黄伟伟
- 作品数:8 被引量:25H指数:4
- 供职机构:西北农林科技大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金陕西省自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生文化科学更多>>
- MiR-26b是前列腺癌中的抑癌微RNA(英文)被引量:4
- 2017年
- 微RNAs(又称miRNAs或miRs)是一类长度为19~24个核苷酸的单链非编码RNA分子.miRNA通过与其靶向的mRNA分子序列特异性互补配对,调节mRNA表达水平,抑制转录后的蛋白质翻译.miRNA在肿瘤中既可作为致癌因子也可作为抑癌因子.本研究前期已报道miR-26b在前列腺癌细胞系中低表达,并且抑制细胞自噬.本研究进一步全面揭示miR-26b对前列腺肿瘤细胞的作用.我们发现过表达miR-26b能够在体外抑制前列腺癌细胞的增殖和侵袭,并抑制裸鼠体内原位异种前列腺肿瘤的生长.为了探究miR-26b对前列腺癌细胞增殖和侵袭的潜在调控机制,我们进行了表达谱芯片鉴定miR-26b调控基因.表达谱芯片分析表明,在前列腺癌细胞系PC-3中过表达miR-26b后,显著上调的基因57个,显著下调的基因55个(变化倍数均大于2,且P值小于0.05).差异基因的功能多与细胞增殖、凋亡调控、蛋白质磷酸化和泛素化修饰调控过程相关,并且富集在多种信号通路中,例如TNF和TGF-β信号通路.在这些筛选出的基因中,CEACAM6表达水平下调2.17倍;序列分析及实验验证表明,CEACAM6的3′UTR区存在miR-26b的互补序列,是miR-26b的直接靶标.本研究证明了miR-26b能够靶向结合抑制CEACAM6的表达,从而抑制前列腺癌细胞在体外和体内的细胞增殖和侵袭活性,miR-26b是前列腺癌中的抑癌microRNA.
- Daguia Zambe John Clotaire王蕴非黄伟伟赵飞张斌雷鸣
- 关键词:前列腺癌细胞表达谱芯片CEACAM6
- ULK1启动子区含有抑制ULK1转录的G4结构
- 2021年
- 目的:研究G四联体(G-quadruplex,G4)结构对UNC-51样激酶1(UNC-51-like kinase 1,ULK1)基因的转录调控作用。方法:分析ULK1转录起始点上游1000 bp启动子序列的G/C含量;预测ULK1启动子区G4形成序列,利用圆二色谱、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和DNA银染鉴定G4;通过构建ULK1启动子报告基因质粒和用G4配体处理人前列腺癌DU-145细胞,结合报告基因检测、RT-qPCR和Western blot实验检测G4对ULK1转录的调控作用。结果:ULK1启动子区G/C含量丰富;预测发现10条G4形成序列;体外实验表明G4形成序列可以形成G4结构;细胞实验表明ULK1启动子区的G4结构负调控ULK1的转录。结论:ULK1启动子区可形成抑制ULK1转录的G4结构。这为揭示ULK1的转录调控机制提供了新的线索。
- 刘雪萍黄伟伟李晓梅
- 关键词:圆二色谱转录调控
- SENP1启动子G-四链体鉴定及其作用研究
- 2020年
- 目的:研究G-四链体(G4)对SUMO特异性蛋白酶1(SUMO-specific proteases 1,SENP1)基因的转录调控作用。方法:克隆不同的SENP1启动子片段构建SENP1启动子报告质粒,通过报告基因检测鉴定SENP1启动子核心转录调控区;分析SENP1启动子核心转录调控区序列,并进行G4形成序列预测;合成G4形成序列寡核苷酸,利用圆二色谱分析检测G4形成序列寡核苷酸的拓扑结构;通过G4配体TMPyP4处理和过表达G4解旋酶G4R1结合报告基因检测和Western blot鉴定启动子G4对SENP1转录表达的调控作用。结果:发现-910^+226区域是SENP1启动子的核心转录调控区,序列富含G/C;生信分析发现SENP1启动子核心区存在G4形成序列;圆二色谱分析证实SENP1启动子G4形成序列能够形成G4结构;报告基因检测和Western blot检测发现启动子G4对SENP1转录表达具有抑制作用。结论:SENP1启动子核心转录调控区存在G4结构并对其转录表达具有抑制作用,为揭示SENP1在生理和病理过程中的作用机制提供新的研究思路和试验线索。
- 周炎鑫韩梦刘娜女黄伟伟
- 小鼠骨髓和睾丸细胞在细胞生物学实验染色体制备中的应用比较被引量:2
- 2018年
- 染色体制备技术是细胞生物学的一项核心基础技术,也是高校细胞生物学实验常开的一项实验。然而染色体制备技术复杂,操作环节多,耗时长,影响因素多,在实际实验中获得理想染色体的成功率很低,因此需要进一步改进优化,提高成功率,使学生真正掌握染色体标本的制备技术,了解染色体的数目以及形态特征。本文比较了利用小鼠骨髓和睾丸细胞制备染色体的优劣,并讨论了染色体制备过程中的注意事项和改进方法。
- 黄伟伟李绍军高梅张斌
- 关键词:骨髓细胞睾丸细胞染色体制备
- 雷公藤甲素诱导HeLa细胞p53依赖的自噬和凋亡被引量:6
- 2016年
- 自噬与凋亡被认为是细胞程序性死亡的两种重要途径,二者的交互联系对阐明药物的抗肿瘤机理有重要价值.众多的研究表明,雷公藤甲素对多种肿瘤细胞都具有显著的抑制作用.细胞凋亡与自噬可被相同的因素所诱导,p53蛋白可以同时对二者起调控作用,在自噬与凋亡的交互作用(crosstalk)中扮演着重要角色.本文以He La细胞为模型,研究雷公藤甲素诱导He La细胞发生自噬和凋亡的机制,并通过抑制p53依赖的转录,研究雷公藤甲素诱导He La细胞p53依赖的自噬和凋亡交互联系.
- 张斌王蕴非赵飞雷鸣黄伟伟
- 关键词:雷公藤甲素P53自噬凋亡
- 槲皮素通过G4调控癌基因表达影响肿瘤细胞增殖与凋亡被引量:4
- 2019年
- 该研究采用CCK-8法、流式细胞术、免疫印迹法、实时定量PCR和体外结合实验等方法检测了槲皮素对Hep-2和MCF-7细胞生长和凋亡,以及对受G4调控基因表达的影响。结果显示,槲皮素对Hep-2和MCF-7细胞生长具有明显抑制作用,并诱导细胞周期停滞在S期;槲皮素诱导Hep-2和MCF-7细胞凋亡,表现出磷脂酰丝氨酸外翻、细胞膜通透性增加、染色质凝集、caspase活化等凋亡特征;槲皮素显著抑制c-Myc、KRAS、YY1等受G4调控基因的表达;槲皮素促进c-Myc启动子区G4形成序列Pu27形成G4结构并抑制核蛋白与其结合。以上结果表明,槲皮素可能通过促进细胞内G4形成序列形成稳定G4结构并抑制G4解旋酶对其解旋,引起受G4调控的肿瘤相关基因表达降低,最终抑制肿瘤细胞生长并诱导细胞凋亡。
- 马云青李晓梅刘雪萍韩洋洋黄伟伟
- 关键词:槲皮素细胞增殖细胞凋亡基因表达
- PEG诱导鸡血细胞融合实验方法比较被引量:2
- 2018年
- 细胞融合技术是细胞生物学的一项核心技术,在科学研究、医药开发、农业育种等方面有着广泛应用。PEG法诱导鸡血细胞融合实验也被作为细胞生物学本科实验的一项重要内容,但在实验课程中的融合效果不佳。笔者查阅相关细胞生物学实验指导教材和文献,发现存在两种截然不同的PEG法诱导鸡血细胞融合操作方法。因此,本文对两种方法进行了比较,并进一步讨论了影响PEG法诱导鸡血细胞融合效率的重要因素和改进方法。
- 黄伟伟颜华高梅李绍军
- 关键词:细胞融合PEG
- 蛋白质数据库(PDB)在基础生物化学课程教学中的应用被引量:7
- 2018年
- 蛋白质的结构与功能是基础生物化学课程教学中的重点和难点,对生物化学课程知识体系的构建起至关重要的作用。蛋白质分子结构抽象,功能复杂,文章将蛋白质结构数据库中丰富的立体结构资源引入课程教学,对于提升学生的学习兴趣和教学效果起积极作用。
- 张斌黄伟伟
- 关键词:生物化学蛋白质PDB