陈新华
- 作品数：7 被引量：77H指数：4
- 供职机构：解放军第三〇二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3抗原模拟表位的筛选和鉴定st被引量：4
- 2003年
- 目的 筛选丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白NS3(HCVNS3)特异性噬菌体模拟表位 ,为抗 HCV的疫苗研究探索新途径。方法 以抗 HCVNS3的单克隆抗体作为固相筛选分子 ,对人工合成的噬菌体随机七肽库进行 3轮“吸附 洗脱 扩增”的筛选过程 ,随机挑取 6 0个克隆 ,经噬菌体酶联免疫吸附法 (ELISA)鉴定并进行交叉反应实验以及竞争抑制性结合实验 ,最后对所选克隆进行DNA序列分析 ,以确定HCVNS3抗原的模拟表位。结果 经噬菌体富集后 ,从随机筛选的 6 0个克隆中得到 13个阳性克隆 ,确定氨基酸序列SRNTxKL为HCVNS3的模拟表位。结论 用噬菌体七肽库成功筛选得到HCVNS3的模拟表位。
- 钟彦伟成军王刚田小军陈新华李克李莉张玲霞陈菊梅
- 关键词：丙型肝炎病毒模拟表位疫苗研究丙型肝炎
- 丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3抗原模拟表位的筛选和鉴定
- 目的:筛选丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3(HCV NS3)特异性噬菌体模拟表位,为抗HCV的疫苗研究探索新途径.方法:以抗-HCV NS3的单克隆抗体为固相筛选分子,对人工合成的噬菌体随机七肽库进行3轮“吸附-洗...
- 钟彦伟成军王刚田小军陈新华李克李莉张玲霞陈菊梅
- 文献传递
- 应用噬菌体随机肽库技术筛选丙肝病毒NS3抗原模拟表位被引量：9
- 2002年
- 以抗 HCVNS3的单克隆抗体作为固相筛选分子 ,对人工合成的噬菌体随机 12肽库进行 5轮“吸附 洗脱 扩增”的筛选过程 ,随机挑取 4 2个克隆 ,经噬菌体酶联免疫吸附法 (ELISA)鉴定并进行交叉反应实验以及竞争抑制性结合实验 ,最后对所选克隆进行DNA序列分析 ,以确定HCVNS3抗原的模拟表位。经噬菌体富集后 ,从随机筛选的 4 2个克隆中得到 11个阳性克隆 ,确定氨基酸序列XXIXXXXMSNXX为HCVNS3的模拟表位。我们用噬菌体12肽库成功筛选得到HCVNS3的模拟表位 。
- 钟彦伟成军陈新华王刚洪源王琳李莉张玲霞陈菊梅
- 关键词：噬菌体随机肽库丙肝病毒NS3抗原模拟表位
- 丙型肝炎病毒非结构蛋白NS4A抗原模拟表位的筛选和鉴定被引量：12
- 2002年
- 目的 筛选丙型肝炎病毒 (hepatitisCvirus,HCV)非结构蛋白NS4A(HCVNS4A)特异性噬菌体模拟表位 ,为抗HCV的疫苗研究探索新途径。方法 以抗 HCVNS4A的单克隆抗体作为固相筛选分子 ,对人工合成的噬菌体随机 1 2肽库进行 5轮“吸附 洗脱 扩增”的筛选过程 ,随机挑取 45个克隆 ,经噬菌体酶联免疫吸附法 (ELISA)鉴定并进行交叉反应实验以及竞争抑制性结合实验 ,最后对所选克隆进行DNA序列分析 ,以确定HCVNS4A抗原的模拟表位。结果 经噬菌体富集后 ,从随机筛选的 45个克隆中得到 1 3个阳性克隆 ,确定氨基酸序列XXRXXMXPXXXI为HCVNS4A的模拟表位。结论 用噬菌体 1 2肽库成功筛选得到HCVNS4A的模拟表位 。
- 钟彦伟成军陈新华王刚洪源王琳李莉张玲霞陈菊梅
- 关键词：丙型肝炎病毒抗原模拟表位
- 应用噬菌体表面展示技术筛选丙型肝炎病毒NS5A抗原模拟表位被引量：52
- 2002年
- 目的:筛选丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS5A(HCVNS5A)特异性噬菌体模拟表位,为抗HCV的疫苗研究探索新途径.方法:应用噬菌体表面展示技术,以抗-HCVNS5A的单克隆抗体作为固相筛选分子,对人工合成的噬菌体随机12肽库进行5轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选过程,随机挑取30个克隆,经噬菌体酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定并进行交叉反应实验以及竞争抑制性结合实验,最后对所选克隆进行DNA序列分析,以确定HCVNS5A抗原的模拟表位.结果:经噬菌体富集后,从随机筛选的30个克隆中得到12个阳性克隆,确定氨基酸序列XXXPXXXLLRXX为HCVNS5A的模拟表位.结论:用噬菌体12肽库成功筛选得到HCVNS5A的模拟表位,为开展用HCV模拟表位探索HCV的防治研究创造了条件.
- 钟彦伟成军陈新华王刚洪源王琳李莉张玲霞陈菊梅
- 关键词：噬菌体丙型肝炎NS5A蛋白模拟表位
- 丙型肝炎病毒包膜蛋白E2抗原模拟表位的筛选和鉴定被引量：3
- 2002年
- 目的 :筛选丙肝病毒 (HCV)包膜蛋白 (E2 )特异性噬菌体模拟表位。方法 :以抗 HCVE2的单克隆抗体作为固相筛选分子 ,对噬菌体随机七肽库进行 5轮“吸附 洗脱 扩增”的筛选过程 ,随机挑取 5 0个克隆 ,经酶联免疫吸附法 (ELISA)鉴定、交叉反应以及竞争抑制性实验 ,最后对所选克隆进行DNA序列分析 ,以确定HCVE2抗原的模拟表位。结果 :经噬菌体富集后 ,得到 12个阳性克隆 ,确定氨基酸序列XXPXYXW为HCVE2的模拟表位。结论 :用噬菌体七肽库成功筛选得到HCVE2的模拟表位 ,为开展用HCV模拟表位探索HCV的防治研究创造了条件。
- 钟彦伟成军陈新华王刚洪源李莉
- 关键词：丙型肝炎病毒模拟表位病毒包膜蛋白肽库
- 乙肝病毒核心抗原人源单链可变区抗体的筛选被引量：17
- 2002年
- 目的 筛选、鉴定乙型肝炎病毒 (HBV)核心抗原 (HBcAg)蛋白的人源单链可变区抗体 (ScFv)的编码基因 ,为细胞内表达小分子单链抗体的研究及抗HBV的基因治疗研究奠定基础。方法 采用噬菌体表面展示技术 ,以HBcAg蛋白为固相抗原 ,从噬菌体单链可变区抗体半合成库中经过 5轮“吸附 -洗脱 -扩增”筛选过程 ,获得抗原结合活性较强的HBcAg人源单链可变区抗体阳性克隆 ,并对其进行免疫检测及序列测定。结果 筛选得到的ScFv片段编码基因为 771nt,编码的产物由 2 5 7个氨基酸残基组成 ,具有典型的轻链和重链可变区结构特点以及与HBcAg结合的特异性。结论 利用噬菌体抗体库技术成功地获得了HBcAg人源单链可变区抗体的编码基因 ,并获得了可溶性单链抗体的表达。
- 钟彦伟成军王刚田小军陈新华李莉陈菊梅张玲霞
- 关键词：噬菌体展示技术乙型肝炎病毒核心抗原噬菌体抗体
