霍晨敏
- 作品数：16 被引量：98H指数：4
- 供职机构：河北经贸大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金河北省高等学校科学技术研究指导项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程文化科学更多>>
- MBP-PTP19融合蛋白载体构建及蛋白纯化被引量：2
- 2017年
- 蛋白磷酸酶在植物生长发育过程中发挥着重要的调控作用.酪氨酸蛋白磷酸酶属于蛋白磷酸酶中一个亚家族,在植物领域的研究中涉及较少.笔者所在实验室研究数据表明,酪氨酸蛋白磷酸酶19(PTP19)在植物盐响应中起负调控作用.使用MBP标签载体,构建MBP-PTP19融合蛋白表达载体,转化BL21大肠杆菌.以IPTG浓度、诱导时间、诱导温度3个因素设计L18正交实验探索MBP-PTP19蛋白的最佳诱导表达条件.找到该蛋白表达的最适诱导条件为IPTG终浓度0.1mmol/L、诱导时间4h、诱导温度37℃.该融合蛋白在上清液以及包涵体中均有分布.用直链淀粉树脂纯化得到了MBP-PTP19蛋白,并以其为抗原制备了PTP19的抗体,且抗体可识别PTP19蛋白,这为研究PTP19蛋白生化性质及其功能奠定了基础.
- 霍晨敏刘士毓辛静宁可欣李川玲商建秀
- 关键词：拟南芥酪氨酸蛋白磷酸酶正交设计
- 小麦耐盐突变体盐胁迫下的蛋白质组分析及耐盐相关基因克隆
- 该实验利用近年来发展起来的双向电泳和质谱技术对耐盐性不同的'一粒传'后代中的耐盐突变体(RH8706-49)及敏盐突变体(H8706-34)进行了比较蛋白质组学研究.采用pH 3-10的线性IPG干胶条通过双向电泳技术分...
- 霍晨敏
- 关键词：小麦盐胁迫双向电泳
- 文献传递
- 低产乙醇的葡萄酒酵母选育及发酵优化研究
- 刘增然张光一张翠茹贾艳菊霍晨敏陈颖
- 采用基因工程方法和环境适应筛选的方法获得葡萄酒酵母工程菌，引入磷酸甘油脱氢酶基因获得过表达甘油的葡萄酒酵母工程菌，然后通过环境适应进化筛选有效降低葡萄酒乙醇含量的葡萄酒酵母工程菌。获得的适应新菌株用于模拟葡萄酒发酵其乙醇...
- 关键词：
- 关键词：葡萄酒酵母菌种选育低醇葡萄酒
- GRIP-domain蛋白在植物细胞中的定位及功能分析
- 陈颖李桂琴杨虹马同锁霍晨敏郝秋娟陈连文张金良
- 该研究通过模式植物拟南芥Arl1T-DNA缺失突变体纯合体植株，观察根尖、下胚轴和叶细胞形态变化。RT-PCR技术克隆拟南芥GRIP与Arl1基因CDS序列，构建原核表达载体，进行原核表达，获得可溶性蛋白，并且进一步纯化...
- 关键词：
- 关键词：原核表达可溶性蛋白
- 微卫星标记小麦野生资源抗病基因及抗病基因的利用
- 张海泉杨虹朗杰霍晨敏高志华张金良
- 该研究利用远缘杂交和幼胚拯救方法，从抗病粗山羊草Y189和Y219中分别鉴定出1个显性抗小麦白粉病基因，暂定名为PmAeY1和PmAeY2，被定位在 5DL 和2D染色体上；从抗条锈病的粗山羊草上，分别鉴定出3个抗小麦条...
- 关键词：
- 关键词：抗病基因小麦微卫星标记野生资源粗山羊草
- 小麦耐盐突变体盐胁迫下的蛋白质组分析被引量：36
- 2004年
- 首次采用双向电泳的方法分析 1%NaCl胁迫 72h的一对小麦耐盐 (RH870 6 4 9)及敏盐突变体 (H870 6 34)的蛋白质组。经过MALDI TOF分析和数据库检索发现两者在H+ ATP酶 β亚基、谷氨酰胺合成酶前体、OEC33和RuBP羧化酶小亚基等 5个候选蛋白存在质或量的差异。这 5种蛋白均为叶绿体蛋白 。
- 霍晨敏赵宝存葛荣朝沈银柱黄占景
- 关键词：小麦突变体双向电泳
- 水稻OsDREB1A的原核表达及重组蛋白活性分析
- 2017年
- OsDREB1A是水稻冷信号传导途径中重要的转录因子。本研究将水稻日本晴OsDREB1A基因通过双酶切方法连接至MSC-TOPOII载体,并重组构建到表达载体PGEX-4T-1,获得融合蛋白表达质粒PGEX-4T-1-OsDREB1A,转化表达菌E.coli BL21(DE3)Condon Plus,诱导表达后通过亲和层析柱Glutathione agarose 4B纯化获得了分子量大小正确的OsDREB1A-GST融合蛋白,EMSA检测发现低温18℃诱导纯化的融合蛋白可以在体外成功结合CRT/DRE顺式元件。为进一步研究OsDREB1A在冷信号传导中的生物学功能奠定了基础。
- 霍晨敏商建秀王瑞菊
- 关键词：水稻原核表达凝胶阻滞分析
- 野生稻CBF/DREB1转录因子的鉴定与生物信息学分析
- 2024年
- 低温冷害是限制栽培稻地域分布和产量的重要因素之一,严重影响我国的粮食安全。以CBF/DREB1为核心的C-重复结合因子-冷调节基因(CBF-COR)途径是水稻适应低温的重要信号传导途径。基于稻属9种植物的全基因测序结果和隐马尔可夫模型(HMM)搜索,共鉴定出71个CBF/DREB1基因序列。所有基因均无内含子,由单个外显子组成。大部分DREB1s呈弱酸性,所有DREB1s亲水性平均值<0。进化树分析进一步将其分为3个组:DREB1A/1B/1H、DREB1C/1E/1F/1G和DREB1D/1I/1J,各组成员除AP2保守结构域和侧翼序列外,其他保守基序组成差别较大。适应性进化分析粳亚种和其他水稻的直系同源基因对,发现OsDREB1A/ObDREB1A、OsDREB1D/OnDREB1D、OsDREB1I/OsIDREB1I和OsDREB1J/OsIDREB1J四对基因非同义替换/同义替换(Ka/Ks)值均>1,受到正选择压力。旁系同源基因之间启动子顺式元件种类和数量差异较大,直系同源基因的启动子顺式元件种类和数量很相似。对日本晴、93-11和东乡野生稻7 d幼苗4℃冷处理2 h的实时荧光定量PCR分析发现早期冷响应基因可分为激活型(DREB1A/1B/1C/1E/1F/1G/1H)和抑制型(DREB1D/1I/1J)。在日本晴、93-11和东乡野生稻冷激活型基因中,DREB1B/1G/1H均是冷处理后响应最快的一级冷响应因子,且启动子均含有至少一个拷贝的CAMTA转录因子结合元件CM2(CCGCGT)。OrDREB1B/1C/1E/1F/1G/1H在东乡野生稻4℃冷处理4 h后的表达量均高于栽培稻同源基因的表达量。9种稻属植物的CBF/DREB1基因亚家族的分子进化分析结果为低温抗性基因的挖掘和利用提供了前期基础。
- 霍晨敏袁敏张宝文王瑞菊
- 关键词：野生稻启动子分析
- 梨多酚氧化酶基因的克隆及其转化研究
- 李桂琴李会宣许冬倩杨虹刘坤高志华霍晨敏
- 以鸭梨果皮基因组DNA为模板，克隆到的鸭梨多酚氧化酶基因的蛋白编码区含有1782个核苷酸，将该基因转入大肠杆菌，能够表达一个分子量约66kDa的蛋白，用BamHI和PvuII双酶切中间载体pGEM-T-PPO，获得了含P...
- 关键词：
- 关键词：多酚氧化酶酶基因克隆
- 植物冷信号传导机制研究进展被引量：4
- 2016年
- 低温胁迫能限制植物地理分布并影响作物产量,但是在适宜的低温条件下处理一段时间后植物就可以获得更强的抗冷和抗冻能力,这个过程称为冷驯化。在冷驯化的过程中,植物感知环境低温,通过一系列信号传导事件调节耐冷相关基因的表达,提高植物的耐冷性。介绍了目前冷信号传导机制研究的一些新进展:包括新发现的冷信号传导途径的上游组分CHILLINGTOLERANCE DIVERGENCE 1(COLD1)和OPEN STOMATA1(OST1);对冷信号途径中关键转录因子C-REPEAT BINDING FACTORS(CBFs)进行CRISPR/Cas9敲除后的转录组测序结果以及短时间冷胁迫处理的蛋白质组学研究结果等。并且根据这些研究进展,总结了一个冷信号传导途径的模式图。
- 霍晨敏汤文强
- 关键词：低温胁迫冷驯化信号传导转录组蛋白质组
