金莲舫
- 作品数：22 被引量：46H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：化学工程医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 抗肿瘤抗生素力达霉素的制备新方法
- 本发明涉及一种大分子肽类抗肿瘤抗生素力达霉素的制造新方法,由于力达霉素分子中肽与发色团以非共价键结合,外界条件如有机溶煤、pH、洗脱剂离子特性、光和热等因素影响其结合并易引起发色团失活,采用羟基磷灰石柱吸附工艺,缩短流程...
- 邵荣光甄永苏李电东胡继兰金莲舫
- 文献传递
- 基因工程技术在大环内酯抗生素及硫霉素改造中的应用
- 王以光金莲舫余兰香徐小敏张叙伦李戎锋唐莉
- 该成果涉及利用基因重组技术研制新抗生素-丙酰螺旋霉素及对其他抗生素结构改造的探讨。其主要研究内容包括从麦迪霉素产生菌中克隆新基因-4′丙酰基转移酶基因，并转入螺旋霉素产生菌，获得了能直接发酵产生丙酰螺旋霉素的基因工程菌。...
- 关键词：
- 关键词：大环内酯抗生素麦迪霉素基因重组
- 一种利用基因重组技术制造丙酰,乙酰螺旋霉素的方法
- 本发明是利用基因重组技术，使麦迪霉素4″-酰基转移酶基因在螺旋霉素产生菌中得到表达。经过对表达产物理化性质的分析，证实该基因工程菌产生4″-丙酰螺旋霉素III，4″-丙酰螺旋霉素II，4″-乙酰螺旋霉素III的4″-乙酰...
- 王以光金莲舫曾应余兰香
- 文献传递
- 基因工程丙酰螺旋霉素被引量：9
- 1994年
- 以碳霉素４″异戊酰基转移酶基因（ｃａｒＥ）为探针，从麦迪霉素产生菌基因文库中，经菌落杂交获得阳性菌落ｐｃＮ１０Ｆ５。经分子杂交证明ｐｃＮ１０Ｆ５ＤＮＡ的ＢａｍＨ１－ＢａｍＨＩ８．０ｋｂ片段与ＣａｒＥ基因同源。将ｐＣＮ１０Ｆ５ＢａｍＨＩ－ＢａｍＨ１８．０ｋｂ片段分别克隆到ｐＩＪ６８０、ｐＷＨＭ３、ｐＷＨＭ６０１质粒载体上，获得重组质粒ｐ６Ｆｓ、ｐｗＦ５和ＰＧＦ５。含上述重组质粒的螺旋霉素产生菌克隆菌株均产生与丙酰螺旋霉素相类似的产物，且以ｐＩＪ６８０为载体的克隆菌株产生丙酰螺旋霉素的比例最高，最稳定。含ｐ６Ｆ５克隆菌株的发酵产物经提取、纯化后，进行理化性质及各种光谱数据的分析，证明其主要产物为丙酰螺旋霉素Ⅲ及Ⅱ。分子杂交实验证明螺旋霉素产生菌克隆菌株中，确实含有ｐ６Ｆ５ＢａｍＨＩ－ＢａｍＨＩ８．０ｋｂ片段。经分子杂交、亚克隆及基因表达实验，将麦迪霉素４″羟基丙酰基转移酶基因，定位于ＥｃｏＲＩ－ＥｃｏＲＩ－ｐｓｔＩ的２．６ｓｋｂ片段上。核昔酸序列分析结果显示该基因由１１６４个核昔酸组成，Ｇ＋Ｃ％为７０．ｏ％，ＳＤ序列为ＧＡＧＧＴ，起始密码为ＡＴＧ，终止密码为ＴＧＡ，共编码３８８个氨基酸残基，蛋白的分子量为４２．?
- 王以光金莲舫徐小敏张叙伦曾应
- 关键词：基因工程抗生素
- LDP蛋白作为肿瘤靶向药物导向载体的应用
- 本发明涉及一种可与人体肿瘤组织特异性结合的LDP蛋白，还涉及LDP蛋白作为肿瘤靶向药物导向载体的新用途，研究证明，LDP可与人体多种肿瘤组织包括乳腺癌、肺癌、结肠癌等特异性结合，其结合与相应正常组织比较有显著性差异，与人...
- 蔡琳甄永苏吴淑英金莲舫商悦
- 文献传递
- 一种双特异性寡肽-力达霉素强化融合蛋白Ec-LDP-Hr-AE
- 本发明涉及一种双特异性寡肽-力达霉素强化融合蛋白Ec-LDP-Hr-AE，该融合蛋白由靶向表皮尘长因子受体EGFR和HER2的两个寡肽、力达霉素辅基蛋白以及力达霉素活性发色团四部分组成，研究证明，其在体外能与表达表皮生长...
- 郭晓芳甄永苏商悦金莲舫
- 文献传递
- 麦迪霉素聚酮缩合酶基因的亚克隆及表达被引量：2
- 1991年
- 利用与麦迪霉素生物合成有类似途径的放线紫红素聚酮缩合酶基因Act I作为探针,将来源于麦迪霉素产生菌基因文库的与Act I有同源性的阳性初级克隆pCN8B12进一步缩小,亚克隆获得了2.4kb的麦迪霉素聚酮缩合酶基因,将其插入pWHM3载体中构建了重组质粒pCG2 DNA。pCG2 DNA在放线紫红素聚酮缩合酶基因缺陷型变株天蓝色链霉菌TK17及螺旋霉素产生菌S.ambofaciens中均获得表达。前者所得产物不同于麦迪霉素和放线紫红素,可能为新的杂合抗生素;后者能使螺旋霉素产量得到提高。另外pCG2 DNA在道诺红霉素产生菌调节变株S.peucetius H6101中的表达产物经TLC及HPLC分析表明为紫红霉酮。pCG2 DNA在Tetracenomycin C产生菌S.glaucescens中亦有一定的功能表达,而在红霉素产生菌红霉内酯阻断变株Saccharapolyspora erythraea WMH15,261中未观察到活性表达。推测pCG2 DNA具有一定调节或在某些聚酮类抗生素产生菌变株中起互补的功能。
- 朱学蔚王以光金莲舫徐小敏
- 关键词：麦迪霉素基因亚克隆
- 一种利用基因重组技术制造丙酰螺旋霉素的方法
- 本发明涉及利用基因工程技术制造丙酰螺旋霉素的方法，首先建立麦迪霉素产生菌的基因文库，用碳霉素产生菌4″异戊酰基转移酶基因为探针，从麦迪霉素产生菌基因文库中获得麦迪霉素4″酰基转移酶基因的重组质粒，再转入螺旋霉素产生菌。获...
- 王以光金莲舫曾应余兰香
- 文献传递
- 真菌G-18代谢产物的研究——Ⅱ.免疫抑制剂G-18-Ⅳ的分离鉴别
- 1989年
- 从多孢木霉(Trichoderma polysporum)的发酵液中,分离到一组具有免疫抑制作用的物质-G-18-Ⅰ、G-18-Ⅱ、G-18-Ⅲ、G-18-Ⅳ,其中G-18-Ⅳ为在红外光谱2100cm^(-1)具有强吸收的异腈类化合物,基于理化性质及光谱数据,已鉴别G-18-Ⅳ为异腈素酸E(木菌素)甲酯。
- 金莲舫金文藻
- 关键词：免疫抑制剂
- 麦迪霉素4″酰化酶基因的克隆及在螺旋霉产生菌中的表达被引量：27
- 1992年
- 从含麦迪霉素生物合成基因的初级克隆pCN6C5中,发现并分离了麦迪霉素4″酰化酶基因,与质粒载体p1J680相连,获得重组质粒p66B,在螺旋霉素产生菌中得到表达,其主要产物为4″异戊酰螺旋霉素。以p66B DNA BamHI-BamHI 2.3kb插入片段为探针,从麦迪霉素产生菌基因文库中获得了另一阳性克隆pCN10F5,Southern分子杂交确定pCN10F5 BamHI-BamHI 8.0kb为同源片段。以pWHM3及pIJ680为载体,获得重组质粒pWF5及p6F5,分子大小分别为15.2kb及13.3kb。通过DNA转化,并经分子杂交实验证明,获得含重组质粒的螺旋霉素产生菌克隆菌株。其主要产物经分离、纯化后,分析其理化性质和光谱数据,鉴定为丙酰螺旋霉素Ⅲ和Ⅱ。研究还表明,麦迪霉素基因文库中只有pCN10F5 DNA与碳霉素产生菌的4″异戊酰化酶基因同源,提示pCN6C5克隆携带的麦迪霉素4″酰化酶基因与pCN10F5的4″丙酰化酶基因及碳霉素4″异戊酰化酶基因有一定的区别。
- 王以光金莲舫金文藻张秀华曾应徐小敏姚军
- 关键词：麦迪霉素酰化酶基因产生菌
- 全文增补中
