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闫少春: 作品数：52 被引量：82H指数：5; 供职机构：包头医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金中国博士后科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生文化科学生物学一般工业技术更多>>

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5-氮杂-2′-脱氧胞苷对小鼠海马神经元细胞系HT22细胞DNA甲基转移酶表达和细胞周期的影响被引量：4: 2018年; 目的:探究5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对小鼠海马神经元细胞系HT22细胞增殖及其对DNA甲基化转移酶(DNMT)表达的影响。方法:5-Aza-CdR处理HT22细胞,采用Real-time PCR和免疫印迹检测DNMT1、DNMT3A、DNMT3BmRNA及蛋白的表达;甲基转移酶活性试剂盒检测DNMTs活性;流式细胞仪对其细胞周期及凋亡进行检测。结果:5-Aza-CdR处理HT22细胞24h后,不同浓度5-Aza-CdR均显著抑制HT22细胞增殖,且使胞质空泡化。5-Aza-CdR降低了HT22细胞早期凋亡,但促进晚期凋亡,并诱导细胞周期发生S期阻滞。DNMT1和DNMT3A的mRNA和蛋白表达下降,但DNMT3B表达未发生明显变化。DNMT1和DNMT3B活性降低。结论:5-Aza-CdR可降低DNMT1和DNMT3A mRNA和蛋白表达以及DNMT1和DNMT3B活性,影响HT22细胞周期及凋亡。; 田小莉杨洁杨洁闫少春杨静邵国; 关键词：5-AZA-CDR 细胞周期 DNA甲基转移酶小鼠

蛋白表达系统的研究进展被引量：10: 2014年; 利用重组蛋白表达技术，对蛋白质功能结构进行研究，给人类生产、生活带来了极大的影响，在各个领域发挥了重要的作用。本文主要分析原核和真核两种表达系统的优缺点，综述一些现有表达系统的研究进展，旨在对后续关于表达系统选择的工作提供一些参考。1蛋白表达的涵义自上个世纪70年代基因工程技术诞生以来，基因表达技术已渗透到工业、农业等各个领域，并已取得显著成效。如今人类社会面临人口增加、资源匮乏、环境污染加剧、疑难病诊断和治疗等重大问题，都需要在不同程度上依赖基因工程的发展和应用来加以解决。重组DNA技术在分子水平上对生物医学的发展有很大的意义，如决定蛋白质结构的根本物质是DNA，而直接对蛋白质进行改造是很难实现的，所以必须在DNA水平上对基因进行改造或修饰。蛋白表达就是重组DNA的一种实现技术，是用人为的方法将某一供体生物的遗传物质一DNA大分子提取出来，之后在离体的条件下用适当的工具酶进行切割，再把它与载体的DNA分子连接起来，然后一起导入受体细胞中，从而使得外源物质在其中“安家落户”，进行正常的复制和表达[1]。; 陈晓娟闫少春邵国; 关键词：重组蛋白表达重组DNA技术基因工程技术蛋白质结构生物医学

医学细胞生物与遗传学混合试教学改革中题库建设的作用和意义被引量：3: 2018年; 细胞生物与遗传学混合式教学改革中考试题库建设工作是重要的教学资源,它对教学的过程性、结果性评估起到重要支撑作用。我们充分利用学校的优慕课平台初步构建了测试范围广泛的包含1200道题目的网络考试题库.此题库具有"统计""更新"和"可供分析"的功能,特别是统计和可供分析功能,可以借助大数据技术为教师提供教学效果分析和对学生获取知识的优劣程度的评价,并为改善、修正和调整教学目标提供方向性指标。从试题库的应用方面,指出其使用的范围和优势;从应用过程和展望角度,找出如何更好地优化和使用试题库,促进教学质量的提高。; 吴涤王宗霞刘佳闫少春贾小娥杨艳芳周成江; 关键词：题库

蛋白磷酸酶-1在能量代谢作用中的研究进展被引量：2: 2015年; 蛋白质的磷酸化和去磷酸化是真核生物体内基本的调控机制,蛋白磷酸酶的去磷酸化作用在调控细胞生命过程中起了重要的作用。蛋白磷酸酶-1(protein serine/threonine phosphatase-1,PP1)是一种在能量代谢过程中处于关键位置的蛋白磷酸酶,研究表明80%以上蛋白质的去磷酸化反应是由PP1和PP2A行使的。本文就PP1的结构、分布以及与代谢相关的功能等内容进行论述。; 张柱霞闫少春邵国

5-aza-cdR对神经细胞NG108-15细胞周期的影响被引量：1: 2015年; 目的:观察DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)抑制剂5-氮-2'脱氧胞苷(5-aza-2'deoxycytidine,5-aza-cdR)对神经细胞系NG108-15细胞周期的作用,并探讨相关的机制。方法:NG108-15细胞用10μmol/L 5-aza-cdR处理,RTCA分析细胞指数,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,8-PCR检测DNMTs及细胞周期相关基因CCND1和CCND2 mRNA的表达。结果:5-aza-cdR能抑制NG108-15细胞的增殖,5-aza-cdR处理细胞后使细胞周期发生变化,同时使DNMT1的表达降低(P<0.05)而DNMT3A和DNMT3B mRNA表达不变,并且CCND1和CCND2 mRNA表达也不变。结论:10μmol/L 5-aza-cdR可以抑制NG08-15细胞的增殖,其抑制作用可能是通过降低DNMT1表达实现的,这种抑制作用不影响CCND1和CCND2的表达。; 张柱霞孙明英杨洁姜树原刘友闫少春邵国; 关键词：NG108-15细胞细胞周期

钒化钠对人食管癌细胞系EC109的增殖抑制作用与诱导凋亡作用: 2018年; 目的探索不同浓度钒化钠对食管癌细胞系EC109的抑增殖和促凋亡作用。方法体外培养食管癌细胞系EC109,给予0、0.1、1.0、5.0、10.0、50.0、100.0和200.0μmol/L钒化钠处理,分别培养15、30 min、1、2和4 h后,通过Western blot检测细胞周期蛋白Cyclin D1与细胞凋亡蛋白Caspase-3在不同时间、不同浓度的表达变化。给予以上相同浓度的钒化钠分别处理细胞4、12、24和48 h后,MTT法与流式细胞术检测不同时间、不同浓度的钒化钠对食管癌细胞系EC109细胞株的增殖与周期影响。结果蛋白印迹结果显示,在100~200μmol/L的浓度范围内随着钒化钠药物浓度的增加,药物处理时间的延长,Cyclin D1的表达呈现逐渐下降的趋势(P<0.05);当钒化钠浓度小于10μmol/L时,Caspase-3的表达变化无统计学意义(P>0.05),当处理浓度达到50μmol/L或者更高以及处理时间达到30 min甚至更长时,Caspase-3的蛋白表达水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。MTT法结果显示,钒化钠浓度达到50~200μmol/L时,EC109细胞的增值受到抑制(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,当钒化钠浓度为50~200μmol/L时,随着处理时间24和48 h时的增加,EC109细胞被阻滞在S期,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论一定浓度的钒化钠能明显抑制食管癌细胞系EC109的生长,表现出一定的抗肿瘤作用,为钒化钠成为食管癌的临床治疗药物提供实验依据。; 时静华杨洁田小莉许晟迪姜树原刘晓蕾闫少春邵国; 关键词：EC109细胞

透明细胞肾细胞癌组织中DNMT3B异构体表达及其整体甲基化的分析: 2016年; 目的检测透明细胞肾细胞癌组织中DNA甲基转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)异构体表达及其整体甲基化的变化,探讨这些变化与透明细胞肾细胞癌的关系。方法选取15例透明细胞肾细胞癌及其癌旁组织,应用Real-time PCR技术检测DNMT1、DNMT3A、DNMT3B与DNMT3B六种主要异构体的mRNA表达,应用Western blot法检验DNMT3B4蛋白表达;应用联合亚硫酸氢钠的限制性内切酶分析法(COBRA)分析重复序列Alu和LINE-1的甲基化水平。结果透明细胞肾细胞癌组织中DNMT3B4 mRNA和蛋白表达水平比癌旁组织高;重复序列Alu和LINE-1的甲基化水平在透明细胞肾细胞癌组织中比癌旁组织低。结论 DNMT3B4表达增加可能与整体甲基化降低及透明细胞肾细胞癌的发生有密切关系。; 高永胜杨洁尹树慧崔钧贺贾晓娥谢伟闫少春邵国; 关键词：DNA甲基转移酶3B

5-Aza-CdR对低氧NG108-15细胞的影响机制研究: 2016年; 通过使用DNA甲基转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)抑制剂5-氮-2'脱氧胞苷(5-aza-2'deoxycytidine,5-Aza-Cd R)和低氧干预神经细胞系NG108-15,旨为揭示5-Aza-Cd R、低氧、低氧预适应对NG108-15细胞增殖和细胞周期影响的相关机制。利用5-Aza-Cd R(10.0μmol/L)孵育NG108-15细胞后进行低氧与低氧预适应处理;使用倒置显微镜观察细胞形态的变化;通过RTCA分析细胞增殖指数;收集细胞后使用流式细胞仪检测各组细胞周期和细胞凋亡的变化情况;利用Real-time PCR检测甲基转移酶DNMTs和细胞周期相关基因在m RNA水平的表达变化情况。结果表明,5-Aza-Cd R和低氧抑制NG108-15细胞增殖,促进细胞早期和晚期凋亡,低氧预适应促进细胞的增殖。然而,5-Aza-Cd R处理后再低氧与低氧预适应,DNMTs和细胞相关周期基因的m RNA转录增加(P<0.05)。10.0μmol/L的5-Aza-Cd R联合低氧处理抑制细胞的增殖,低氧预适应对细胞的增殖有促进作用。; 张柱霞孙明英杨洁姜树原闫少春邵国; 关键词：NG108-15细胞低氧低氧预适应

钒化钠对人食管癌细胞系EC109细胞株增殖影响的研究: 2009年; 目的:探讨不同浓度钒化钠对食管癌细胞系EC109增殖作用的影响。方法:将培养的食管癌细胞系EC109给予不同浓度及时间的钒化钠刺激,以噻唑蓝(MTT)比色法检测食管癌细胞系EC109增殖及增殖抑制情况。结果:一定浓度的钒化钠对食管癌细胞系EC109有生长抑制作用。结论:一定浓度的钒化钠能明显抑制食管癌细胞系EC109细胞株的生长。; 龚向峰吕军周立社邵国黄丽华付玉华闫少春; 关键词：食管癌增殖抑制

6种人DNA甲基转移酶3B典型异构体的克隆、表达及对293A细胞增殖的影响: 2015年; 目的构建6种人DNA甲基转移酶(DNMT)3B典型的异构体的真核表达载体并对其进行过表达,初步探讨其在人胚肾细胞系293A中的生物学作用。方法以人HCT116 c DNA为模板,采用高保真PCR获得DNMT3B1和DNMT3B2的全长,并以DNMT3B2为模板,利用特异的引物扩增出DNMT3B3、DNMT3B4、DNMT3B5和DNMT3B7,将PCR产物连接到真核表达载体p CMV-2B上,并对上述载体进行Bam HⅠ、EcoRⅠ双酶切和测序鉴定,鉴定正确后,将重组质粒转染293A细胞并利用G418筛选出稳定表达的克隆株,MTT法检测细胞增殖活力。结果双酶切和测序结果表明克隆了6种人DNMT3B异构体CDS序列,经蛋白印迹检测,DNMT3B异构体在293A细胞中获得稳定表达;稳定过表达DNMT3B3、DNMT3B4和DNMT3B7可以抑制细胞增殖。结论构建了人DNMT3B异构体真核表达载体及获得了其稳定表达细胞株,DNMT3B异构体蛋白对胚肾细胞系293A的增殖有不同的作用。; 张柱霞孙明英杨洁姜树原石蕊闫少春邵国; 关键词：DNA甲基转移酶3B 异构体增殖

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