钟志宏
- 作品数：30 被引量：103H指数：5
- 供职机构：湖南师范大学医学院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金长沙市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人巨细胞病毒gH蛋白表达及其单克隆抗体的制备被引量：1
- 2020年
- 人巨细胞病毒(HCMV)是全球范围内普遍感染的一种疱疹病毒,也是引起胎儿先天性畸形和器官移植受者死亡最常见的病原体。有研究表明,gH蛋白是HCMV主要的中和性抗原,特异性抗gH抗体具有中和HCMV及阻断病毒在细胞间传播的潜力。本研究以含人巨细胞病毒临床株Toledo全基因组的细菌人工染色体(BAC)为模板,扩增去除信号肽和跨膜区的gH基因片段,并将其插入表达载体构建pET32a’-gH重组表达质粒,将序列鉴定正确的重组质粒转化进入表达菌株TransB,诱导重组蛋白表达。用纯化的重组gH蛋白免疫8周龄BALB/c雄鼠,经杂交瘤技术获得5株稳定分泌抗gH单克隆抗体的细胞株,分别命名为8A9、8B4、8C4、8D9、8D12。所获5株单克隆抗体对gH蛋白均具有良好的反应性,其中8A9、8B4、8D9和8D12具有一定的病毒捕获能力,且8D9和8D12的捕获能力较强。本研究获得了具有自主知识产权的抗gH单克隆抗体,抗体具有良好的病毒捕获能力。在此基础上,我们将进一步鉴定其是否为中和抗体,为今后开发治疗HCMV感染的中和抗体奠定基础。
- 刘乐廖旻晶廖旻晶刘如石钟志宏刘如石
- 关键词：人巨细胞病毒单克隆抗体
- 索拉菲尼增强TRAIL诱导人肝癌细胞凋亡的作用及机制探讨被引量：2
- 2012年
- 目的观察索拉菲尼(Sorafenib)是否能增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人肝癌细胞凋亡并探讨其作用机制。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,MTT法测定细胞增殖活性,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)和细胞凋亡ELISA检测试剂盒检测细胞凋亡,Western blotting分析Mcl-1的表达。结果索拉菲尼具有增强TRAIL诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的作用,并呈剂量和时间依赖的方式抑制Mcl-1的表达。Mcl-1过表达能抑制索拉菲尼增强TRAIL诱导HepG2细胞凋亡的作用。结论索拉菲尼通过抑制Mcl-1的蛋白表达增强TRAIL诱导人肝癌细胞凋亡的作用。
- 全梅芳钟志宏杨军
- 关键词：肝癌索拉菲尼肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体MCL-1
- 一种快速两步革兰染色法的建立
- 2022年
- 目的:通过对革兰染色液配方的改良,建立一种快速两步革兰染色法.方法:配制多种两步法革兰染色液,不断优化染色时间,建立一种快速两步革兰染色法,然后将其与临床快速四步革兰染色法染色结果进行比较.结果:两步法A液15s、B液10s染色效果好,分别用两步法、四步法各染100张涂片,其中两步法合格率为94%,四步法为87%.以合格率计算,二者结果经统计学分析无明显差异,两步法可以达到与现有临床快速四步法相同的染色效果.结论:本研究建立的两步革兰氏法能满足临床工作需要,可以用于临床.
- 张蓉张雅惠唐小涵王馨语王磊钟志宏
- 关键词：革兰氏染色快速染色法媒染剂
- 血标本存放方式和时间对测定K^+、Na^+、Cl^-的影响被引量：5
- 2005年
- 目的观察血标本的不同存放方式和时间对检测K+、Na+、Cl-等离子结果的影响。方法采集病人静脉血,用肝素钠抗凝剂抗凝,分别以全血和血浆方式进行存放,血浆又以暴露和密闭两种方式进行存放,均用离子选择电极法(ISE)急诊生化分析仪和汽巴·康宁238血气分析仪分别测定K+、Na+、Cl-、Tco2、Glu和pH,然后进行统计学检验。结果全血和血浆暴露标本K+、Na+、Cl-、Tco2、Glu、pH,存放30min时检测结果与0min无差别(P>0.05);60min、120min和180min时检测结果与0min比较,K+、Na+、Cl-明显增高(P<0.05或P<0.01),并且随着存放时间延长出现逐渐增高的趋势,而Tco2、Glu和pH明显降低(P<0.05或P<0.01),也表现为随存放时间的延长逐渐降低的趋势。密闭保存的血浆标本的K+、Na+、Cl-、Tco2、Glu和pH,在不同存放时间的检测结果无显著差异(P均>0.05)。结论标本存放时间和存放方式对ISE急诊生化分析仪和血气分析仪检测结果有影响,在使用过程中,宜尽快对标本进行检测;不能及时检测的标本,应分离血浆以密闭低温的方式储存。
- 张志强邱月钟志宏
- 关键词：离子选择电极法标本
- 抗人细胞角蛋白7(CK7)单克隆抗体的制备及鉴定
- 2022年
- 用KLH偶联合成细胞角蛋白7(CK7)优势表位多肽片段(C14)免疫小鼠,经细胞融合技术制备CK7单克隆抗体(mAb),并收集临床组织进行免疫组化鉴定。C14多肽作为抗原具有良好的免疫反应性。本研究共获得了3株能稳定分泌抗CK7抗体的单克隆细胞株,选择亲和力较好的7A8单克隆抗体进行免疫组化鉴定,结果表明,本研究筛选的7A8单克隆抗体的质量浓度为0.49μg/mL时,与收集的临床标本均有良好的特异性反应,低于医院常用CK7检测试剂盒中抗体质量浓度2~5μg/mL,表现出较高的灵敏度。本研究筛选的7A8单克隆抗体为研发CK7快速诊断试剂提供了关键的原材料。
- 曾璇吴意刘如石曾冰洁扶春艳杨玉皎郑姣郑姣
- 关键词：免疫反应性检测试剂盒
- 7-二氟亚甲基-5,4′-二甲烷氧基异黄酮抗兔动脉粥样硬化机制的实验研究被引量：3
- 2010年
- 目的研究7-二氟亚甲基-5,4’-二甲烷氧基异黄酮(dFMGEN)抗动脉粥样硬化(AS)的可能机制。方法♂新西兰兔40只,随机抽取32只制作AS模型,余8只为正常对照组;造模60天后,32只分为模型对照组、dFMGE组、洛伐他汀组、金雀异黄素组,分别给予安慰剂及相应药物5mg·kg-1·d-1,治疗30天,测定治疗前后血清相关指标。结果与模型对照组相比,dFMGEN组一氧化氮(NO)水平升高(P<0.01);内皮素(ET-1)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)水平降低(P<0.01);同型半胱氨酸(HCY)水平无统计学差异。结论增加NO合成、减少ET-1释放及抗LDL-C氧化,可能与dFMGEN抗AS机制有关。
- 游计良赵红唐小异钟志宏符晓华
- 关键词：金雀异黄素动脉粥样硬化
- 两种培养基高压蒸汽灭菌方法的改进
- 2002年
- 钟志宏
- 关键词：高压蒸汽灭菌右旋糖己糖灭菌过程
- 几种改良细菌生化反应的研究
- 2007年
- 目的:通过对培养基成分、灭菌方法等的改进提高V-P试验、尿素分解试验、霍乱红试验的阳性率。方法:改进V-P试验、尿素分解试验培养基的灭菌方法,改良霍乱红试验培养基的成份。结果:V-P试验在室温静置10～15 min出现典型的阳性结果;霍乱红试验滴加浓硫酸后立即呈现蔷薇色;尿素分解试验阳性结果明显。结论:改良的V-P试验、尿素分解试验和霍乱红试验结果均出现快而易观察,且V-P试验和霍乱红试验明显缩短了反应时间。
- 钟志宏李启星邱月
- 关键词：葡萄糖尿素
- 弓形虫致密颗粒蛋白GRA8真核重组表达质粒的体外表达分析
- 2006年
- 目的:分析弓形虫致密颗粒蛋白GRA8真核表达质粒的体外表达。方法:大量提取纯化重组真核表达质粒pVAX1-GRA8,瞬时转染培养的vero E-6细胞,RT-PCR和免疫印迹法检测GRA8在细胞中的表达。结果:从转染pVAX1-GRA8后的vero E-6细胞的RNA中扩增出GRA8的特异条带,转染细胞存在弓形虫感染血清识别的特异蛋白质条带。结论:真核表达质粒pVAX1-GRA8在vero E6细胞中获得表达。
- 钟志宏袁仕善
- 关键词：弓形虫真核表达质粒体外表达
- 肺结核合并下呼吸道真菌感染病原菌的分布及药敏分析被引量：6
- 2012年
- 对我院2011年7～12月207例肺结核合并下呼吸道真菌感染患者病原菌的分布及对常用抗真菌药物的耐药现状进行回顾性分析，报告如下。
- 陈建飞钟志宏
- 关键词：感染病原菌下呼吸道肺结核药敏分析耐药现状
