</I>及其用途，属于生物医药技术领域。包括提供了一种新的细胞凋亡调控因子-CaWwm1蛋白，编码CaWwm1蛋白的多核苷酸和经重组技术产生这种CaWwm1蛋...
- 倪坚尹军霞金立方弭忠祥
- 文献传递
- 体外培养猕猴穆勒细胞经诱导可表现出视网膜前体细胞特征被引量：1
- 2011年
- 近年来的研究发现,鸡、大鼠和人视网膜中的穆勒胶质细胞(muller cell)在一定条件下,可显示出视网膜干/前体细胞的功能。但是,有关人类近亲猕猴穆勒细胞的研究尚未见报道。该研究首先使用基础培养基(DMEM+10%FBS)建立猕猴的穆勒细胞系,其表达GS、vimentin、CRALBP和EGFR等穆勒细胞标记,不表达GFAP,与人的穆勒细胞基因表达相似而与啮齿类差异较大。穆勒细胞经神经干细胞培养基培养一周后可表达pax6、nestin、sox2、otx2、six6和six3等视网膜干细胞标记,继续使用视黄酸诱导,部分细胞可分化为神经元细胞,这说明猕猴的穆勒细胞在体外诱导条件下,可去分化为视网膜前体细胞,有望成为视网膜疾病细胞替代疗法的一种细胞来源。
- 郭祥玉金立方纪少珲魏强牛昱宇季维智
- 关键词：猕猴视网膜干细胞视网膜疾病
- 对乙酰氨基酚耐受肝细胞株的建立及其作用机制研究被引量：1
- 2018年
- 对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)是引起急性肝衰竭最主要的原因,但其确切的作用机制仍不明了。该研究建立了不同浓度的APAP耐药肝细胞,并对其耐药机制进行初步研究。克隆状密度培养的AML-12小鼠肝细胞浓度递增诱导建立APAP耐药细胞系;细胞计数检测细胞增殖能力;Mito Tracker和H_2DCF-DA分别检测线粒体膜电位和氧自由基水平;GSH/GSSH检测细胞抗氧化能力;q PCR检测细胞基因表达水平;Western blot检测蛋白质水平。成功建立了增殖和耐药稳定的1.25和2.50 mmol/L APAP耐药AML-12肝细胞。在相应浓度APAP处理后,与对照组相比,耐药组细胞增殖能力强,氧自由基水平低,线粒体膜电位水平高,GSH/GSSH值高。进一步研究结果显示,耐受组细胞抗氧化通路Nrf2及其靶基因表达活性提高,而凋亡相关信号通路JNK及其相关基因活性下降。肝细胞表型特征分析显示,耐药组细胞肝功能相关基因表达水平并未发生显著变化,但与染色体重塑相关的转录因子Foxa1和Foxa2 m RNA和蛋白质水平显著升高。该研究建立了增殖和耐药性状稳定的APAP耐药肝细胞,耐药性状的获得与抗氧化能力和抗凋亡能力的提高相关,并提示染色体重塑相关转录因子也可能参与这一过程,为深入研究耐药机制奠定了基础。
- 曹欢欢茅育蕾陈娟慧陈佳媛郑锐攀岑梦娇倪坚金立方
- 关键词：肝细胞对乙酰氨基酚耐药
- Hedgehog信号通路对肝脏损伤修复作用的研究进展被引量：2
- 2019年
- Hedgehog(Hh)信号通路是胚胎发育的重要形态发生因子,在成体肝脏中活性处于抑制状态,但在多种类型的肝脏损伤中被重新激活。Hh信号通路参与肝脏损伤修复的多个环节,包括肝前体细胞的增殖分化,窦状隙内皮细胞的血管重塑,免疫细胞的炎症反应,以及肝星型细胞的激活和纤维化。该文就Hh信号通路介导的肝脏损伤修复作用进行概述,以期为推动肝脏疾病的治疗提供理论依据。
- 金立方倪坚闫俊艳韩继卫胡保卫
- 关键词：HEDGEHOG信号通路肝脏
- 一种黄酒发酵过程的智能温度控制方法及装置
- 一种黄酒发酵过程的智能温度控制方法及装置，涉及发酵领域。为解决现有技术中常规PID控制对于具有准确数学模型的控制系统效果很好，而对复杂的非线性系统的控制效果不太理想，如发酵罐温度的调节，导致每一批黄酒的口感都不尽相同的问...
- 金立方高轶岚马洋洋田海军刘俊彭祺
- 南美白对虾桃拉病毒和白斑病毒多重PCR检测体系的建立被引量：3
- 2012年
- 养殖对虾可混合感染多种病毒,桃拉病毒(Taura syndrome virus,TSV)和白斑病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是南美白对虾感染的主要病原体,建立TSV和WSSV的多重聚合酶链式反应(PCR)技术可有效防制疫病的爆发。根据GenBank公布的TSV和WSSV全基因组序列,分别设计TSV和WSSV的特异性引物,并在四种不同的PCR系统中扩增筛选,在同一电泳道内得到与预期结果相符的、可明显区分的2条特异条带,PCR扩增产物测序显示分别与TSV和WSSV基因序列吻合,本体系的建立为生产鉴别和诊断混合感染病毒奠定基础。
- 吴思思金立方余招锋
- 关键词：南美白对虾桃拉病毒白斑病毒多重PCR
- 同步化处理后小鼠成纤维细胞表观遗传水平的相对定量分析被引量：1
- 2010年
- 供体细胞的同步化处理可能改变其表观遗传特性,进而影响胚胎的克隆效率。研究同步化处理对小鼠胎儿成纤维细胞(mouse embryonicf ibroblasts,MEFs)组蛋白H3K9甲基化、乙酰化及组蛋白H3K4单甲基化、三甲基化表达的影响。分离培养MEFs,增殖稳定的第3代MEFs分别用5mL/L血清饥饿处理4d或15mL/LDM-SO处理2d使细胞处于增殖抑制期,通过免疫组化染色和Image-J图像处理软件,相对定量比较不同处理情况下组蛋白H3K9甲基化、乙酰化和组蛋白H3K4单甲基化、三甲基化变化情况。Ki-67染色检测结果表明,两种同步化处理可使细胞处于G0期或G1期。DMSO处理使MEFs组蛋白H3K9乙酰化表达水平升高,而5mL/L血清饥饿处理则使其表达水平下降;此外,两种同步化处理均导致组蛋白H3K9甲基化和H3K4单甲基化表达下降,但不影响组蛋白H3K4三甲基化的表达水平。研究结论表明:同步化处理可改变MEFs组蛋白乙酰化和甲基化表达水平,进而有可能影响胚胎克隆效率。
- 纪少珲王喜宏季维智金立方
- 关键词：组蛋白甲基化乙酰化
- 桃拉病毒感染对南美白对虾血液学参数的影响被引量：5
- 2013年
- 桃拉病毒（TSV）病是危害我们对虾养殖业健康发展的主要疾病之一，目前仍无切实有效的防控措施。对虾血细胞既是细胞免疫的承担者，又是体液免疫因子的提供者，研究血细胞在Tsv入侵过程中的反应和变化，对提出有效防止TSV方法上有着积极意义。用Tsv粗提液投喂感染南美白对虾，通过RT—PCtk法，显微镜观察法研究了感染后南美白对虾发病死亡率，及总血淋巴细胞数和不同种类血细胞的比率组成变化，并检测了感染前后血浆中超氧化物歧化酶（SOD）和酚氧化酶（PO）活力的变化。结果显示，TSV感染虾发生了60％～80％的死亡率，出现典型的Tsv症状，PCR证实TSV条带为阳性；而对照组仅有少量的虾只发生死亡。在TSV感染2～3d后，对虾总淋巴细胞数，透明细胞数，半颗粒细胞数及颗粒细胞数分别下降了约690／o、76％、60％和70％；而SOD和PO活力分别下降了约25％和68％。这一结果显示Tsv可能通过降低对虾血液学免疫力而实现其高致病性，通过提高对虾血液学指标可有效降低TSV感染的致病力。
- 金立方余招锋
- 关键词：南美白对虾桃拉病毒血细胞免疫指标
- 体外分步诱导猕猴胚胎干细胞为肝细胞被引量：3
- 2009年
- 采用分阶段诱导方法模拟肝细胞体内发育,建立体外诱导猕猴胚胎干细胞(rhesusmonkeyembryonicstemcells,rESCs)分化为成熟肝细胞的体系,对研究以ES细胞为基础的临床替代治疗人类晚期肝脏疾病具有重要的意义。将rESCs团块在含有10%FBS的DMEM培养基中悬浮培养11d,形成含有早期内胚层细胞的拟胚体(embryonicbodies,EB)并开始表达早期肝细胞的部分基因或蛋白,将11日龄EB接种至包被有ECM的组织培养皿,分阶段加入aFGF、BMP-4及OSM。经aFGF和BMP-4诱导7～10d后,分化细胞形态变为具有双核的多角形细胞,表达早期和中期肝细胞特异性的蛋白(AFP、ALB及CK18)和基因(AFP、ALB、APOH,G-6-P及TAT),并具有储存糖原的功能。撤除aFGF和BMP-4,添加OSM继续诱导7～10d,分化的细胞表达成熟肝细胞所特有基因CYP1B1和ADH1C,并具有摄取靛青绿的能力。
- 金立方纪少珲郭祥玉王喜宏季维智
- 关键词：猕猴胚胎干细胞肝细胞细胞因子
- 人胚胎干细胞定向分化为神经前体细胞被引量：8
- 2007年
- 采用单层贴壁分化的方法在无血清条件下诱导同源饲养层培养的人胚胎干细胞定向分化,得到了高比例的神经前体细胞(97.5±0.83)%(P<0.05)。这些神经前体细胞具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力。在长期的传代培养中发现,随着培养时间的延长,nestin阳性的神经前体细胞比例下降,同时发育能力也发生了变化。在传代培养的早期,神经前体细胞发育为神经元的比例很高,几乎没有胶质细胞分化出来。随着培养时间的延长,胶质细胞的比例逐渐上升。这与体内神经系统的发育过程非常相似。进一步研究发现具有bHLH(basic helix-loop-helix)结构域的转录因子neurogenein2(Ngn2)和Olig2可能在这一变化中起重要作用。因此,人胚胎干细胞来源的神经前体细胞能够模拟体内神经发育的模式,为在体外研究人的神经发育和再生医学奠定了基础。
- 李彬陈洪伟胡智兴谭韬金立方王淑芬季维智
- 关键词：人胚胎干细胞分化神经前体细胞
